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問(wèn)答社區(qū)

超聲破碎細(xì)胞和ripa裂解細(xì)胞的區(qū)別

魔石匠L柿 2017-10-29 17:15:30 1394  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 獨(dú)倚夜空 2017-10-30 00:00:00
    RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。 RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種,根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類。關(guān)于不同的RIPA裂解液以及我們生產(chǎn)的其它裂解液的主要特點(diǎn)和差異,以及如何選擇裂解液可參考附錄。 RIPA裂解液(強(qiáng))的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1%TritonX-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate,25mM β-glycerophosphate,1mM EDTA,1mM Na3VO4,0.5 ug/ml leupeptin等多種YZ劑??梢杂行Z蛋白降解。 RIPA裂解液(中)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodium deoxycholate。

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TRIS—HCL可以保持細(xì)胞裂解緩沖液的PH值z(mì)ui佳狀態(tài),所以常用它作為裂解緩沖液的主要成分。裂解緩沖液有助于打開(kāi)細(xì)胞,可以對(duì)細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行篩選,例如鹽、清潔劑、螯合劑和抑zhi劑,以及一些堿性化學(xué)品。它不僅可以區(qū)分篩選甚至還可以去除這些物質(zhì)。

裂解液除了生物緩沖劑之外,還包括一種螯合劑和抑zhi劑,例如乙二胺四乙酸(EDTA),因?yàn)檫@種化學(xué)物質(zhì)與帶有兩個(gè)正電荷的金屬離子(例如鎂和鈣)結(jié)合,可以使它們不能用于其他反應(yīng)。許多 DNA 酶(咀嚼 DNA 的蛋白質(zhì))和蛋白酶(將其他蛋白質(zhì)切碎的蛋白質(zhì))需要鎂離子才能發(fā)揮作用,因此通過(guò)剝奪這些關(guān)鍵成分,EDTA 有助于降低蛋白酶或 DNA 酶的活性水平。

德晟為專業(yè)生產(chǎn)生物緩沖劑和EDTA的廠家,現(xiàn)在生產(chǎn)的生物緩沖劑類產(chǎn)品有TRIS、TRIS-HCL、 HEPES、 TAPS 、MOPS、 CAPS、 BICINE、 EPPS、 PEP等一系列生物緩沖液,目前成立已有十多年,擁有十分豐富的研發(fā)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)與產(chǎn)品知識(shí),可為客戶提供大量技術(shù)支持與售后保障。如有需要?dú)g迎隨時(shí)聯(lián)系我們!


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