請問各位高手，HPLC檢測走基線怎么是這個樣子

shame沙贊 2016-11-08 14:03:40 489 瀏覽

本人用HPLC檢測多環(huán)芳烴，色譜柱ODS-3，流動相65乙腈，柱溫30度，紫外檢測器251nm，在走基線的時候，很快走平，但是進樣以后檢測不到物質（參考GB，15分鐘左右就能出峰），索性將柱溫提高到40度（參考了文獻），走基線的時候圖變成了這個樣子。請問大神為什么... 本人用HPLC檢測多環(huán)芳烴，色譜柱ODS-3，流動相65乙腈，柱溫30度，紫外檢測器251nm，在走基線的時候，很快走平，但是進樣以后檢測不到物質（參考GB，15分鐘左右就能出峰），索性將柱溫提高到40度（參考了文獻），走基線的時候圖變成了這個樣子。請問大神為什么30度的時候檢測不到峰？然后40度時這樣的基線是什么情況？望指點展開

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星Emperor 2016-11-09 00:00:00

原因解決方法 1、柱溫波動。（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。） 1、控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器圖 2、流動相不均勻。（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導致的漂移。） 2、使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣，使用中使用氦氣。 3、流通池被污染或有氣體 3、用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸） 4、檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產生噪音基線） 4、取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。 5、流動相配比不當或流速變化 5、更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。 6、柱平衡慢，特別是流動相發(fā)生變化時 6、用中等強度的溶劑進行沖洗，更改流動相時，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。 7、流動相污染、變質或由低品質溶劑配成 7、檢查流動相的組成。使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑 8、樣品中有強保留的物質（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。 8、使用保護柱，如有必要，在進樣之間...

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