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- 上海映戡實(shí)業(yè)有限公司 2019-08-14 14:02:26
- <p><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);Microsoft YaHei", SimSun, arial, sans-serif; text-indent: 32px;" data-x-flag="14_2">答:在基因操作實(shí)驗(yàn)中,保持DNA的穩(wěn)定性以及不會(huì)干擾緩沖液成分是選擇緩沖液的主要原則。盡管磷酸鹽緩沖系統(tǒng)(pKa=7.2)和硼酸系統(tǒng)(pKa=9.24)等均符合細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的生理范圍(pH),,能夠用作NA的保存液,然而在轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)時(shí),磷酸根離子的種類及數(shù)量將與Ca2+產(chǎn)生Ca3(PO4)2沉淀。在DNA反應(yīng)時(shí),不同的酶對(duì)輔助因子的種類及數(shù)量有著不同的要求,有的則要求低鹽濃度,有的要求高離子濃度,采用Tris-HCl(pKa=8.0)的緩沖系統(tǒng),由于對(duì)于金屬離子的干擾作用不存在,ris-HCl系統(tǒng)大都用于DNA的提取或保存,而TE緩沖液中的EDTA能夠使得DNA的活性更加的穩(wěn)定。</span></p>
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