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  潛新兒 2017-04-25 00:00:00

  抽提重組質(zhì)粒時為什么不會提取出大腸桿菌自身的質(zhì)粒 大腸桿菌產(chǎn)生胰島素并進行批量生產(chǎn)的原理是運用到了現(xiàn)代生物技術(shù)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，它是先將人胰島素基因從人的染色體上分離出來，插入從細菌細胞中提取出來的質(zhì)粒(一種小圓環(huán)狀DNA)中，再將這個合并起來的、帶有胰島素基因的質(zhì)粒，轉(zhuǎn)移入大腸桿菌的細胞中，隨后該胰島素基因會指導(dǎo)大腸桿菌細胞產(chǎn)生胰島素，人類即可將這些胰島素提取并收集出來，用于ZL糖尿病病人. 那么如何利用大腸桿菌生產(chǎn)胰島素 呢?下面從基因工程角度說一下. 1.提取目的基因: 既從人的DNA中提取胰島素基因，可使用限制性內(nèi)切酶將目的基因從原DNA中分離. 2.提取質(zhì)粒: 使用細胞工程，培養(yǎng)大腸桿菌，從大腸桿菌的細胞質(zhì)中提取質(zhì)粒，質(zhì)粒為環(huán)狀. 3.基因重組: 取出目的基因與質(zhì)粒，先利用同種限制性內(nèi)切酶將質(zhì)粒切開，再使用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒"縫合"，形成一個能表達出胰島素的DNA質(zhì)粒. 4.將質(zhì)粒送回大腸桿菌: 再大腸桿菌的培養(yǎng)液中加入含有Ca+的物質(zhì)，如CaCl2，這使細胞會吸收外源基因.此時將重組的質(zhì)粒也放入培養(yǎng)液中，大腸桿菌便會將重組質(zhì)粒吸收. 5.胰島素的產(chǎn)生: 再大腸桿菌內(nèi)，質(zhì)粒通過表達轉(zhuǎn)錄與翻譯后，便產(chǎn)生出胰島素蛋白質(zhì).通過大腸桿菌的大量繁衍，便可大量生產(chǎn)出胰島素!

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