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考馬斯亮藍法測定可溶性蛋白質(zhì)含量的優(yōu)缺點?

夏龍?zhí)扉L地久 2008-10-24 01:02:21 719  瀏覽
  • 急需答案!先謝過了??! 環(huán)境生物學方面的實驗!

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  • xuan5036126 2008-10-25 00:00:00
    是的

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  • ningboyang1215 2008-10-25 00:00:00
    優(yōu)點:染色簡單迅速,干擾物質(zhì)少,靈敏度高。 缺點: 一般風光光度法都有較大的機器誤差(重復性較差),為了數(shù)據(jù)準確需要每次進行標準曲線的測定。 生物測定常用試劑:sds和Triton對該方法有干擾,限制了該法的使用。

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  • 櫻風旋律 2017-09-02 22:46:18
    Bradford法的突出優(yōu)點是: (1)靈敏度高,據(jù)估計比Lowry法約高四倍,其Z低蛋白質(zhì)檢測量可達1mg。這是因為蛋白質(zhì)與染料結(jié)合后產(chǎn)生的顏色變化很大,蛋白質(zhì)-染料復合物有更高的消光系數(shù),因而光吸收值隨蛋白質(zhì)濃度的變化比Lowry法要大的多。 (2)測定快速、簡便,只需加一種試劑。完成一個樣品的測定,只需要5分鐘左右。由于染料與蛋白質(zhì)結(jié)合的過程,大約只要2分鐘即可完成,其顏色可以在1小時內(nèi)保持穩(wěn)定,且在5分鐘至20分鐘之間,顏色的穩(wěn)定性Z好。因而完全不用像Lowry法那樣費時和嚴格地控制時間。 (3)干擾物質(zhì)少。如干擾Lowry法的K 、Na 、Mg2 離子、Tris緩沖液、糖和蔗糖、甘油、巰基乙醇、EDTA等均不干擾此測定法。 此法的缺點是: (1)由于各種蛋白質(zhì)中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此Bradford法用于不同蛋白質(zhì)測定時有較大的偏差,在制作 標準曲線時通常選用 g—球蛋白為標準蛋白質(zhì),以減少這方面的偏差。 (2)仍有一些物質(zhì)干擾此法的測定,主要的干擾物質(zhì)有:去污劑、 Triton X-100、十二烷基硫酸鈉(SDS)和0.1N的NaOH。(如同0.1N的酸干擾Lowary法一樣)。 (3)標準曲線也有輕微的非線性,因而不能用Beer定律進行計算,而只能用標準曲線來測定未知蛋白質(zhì)的濃度。

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1 前言

豆乳是黃豆加水、磨成汁后再煮熟的飲料。豆乳飲料營養(yǎng)非常豐富,且易于消化吸收,它是數(shù)百種天然植物中Z受營養(yǎng)學家推薦的食物。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定》標準,對某品牌濃香豆乳進行蛋白質(zhì)含量的測定。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平。

2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無水硫酸鉀 3g 和分析純無水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。

3 實驗方法

3.1 取樣

稱取樣品 3.0g(精確值 0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化劑 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 濃硫酸。

3.3 消解

利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過程采用曲線升溫模式,設定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設置

             階段            溫度/℃          保持/min              備注
               1             200               20 不加排廢罩,揮發(fā)水分
               2             230               20
               3             350               20
               4             420               90

3.4測試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設置

      硼酸    稀釋水      堿液    蒸餾量  蛋白系數(shù)   蒸汽流量   滴定酸
     25mL     30mL     40mL      5min      6.25     0.1169mol/L

4 測試結(jié)果

4.1 實驗結(jié)果

       名稱   樣品重量 g     氮含量%蛋白質(zhì)含量%     平均值%       RSD%



       豆乳

      3.1171     0.4887     3.0541



      3.0592



        0.13

      3.0504     0.4901     3.0632
      3.1046     0.4899     3.0617
      3.1745     0.4892     3.0578

4.2 結(jié)論

通過實驗數(shù)據(jù)可以看出,測定該豆乳樣品的粗蛋白平均值為 3.0592%。

豆乳樣品包裝袋上營養(yǎng)成分表中蛋白質(zhì)標示值為 3.0g/100g,樣品測定的蛋白質(zhì)平均值符合《GB 28050-2011 食品安全國家標準 預包裝食品營養(yǎng)標簽通則》要求的食品中蛋白質(zhì)的允許誤差范圍≧80%標示值。

參考文獻

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定[S]. [2] GB 28050-2011 食品安全國家標準 預包裝食品營養(yǎng)標簽通則[S].


