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問(wèn)答社區(qū)

比色測(cè)定的操作要點(diǎn)是什么?方法的基本原理是什么?

Lin雨?yáng)| 2017-11-24 14:15:14 2318  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • ok不是過(guò)客111 2017-11-25 05:10:09
    許多化學(xué)物質(zhì)的溶液具有顏色(無(wú)色的化合物也可以加顯色劑經(jīng)反應(yīng)生成有色物質(zhì)),當(dāng)有色溶液的溶度改變時(shí),顏色的深淺也隨之改變,濃度愈大,顏色愈深。因此,可以用比較溶液顏色深淺的方法來(lái)測(cè)定有色溶液的濃度。這種方法叫做比色分析法。 一、 朗伯—比爾定律 當(dāng)一束單色光通過(guò)有色溶液時(shí),入射光線(xiàn)的一部分被器皿反射回來(lái),一部分被溶液吸收,另一部分則透過(guò)溶液,如圖所示。它們之間有以下關(guān)系: Io=Ia+Ir+It (1-1) 式中:Io—入射光強(qiáng)度 Ia—吸收光強(qiáng)度 Ir—反射光強(qiáng)度 It—透過(guò)光強(qiáng)度 由于在實(shí)際測(cè)定時(shí),所用的比色皿都是同質(zhì)料用規(guī)格的。反射光的強(qiáng)度為一定值,不會(huì)引起測(cè)量誤差,所以反射光的影響可以不加考慮。則上式可簡(jiǎn)化為: Io=Ia+It (1-2) 從式1-2可知:當(dāng)入射光強(qiáng)度Io為一定時(shí),被吸收光強(qiáng)度Ia愈大,則透過(guò)光強(qiáng)度It愈小。也就是說(shuō):光強(qiáng)度的減弱僅與有色溶液對(duì)光線(xiàn)的吸收有關(guān)。 那么,溶液對(duì)光線(xiàn)的吸收與哪些因素有關(guān)呢?實(shí)驗(yàn)證明:溶液的濃度C愈大,液層厚度L愈厚(即光線(xiàn)在溶液中所經(jīng)過(guò)的路程愈長(zhǎng)),則溶液對(duì)光線(xiàn)吸收的愈多。它們之間的關(guān)系有下式?jīng)Q定: lg = KCL (1-3) 這個(gè)公式就是朗伯—比爾(Lambert---Beer)定律。 公式中的K稱(chēng)為吸光系數(shù),它表示有色溶液在單位濃度和單位厚度時(shí)的吸光度。在入射光的波長(zhǎng)、溶液種類(lèi)和溫度一定的條件下,K為定值。吸光系數(shù)是有色化合物的重要特性之一,在比色分析中有著重要的意義。K值愈大,表示該物質(zhì)對(duì)光的吸收能力愈強(qiáng),濃度改變時(shí)引起吸光度的改變愈顯著,因此比色測(cè)定時(shí)靈敏度愈高。 朗伯-比爾定律即有色溶液對(duì)一定強(qiáng)度光的吸收程度,與液層厚度和溶液中有色物質(zhì)濃度的乘積成正比。其中朗伯定律說(shuō)明吸收光與厚度間的關(guān)系;比爾定律說(shuō)明吸收光與濃度間的關(guān)系。 朗伯—比爾定律在光電比色計(jì)中的應(yīng)用 假定有兩種有色溶液,其中一種是已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,另一種是待測(cè)溶液。根據(jù)公式: 在標(biāo)準(zhǔn)溶液中:As=KsCsLs (1-4) 在待測(cè)溶液中:Ax=kxCxLx (1-5) 將式1-4除以式1-5可得: = 1-6 如果上述兩種溶液的液層厚度相等、溫度相同而且是同一種物質(zhì)的兩種不同濃度的溶液,測(cè)定時(shí)所選用的單色光的波長(zhǎng)亦相同,則有: Ls=Lx、Ks=Kx ,代入式1-6可得: = 1-7 由此可見(jiàn),在上述條件下,吸光度與濃度成正比。這一關(guān)系式就是光電比色計(jì)的設(shè)計(jì)依據(jù),也是比色分析的基本計(jì)算公式之一。式中標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度Cs為已知,As和Ax可用光電比色計(jì)測(cè)量出來(lái),則待測(cè)溶液的濃度Cx即可求出: Cx = × Cs 1-8 由于在實(shí)際測(cè)定時(shí),標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)溶液都要加以稀釋?zhuān)以趫?bào)告結(jié)果時(shí),多以100毫升(或1000毫升)中的含量來(lái)表示。因此,在實(shí)際計(jì)算時(shí),就需要在上式中乘上稀釋因數(shù)。 求待測(cè)溶液濃度的方法有:直接比較法(計(jì)算法)、因數(shù)法和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法三種。這些方法在“生物化學(xué)及生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)”課程中有介紹。 波長(zhǎng)的選擇: 由于有色溶液對(duì)光的吸收具有選擇性,因此進(jìn)行比色測(cè)定時(shí),濾光片必須加以選擇,否則靈敏度很低,導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確。選擇濾光的一般原則是:濾光片Z大透過(guò)的光線(xiàn)應(yīng)該是溶液Z大吸收的光線(xiàn)。從顏色上看,濾光片的顏色與待測(cè)溶液的顏色應(yīng)為“互補(bǔ)色”。 什么叫做互補(bǔ)色呢?凡是兩種顏色相加后能得到白色,則此兩種顏色就稱(chēng)為“互補(bǔ)色”,圖中直接相對(duì)的兩種顏色,均為互補(bǔ)色。 為什么選擇濾光片時(shí),要使濾光片的顏色與待測(cè)溶液的顏色為互補(bǔ)色呢?這是因?yàn)闉V光片和有色溶液具有相似的透光特性,與它們本身顏色相同的色光,能夠Z大限度地透過(guò)。而與它們本身顏色成互補(bǔ)的色光都能被Z大地吸收。 希望能夠幫助你,污水凈化團(tuán)隊(duì)竭誠(chéng)為你服務(wù)!

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