原子熒光光度計(jì)（AFS）也叫做原子熒光光譜儀，因?yàn)槠錂z出限低、靈敏度高、抗干擾力強(qiáng)且儀器性價(jià)比高便于操作等優(yōu)勢在重金屬檢測領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。但在應(yīng)用原子熒光光度計(jì)檢測汞的時(shí)候往往會因?yàn)橛洃浶?yīng)影響檢測結(jié)果。作為市面上唯yi一家只專注原子熒光光度計(jì)的研發(fā)以及生產(chǎn)的高新技術(shù)企業(yè)，北京金索坤公司不斷推陳出，應(yīng)對記憶效應(yīng)研發(fā)出穩(wěn)定性好的新一代原子熒光光度計(jì)。

       所謂汞的記憶效應(yīng)主要是由于汞對管路的吸附性引起的。傳輸路徑的長短、裝置的材質(zhì)以及不同的溫度下，汞的記憶效應(yīng)是不同的。因此，減少汞的記憶效應(yīng)也應(yīng)該從這幾個(gè)方面入手。金索坤公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì)摒除了復(fù)雜的管路連接，率先采用模塊化設(shè)計(jì)，將氫化物原子熒光光度計(jì)的氫化物發(fā)生系統(tǒng)、氣體傳輸系統(tǒng)高度集成在具有金索坤ZL技術(shù)的多功能反應(yīng)模塊和集擴(kuò)式氣體傳輸室上。這種模塊化設(shè)計(jì)極大地縮短了管路路徑；另外在材質(zhì)選擇方面，金索坤公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì)在十幾種不同材質(zhì)中選擇了一種航天材料加工成反應(yīng)模塊和傳輸室。使用這種材質(zhì)減少了汞元素的吸附性，減小了汞的記憶效應(yīng)對檢測結(jié)果產(chǎn)生的影響。經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)研究，金索坤研發(fā)團(tuán)隊(duì)終于攻克這一技術(shù)難題，大幅降低了汞的記憶效應(yīng)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高了儀器的穩(wěn)定性。

       為了減少因汞的記憶效應(yīng)對檢測結(jié)果產(chǎn)生的影響，金索坤研發(fā)出于適用于汞元素檢測的SK-樂析原子熒光光度計(jì)，其主要特點(diǎn)是：

       內(nèi)部無管路模塊化設(shè)計(jì)，精簡結(jié)構(gòu)，減少故障點(diǎn)，易于操作維護(hù)，有效降低汞元素記憶效應(yīng)；

       采用與ICP-MS相同的連續(xù)進(jìn)樣方式，提高穩(wěn)定性及測試效率,30s/3次數(shù)據(jù)；

       增加單道增強(qiáng)功能，提高測試靈敏度，測汞更佳。

       增加兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線校正功能，可有效校正光源漂移、環(huán)境濕度和溫度等對測試產(chǎn)生的影響。

       金索坤公司研究原子熒光技術(shù)三十余載，成功打造出穩(wěn)定性高的新一代原子熒光光度計(jì)。作為原子熒光行業(yè)佼佼者的金索坤公司會不斷地推陳出新，用更加優(yōu)質(zhì)的原子熒光光度計(jì)產(chǎn)品助力重金屬檢測。

金索坤SK-樂析原子熒光光度計(jì)

上一期，我們通過了解動物恐懼記憶相關(guān)的兩種研究——穿梭實(shí)驗(yàn)與跳臺實(shí)驗(yàn)，探究了通過特定的場景刺激（強(qiáng)光、電流和聲音等）使小鼠產(chǎn)生恐懼記憶，經(jīng)過一定時(shí)間強(qiáng)化后，環(huán)境與刺激兩者被小鼠聯(lián)系在一起，當(dāng)小鼠再次回到該環(huán)境中便會出現(xiàn)恐懼相關(guān)行為的兩種實(shí)驗(yàn)流程。

本期，我們將繼續(xù)介紹兩種研究小鼠恐懼記憶的測試——避暗實(shí)驗(yàn)與巴恩斯迷宮實(shí)驗(yàn)，探究動物大腦儲存恐懼記憶的奧秘。

避暗實(shí)驗(yàn)

