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問(wèn)答社區(qū)

bradford法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的優(yōu)點(diǎn)有哪些

qq963287231 2015-04-07 07:42:41 823  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • auroralqh 2015-04-08 00:00:00
    Bradford法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度 (一)實(shí)驗(yàn)原理 雙縮脲法(Biuret法)和Folin—酚試劑法(Lowry法)的明顯缺點(diǎn)和許多限制,促使科學(xué)家們?nèi)ふ腋玫牡?白質(zhì)溶液測(cè)定的方法. 1976年由Bradford建立的考馬斯亮蘭法(Bradford法),是根據(jù)蛋白質(zhì)與染料相結(jié)合的原理設(shè)計(jì)的.這種蛋白 質(zhì)測(cè)定法具有超過(guò)其他幾種方法的突出優(yōu)點(diǎn),因而正在得到廣泛的應(yīng)用.這一方法是目前靈敏度Z高的蛋白質(zhì)測(cè)定 法. 考馬斯亮蘭G-250染料,在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合,使染料的Z大吸收峰的位置(max),由465nm變?yōu)?95n m,溶液的顏色也由棕黑色變?yōu)樘m色. 在595nm下測(cè)定的吸光度值A(chǔ)595,與蛋白質(zhì)濃度成正比. Bradford法的突出優(yōu)點(diǎn)是: (1)靈敏度高,據(jù)估計(jì)比Lowry法約高四倍,其Z低蛋白質(zhì)檢測(cè)量可達(dá)1g.這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)與染料結(jié)合后產(chǎn)生 的顏色變化很大,蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物有更高的消光系數(shù),因而光吸收值隨蛋白質(zhì)濃度的變化比Lowry法要大的 多. (2)測(cè)定快速、簡(jiǎn)便,只需加一種試劑.完成一個(gè)樣品的測(cè)定,只需要5分鐘左右.由于染料與蛋白質(zhì)結(jié)合的 大約只要2分鐘即可完成,其顏色可以在1小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定,且在5分鐘至20分鐘之間,顏色的穩(wěn)定性Z好. 因而完全不用像Lowry法那樣費(fèi)時(shí)和嚴(yán)格地控制時(shí)間. (3)干擾物質(zhì)少.如干擾Lowry法的K+、Na+、Mg2+離子、Tris緩沖液、糖和蔗糖、甘油、巰基乙醇、EDTA等均不 干擾此測(cè)定法.

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    評(píng)論

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凱氏定氮法測(cè)定豆乳中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

豆乳是黃豆加水、磨成汁后再煮熟的飲料。豆乳飲料營(yíng)養(yǎng)非常豐富,且易于消化吸收,它是數(shù)百種天然植物中Z受營(yíng)養(yǎng)學(xué)家推薦的食物。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》標(biāo)準(zhǔn),對(duì)某品牌濃香豆乳進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平。

2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無(wú)水硫酸鉀 3g 和分析純無(wú)水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 取樣

稱取樣品 3.0g(精確值 0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化劑 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 濃硫酸。

3.3 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過(guò)程采用曲線升溫模式,設(shè)定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設(shè)置

             階段            溫度/℃          保持/min              備注
               1             200               20 不加排廢罩,揮發(fā)水分
               2             230               20
               3             350               20
               4             420               90

3.4測(cè)試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設(shè)置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設(shè)置

      硼酸    稀釋水      堿液    蒸餾量  蛋白系數(shù)   蒸汽流量   滴定酸
     25mL     30mL     40mL      5min      6.25     0.1169mol/L

4 測(cè)試結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

       名稱   樣品重量 g     氮含量%蛋白質(zhì)含量%     平均值%       RSD%



       豆乳

      3.1171     0.4887     3.0541



      3.0592



        0.13

      3.0504     0.4901     3.0632
      3.1046     0.4899     3.0617
      3.1745     0.4892     3.0578

4.2 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,測(cè)定該豆乳樣品的粗蛋白平均值為 3.0592%。

豆乳樣品包裝袋上營(yíng)養(yǎng)成分表中蛋白質(zhì)標(biāo)示值為 3.0g/100g,樣品測(cè)定的蛋白質(zhì)平均值符合《GB 28050-2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽通則》要求的食品中蛋白質(zhì)的允許誤差范圍≧80%標(biāo)示值。

參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定[S]. [2] GB 28050-2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽通則[S].