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凱氏定氮法測定干海苔中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

干海苔是經(jīng)過一次加工后而成的海苔,它是一種高蛋白低脂肪的食物,五張海苔片的蛋白質(zhì)含量約等于一個雞蛋,并且富含維生素及鉀、鈣、鎂、磷等微量元素。海苔中所含藻膽蛋白具有降血糖的好處。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定》標準,對某品牌海苔進行蛋白質(zhì)含量的測定。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平、超高速粉碎機。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無水硫酸鉀 3g 和分析純無水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實驗方法

3.1 樣品制備

將干海苔片粉碎,過篩,105℃烘干 2 小時,放入干燥器中備用。


3.2 取樣

稱取樣品 0.5g(精確值 0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化劑 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 濃硫酸。


3.3 消解

利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過程采用曲線升溫模式,設定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設置


3.4 測試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設置


4 測試結(jié)果

4.1 實驗結(jié)果


4.2 結(jié)論

通過實驗數(shù)據(jù)可以看出,測定海苔樣品的粗蛋白平均值為 33.0852%。

海苔包裝袋上營養(yǎng)成分表中蛋白質(zhì)標示值為 35.3g/100g,通過實驗數(shù)據(jù)可以看出,該樣品測定的粗蛋白平均值均符合《GB 28050-2011 食品安全國家標準 預包裝食品營養(yǎng)標簽通則》要求的食品中蛋白質(zhì)的允許誤差范圍≧80%標示值。


參考文獻

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定[S]. 

[2] GB 28050-2011 食品安全國家標準 預包裝食品營養(yǎng)標簽通則[S].

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凱氏定氮法測定谷物粉中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

隨著人們生活水平的提高,對健康的關注度也越來越高。谷物粉作為一種健康時尚,成了很多人都關心的話題。谷物粉是各種糧食、雜糧、豆類及藥食兩用類原料經(jīng)研磨后再精制而成的一種粉劑類產(chǎn)品,其中包含如枸杞、茯苓、金銀花、決明子、火麻仁、萊菔籽、山核桃仁、薏米、沙棘等 100 多種藥食同源的食材,既保證了均衡營養(yǎng)的釋放,又保證了膳食纖維的含量,也同時提高了身體得吸收既完整又有吸收能力。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定》測定谷物粉中的蛋白質(zhì)含量。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無水硫酸鉀 3g 和分析純無水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實驗方法

3.1 取樣

精確稱取混勻樣品 0.5g 左右(精確值 0.1mg),用稱量紙包好放入消化管內(nèi),然后分別加入 3g 硫酸鉀與 0.2g 硫酸銅,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過程采用曲線升溫模式,設定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設置


3.3 測試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設置


4 測試結(jié)果

4.1 實驗結(jié)果

4.2 結(jié)論

通過實驗數(shù)據(jù)可以看出,測定谷物粉中蛋白質(zhì)含量的平均值為 18.17%。

以上數(shù)據(jù)顯示,使用 K1160 全自動凱氏定氮儀測定谷物粉中蛋白質(zhì)含量,所得結(jié)果誤差符合《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定》標準要求的兩個測定值的JD差值不得超過算術(shù)平均值的 10%。


參考文獻

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定[S].

2020-12-08 15:02:16 564 0
凱氏定氮法測定米餅中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

米餅是一種以大米為原料,主料是秈米或粳米,添加芝麻、粟和鹽等配料,經(jīng)浸泡、制粉、壓坯成型、烘干、焙烤、調(diào)味等單元操作而加工成的糕點。它具有低脂肪、易消化、口感松脆等特點,米餅不使用黏接劑使米粒相連,是低熱值的膨化制品。若用糙米,營養(yǎng)素含量多且高,又能滿足人們對低熱量和高膳食纖維的要求。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定》測定米餅中的蛋白質(zhì)含量。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平,超高速粉碎機。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無水硫酸鉀 3g 和分析純無水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實驗方法

3.1 取樣

將樣品粉碎,精確稱取樣品 0.5g 左右(精確值 0.1mg),用稱量紙包好放入消化管內(nèi),然后分別加入 3g 硫酸鉀與 0.2g 硫酸銅,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過程采用曲線升溫模式,設定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設置


3.3 測試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設置


4 測試結(jié)果

4.1 實驗結(jié)果


4.2 結(jié)論

通過實驗數(shù)據(jù)可以看出,測定米餅中蛋白質(zhì)含量的平均值為 6.61%。

以上數(shù)據(jù)顯示,使用 K1160 全自動凱氏定氮儀測定米餅中蛋白質(zhì)含量,所得結(jié)果誤差符合《GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定》標準要求的兩個測定值的JD差值不得超過算術(shù)平均值的 10%。


參考文獻

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定[S].

2020-12-21 13:24:17 533 0

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