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問(wèn)答社區(qū)

紫外吸收法測(cè)定rna濃度時(shí)比色皿要處理嗎

apdk1rzhp836 2017-03-12 08:38:42 542  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • Gdgrgsf 2017-03-13 00:00:00
    儀 器: 紫外分光光度計(jì) 型 號(hào): UV2501 產(chǎn) 地: 日本島津公司 主要配件: 主機(jī),計(jì)算機(jī),不間斷電源 性能指標(biāo): 波長(zhǎng)范圍:190~1100nm 分 辨 度:≤0.15nm 光 柵:1200L/mm 精 度:±0.2nm 注意事項(xiàng): 1. 不要將實(shí)驗(yàn)藥品,試劑,器皿等放在儀器 2. 光度計(jì)光源使用壽命有限, 長(zhǎng)時(shí)間不用儀器請(qǐng)關(guān)閉紫外光度計(jì) 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束,及時(shí)登記《大型貴重精密儀器設(shè)備履歷書(shū)》 實(shí)驗(yàn)步驟: 1. 打開(kāi)主機(jī),打開(kāi)計(jì)算機(jī),啟動(dòng)紫外分光光度計(jì)程序,并設(shè)置(方法如下) 2. 將待測(cè)試裝樣品放入樣品池中并測(cè)試 以下為計(jì)算機(jī)軟件操作: 1. 雙擊2501,啟動(dòng)紫外分光光度計(jì)程序 2. 掃基線,按程序下放的"baseline"(此時(shí)不放樣品) 3. 打開(kāi)Configure菜單,點(diǎn)擊Parmeters,根據(jù)實(shí)際情況設(shè)定參數(shù)(如掃描范圍,步進(jìn),掃描速率等等) 4. 測(cè)量,按start鍵,進(jìn)行測(cè)量 5.峰位置的確定: (1) 電腦確定:點(diǎn)擊"Manipnlate"菜單中"Peak Pick"項(xiàng),出現(xiàn)一對(duì)話框,將光標(biāo)移至對(duì)話框Z上方(此時(shí)箭頭變?yōu)?quot; "),按下左鍵不放,拉動(dòng)對(duì)話框至所想大小,即可讀出峰高,峰位置等 (2) 手動(dòng)確定:點(diǎn)擊"Manipnlate"菜單中"Data print"項(xiàng),處理方式同上,自己讀出自己想要的位置的峰值.點(diǎn)擊"Manipnlate"菜單中"Point pick"項(xiàng),移動(dòng)起始和終點(diǎn)位置線,人為確定峰的起始,終點(diǎn)位置 具體到RNA測(cè)定則是將10微升RNA溶液放入樣品池中選擇260 nm波長(zhǎng)與280 nm波長(zhǎng)對(duì)其進(jìn)行吸光度值掃描。一般來(lái)說(shuō),測(cè)核酸濃度都是用260nm的光吸收值來(lái)決定,同時(shí)用260/280的比值來(lái)判斷有無(wú)蛋白質(zhì)污染。理想的比值是1.8~2.0左右。 儀器經(jīng)過(guò)光度掃描后會(huì)直接生成濃度值顯示在屏幕上,不需要經(jīng)過(guò)后續(xù)的人工計(jì)算獲取。

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