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沉淀法純化蛋白質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)有哪些
 
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雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的干擾因素有哪些
 
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紫外吸收法與Folin-酚比色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量相比,有何缺點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)
 
2014-09-26 15:48:24 972 2
凱氏定氮法測(cè)定干海苔中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

干海苔是經(jīng)過(guò)一次加工后而成的海苔,它是一種高蛋白低脂肪的食物,五張海苔片的蛋白質(zhì)含量約等于一個(gè)雞蛋,并且富含維生素及鉀、鈣、鎂、磷等微量元素。海苔中所含藻膽蛋白具有降血糖的好處。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》標(biāo)準(zhǔn),對(duì)某品牌海苔進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平、超高速粉碎機(jī)。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無(wú)水硫酸鉀 3g 和分析純無(wú)水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 樣品制備

將干海苔片粉碎,過(guò)篩,105℃烘干 2 小時(shí),放入干燥器中備用。


3.2 取樣

稱取樣品 0.5g(精確值 0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化劑 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 濃硫酸。


3.3 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過(guò)程采用曲線升溫模式,設(shè)定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設(shè)置


3.4 測(cè)試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設(shè)置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設(shè)置


4 測(cè)試結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果


4.2 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,測(cè)定海苔樣品的粗蛋白平均值為 33.0852%。

海苔包裝袋上營(yíng)養(yǎng)成分表中蛋白質(zhì)標(biāo)示值為 35.3g/100g,通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,該樣品測(cè)定的粗蛋白平均值均符合《GB 28050-2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽通則》要求的食品中蛋白質(zhì)的允許誤差范圍≧80%標(biāo)示值。


參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定[S]. 

[2] GB 28050-2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽通則[S].

2020-10-26 15:42:18 440 0
凱氏定氮法測(cè)定谷物粉中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

隨著人們生活水平的提高,對(duì)健康的關(guān)注度也越來(lái)越高。谷物粉作為一種健康時(shí)尚,成了很多人都關(guān)心的話題。谷物粉是各種糧食、雜糧、豆類及藥食兩用類原料經(jīng)研磨后再精制而成的一種粉劑類產(chǎn)品,其中包含如枸杞、茯苓、金銀花、決明子、火麻仁、萊菔籽、山核桃仁、薏米、沙棘等 100 多種藥食同源的食材,既保證了均衡營(yíng)養(yǎng)的釋放,又保證了膳食纖維的含量,也同時(shí)提高了身體得吸收既完整又有吸收能力。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》測(cè)定谷物粉中的蛋白質(zhì)含量。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無(wú)水硫酸鉀 3g 和分析純無(wú)水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 取樣

精確稱取混勻樣品 0.5g 左右(精確值 0.1mg),用稱量紙包好放入消化管內(nèi),然后分別加入 3g 硫酸鉀與 0.2g 硫酸銅,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過(guò)程采用曲線升溫模式,設(shè)定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設(shè)置


3.3 測(cè)試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設(shè)置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設(shè)置


4 測(cè)試結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.2 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,測(cè)定谷物粉中蛋白質(zhì)含量的平均值為 18.17%。

以上數(shù)據(jù)顯示,使用 K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定谷物粉中蛋白質(zhì)含量,所得結(jié)果誤差符合《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》標(biāo)準(zhǔn)要求的兩個(gè)測(cè)定值的JD差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的 10%。


參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定[S].

