氣相色譜儀的操作要點(diǎn)

　　移液管的操作要點(diǎn)與注意事項(xiàng)

　　移液管又稱(chēng)單標(biāo)線(xiàn)吸量管，用于準(zhǔn)確移取一定量液體，是實(shí)驗(yàn)室中日常檢驗(yàn)常用的玻璃儀器。在含量測(cè)定中，移液管的質(zhì)量好壞和使用方法的對(duì)終數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性有很大影響。為保證所取液體體積的準(zhǔn)確性與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，我們可以注意以下操作要點(diǎn)。

　　1、檢查

　　使用前首先應(yīng)檢查移液管是否已標(biāo)定，不能使用未經(jīng)標(biāo)定過(guò)的移液管;其次應(yīng)檢查管口和JD有無(wú)破損和堵塞，如有則不能使用;后應(yīng)檢查移液管是否潔凈，使用不潔凈的移液管會(huì)使液體附著在管壁較多，會(huì)使實(shí)際體積與所需體積偏離較大，或引入新的雜質(zhì)。

　　2、潤(rùn)洗

　　吸取液體前需要潤(rùn)洗，潤(rùn)洗過(guò)程不能對(duì)待吸取液體造成污染，特別是當(dāng)管壁未干有水珠時(shí)，吸取速度要快，保證吸出液體不回流，避免管內(nèi)液體對(duì)帶吸取液體造成稀釋。如移液管JD有液體潤(rùn)洗前應(yīng)用濾紙吸干，或直接換一根干燥潔凈的移液管。一般潤(rùn)洗三次即可，可根據(jù)需要增加潤(rùn)洗次數(shù)。

　　3、吸取

　　吸取液體時(shí)移液管插入液面不能過(guò)深也不能過(guò)淺，過(guò)淺可能會(huì)造成吸空(吸空不僅會(huì)污染洗耳球，且如吸取的是強(qiáng)酸強(qiáng)堿等有毒試劑，吸空可能使液體濺出，很危險(xiǎn))，過(guò)深會(huì)使管壁外粘附液體較多而影響準(zhǔn)確性。

　　4、放出

　　放出溶液前應(yīng)食指微松開(kāi)調(diào)節(jié)液面，如果食指或管口是濕的可能會(huì)放不出液體或者放出速度難以掌控，這時(shí)好用濾紙將手指和管口徹底吸干再重新吸取液體。且放出液體時(shí)需要用食指控制流出速度，是液體勻速的流出，有些液體容易掛液如果放出速度過(guò)快會(huì)導(dǎo)致管壁殘余液體過(guò)多對(duì)結(jié)果影響較大需要注意。放出液體后應(yīng)觀(guān)察移液管JD液體是否過(guò)多，如過(guò)多需要繼續(xù)靠壁并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)。

　　以上簡(jiǎn)單介紹了移液管的幾點(diǎn)操作要點(diǎn)，在實(shí)際工作工我們還有更多需要注意的地方。我們不僅僅是需要注意移液管的使用，在平時(shí)的所以檢驗(yàn)操作中應(yīng)嚴(yán)格要求自己，注重細(xì)節(jié)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度與可靠性。移液管的操作要點(diǎn)與注意事項(xiàng),先和大家介紹到這，如果想要了解更多凍存管信息，可以關(guān)注天津本生生物，專(zhuān)業(yè)給生物醫(yī)藥客戶(hù)提供生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)耗材，歡迎廣大客戶(hù)來(lái)電咨詢(xún)：18502669006。

自動(dòng)開(kāi)口閃點(diǎn)測(cè)定儀適用標(biāo)準(zhǔn)： GB/T267-88 、ASTM D92、GB/T3536-2008，采用觸摸屏代替鍵盤(pán)操作，液晶大屏幕LCD全中文顯示人機(jī)對(duì)話(huà)界面，全屏觸摸按鍵提示輸入，方便快捷，開(kāi)放式、模糊控制集成軟件，模塊化結(jié)構(gòu)，符合國(guó)標(biāo)、美國(guó)、歐盟等標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用于鐵路，航空，電力，石油行業(yè)及科研部門(mén)等。

開(kāi)口閃點(diǎn)測(cè)定儀操作時(shí)，需要注意的幾點(diǎn)事項(xiàng)，下面我們給您介紹一下：

  1、務(wù)必使用帶可靠接地的電源插座為儀器供電，測(cè)試過(guò)程中油杯及其附近有高熱，禁止觸碰！

  2、測(cè)試過(guò)程中必須有人值守，測(cè)試完畢如有樣品燃燒及時(shí)用油杯蓋蓋住油杯，油杯蓋有高熱，禁止觸碰！

  3、禁止用手扳動(dòng)點(diǎn)火劃掃桿，否則將造成儀器徹底損壞。

  4、儀器有點(diǎn)火裝置，在通風(fēng)廚內(nèi)操作（不要開(kāi)風(fēng)機(jī)），防止外部氣流造成測(cè)試誤差。

  5、溫度傳感器由玻璃制成，使用時(shí)不要與其它物品相碰。

  6、每次換樣品，都應(yīng)將開(kāi)口杯清洗干凈，開(kāi)口杯與加熱器之間不應(yīng)有其它物品間隔，以便保持良好的導(dǎo)熱。

  7、測(cè)試頭切勿用手或其它物品去壓、抬，點(diǎn)火桿不要用手去推拉，以免造成機(jī)械損傷。

　　ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。

　　一、標(biāo)本的采取和保存

　　可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

　　血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

　　二、試劑的準(zhǔn)備

　　按試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。

　　三、加樣

　　在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。

　　四、保溫

　　在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過(guò)程稱(chēng)為溫育(incubation)，有人稱(chēng)之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。

　　ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

　　溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為徹底，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜，以形成最多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng)，在ELISA中一般不予采用。

　　保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng)，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育。室溫溫育時(shí)，ELISA板只要平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。