2020-12-08 15:02:16 562 0
凱氏定氮法測(cè)定米餅中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

米餅是一種以大米為原料,主料是秈米或粳米,添加芝麻、粟和鹽等配料,經(jīng)浸泡、制粉、壓坯成型、烘干、焙烤、調(diào)味等單元操作而加工成的糕點(diǎn)。它具有低脂肪、易消化、口感松脆等特點(diǎn),米餅不使用黏接劑使米粒相連,是低熱值的膨化制品。若用糙米,營(yíng)養(yǎng)素含量多且高,又能滿足人們對(duì)低熱量和高膳食纖維的要求。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》測(cè)定米餅中的蛋白質(zhì)含量。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平,超高速粉碎機(jī)。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無(wú)水硫酸鉀 3g 和分析純無(wú)水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 取樣

將樣品粉碎,精確稱取樣品 0.5g 左右(精確值 0.1mg),用稱量紙包好放入消化管內(nèi),然后分別加入 3g 硫酸鉀與 0.2g 硫酸銅,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過(guò)程采用曲線升溫模式,設(shè)定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設(shè)置


3.3 測(cè)試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設(shè)置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設(shè)置


4 測(cè)試結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果


4.2 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,測(cè)定米餅中蛋白質(zhì)含量的平均值為 6.61%。

以上數(shù)據(jù)顯示,使用 K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定米餅中蛋白質(zhì)含量,所得結(jié)果誤差符合《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》標(biāo)準(zhǔn)要求的兩個(gè)測(cè)定值的JD差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的 10%。


參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定[S].

2020-12-21 13:24:17 533 0
凱氏定氮法測(cè)定百合干中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

百合干含有蛋白質(zhì)、脂肪、還原糖、果膠等,另外還含有維生素 B,鈣、磷、鐵等多種成分,百合干性微寒、味甘,有潤(rùn)肺、zhi咳、清熱。jie毒、理脾健胃、利濕消積、寧心安神、促進(jìn)血液循環(huán)等功效,有很高的YY和食用價(jià)值。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》測(cè)定百合干中的蛋白質(zhì)含量。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無(wú)水硫酸鉀 3g 和分析純無(wú)水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 取樣

樣品粉碎,精確稱取 0.5g 左右(精確值 0.1mg),用稱量紙包好放入消化管內(nèi),然后分別加入 3g 硫酸鉀與 0.2g 硫酸銅,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過(guò)程采用曲線升溫模式,設(shè)定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設(shè)置


3.3 測(cè)試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設(shè)置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設(shè)置


4 測(cè)試結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果


4.2 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,測(cè)定百合干中蛋白質(zhì)含量的平均值為 10.66%。

以上數(shù)據(jù)顯示,使用 K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定百合干中蛋白質(zhì)含量,所得結(jié)果誤差符合《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》標(biāo)準(zhǔn)要求的兩個(gè)測(cè)定值的JD差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的 10%。


參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定[S].

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凱氏定氮法測(cè)定豆渣纖維粉中的蛋白質(zhì)含量

1 前言

豆渣纖維粉是一種很有開發(fā)前途的膳食纖維源和蛋白質(zhì)源,尤其是其中膳食纖維含量高達(dá) 50%,對(duì)預(yù)防和ZL腸道和血管系統(tǒng)疾病,調(diào)節(jié)糖尿病患者的血糖水平具有特殊的功效。

含有蛋白質(zhì)、脂肪、氨基酸、無(wú)機(jī)元素及維生素等。本文參照《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》測(cè)定豆渣纖維粉中的蛋白質(zhì)含量。


2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平。


2.2 試劑

硫酸(分析純),催化劑片(分析純無(wú)水硫酸鉀 3g 和分析純無(wú)水硫酸銅 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。


3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 取樣

精確稱取樣品 0.5g 左右(精確值 0.1mg),用稱量紙包好放入消化管內(nèi),然后分別加入3g 硫酸鉀與 0.2g 硫酸銅,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化過(guò)程采用曲線升溫模式,設(shè)定消解參數(shù)如表 1:

表 1 消解參數(shù)設(shè)置


3.3 測(cè)試

將消化管放置于凱氏定氮儀上,定氮儀參數(shù)設(shè)置如表 2:

表 2 定氮儀參數(shù)設(shè)置


4 測(cè)試結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果


4.2 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,測(cè)定豆渣纖維粉中蛋白質(zhì)含量的平均值為 10.154%。以上數(shù)據(jù)顯示,使用 K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定豆渣纖維粉中蛋白質(zhì)含量,所得結(jié)果誤差符合《GB 5009.5-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》標(biāo)準(zhǔn)要求的兩個(gè)測(cè)定值的JD差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的 10%。


參考文獻(xiàn)

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