01.原理

利用鼠類的嗜暗習(xí)性設(shè)計(jì)，主要測試動物對明暗辨別覺的學(xué)習(xí)記憶能力。動物由于嗜暗習(xí)性而偏好進(jìn)入和停留在暗室，當(dāng)動物進(jìn)入暗室或停留暗室時(shí)則會受到電擊，動物為了避免受到電擊傷害就會尋找安全區(qū)（明室），經(jīng)幾次反復(fù)后，ZZ記住安全區(qū)域。

02.實(shí)驗(yàn)材料

03.實(shí)驗(yàn)方法

適應(yīng)期

實(shí)驗(yàn)開始前3-7天，每天抓取、輕撫動物，讓其適應(yīng)被實(shí)驗(yàn)人員抓取，避免實(shí)驗(yàn)過程中因?qū)嶒?yàn)人員抓取而造成動物處于應(yīng)激狀態(tài)，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可靠的問題。

建模期

① 時(shí)間：第 一天② 強(qiáng)度：

• 大鼠：電流：0.65-1.8mA（推薦0.8mA），或，電壓65-70V。

• 小鼠：電流：0.15-0.6mA（推薦0.25mA），或，電壓30-36V。

③ 頻率：5-15Hz電流。

④ 刺激方法：實(shí)驗(yàn)開始前，將動物放入暗箱，適應(yīng)5分鐘。隨后對暗箱進(jìn)行通電，持續(xù)5分鐘，此時(shí)明箱底部沒有通電。

測試期

① 時(shí)間：第二天② 方法：將動物放進(jìn)明箱，不進(jìn)行通電，記錄5分鐘。

04.數(shù)據(jù)分析

①物活動軌跡，動物第 一次進(jìn)入暗箱的時(shí)間（潛伏期），分別在兩個(gè)箱體的活動時(shí)間，活動距離。

② P<0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。

05.注意事項(xiàng)

• 選擇體重均勻動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測試時(shí)大鼠體重需<300g，確保體重不影響電擊效果。

• 不同品系動物本身會有區(qū)別，常規(guī)推薦使用C57BL/6J小鼠和SD大鼠。

• 實(shí)驗(yàn)前后注意清理電擊柵欄中的動物排泄物（排泄物會影響通電性及損壞電發(fā)生器）。

• 環(huán)境清理，通過酒精擦拭、晾干盡可能去除上一只動物氣味，儀器設(shè)備具有通風(fēng)性。

巴恩斯迷宮實(shí)驗(yàn)

01.原理

1979年，Barnes 建立了巴恩斯迷宮，與水迷宮和放射臂迷宮類似，它是基于嚙齒類動物天生的探索特性，應(yīng)用噪音、強(qiáng)光和暴露的開放環(huán)境作為應(yīng)激手段，促使動物尋找目標(biāo)洞。經(jīng)過訓(xùn)練，動物學(xué)習(xí)并記憶目標(biāo)箱的位置。該實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)在于對動物的應(yīng)激性刺激較小，既不像放射臂迷宮那樣需要禁食，也不像水迷宮那樣應(yīng)激性強(qiáng)。因此，在記憶研究中較為常用。尤其適用于與應(yīng)激相關(guān)的記憶研究以及基因敲除小鼠的行為表型研究。

02.實(shí)驗(yàn)材料

巴恩斯迷宮，smart3.0

03.實(shí)驗(yàn)方法

① 實(shí)驗(yàn)開始前3-7天，每天抓取、輕撫動物，讓其適應(yīng)被實(shí)驗(yàn)人員抓取，避免實(shí)驗(yàn)過程中因?qū)嶒?yàn)人員抓取而造成動物處于應(yīng)激狀態(tài)，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可靠的問題。

② 實(shí)驗(yàn)第1天，將動物從目標(biāo)孔洞放入目標(biāo)箱內(nèi)適應(yīng)4分鐘（只進(jìn)行這一次）。

③ 實(shí)驗(yàn)第2-7天，將動物移動至平臺中 央，用透明圓筒限制活動5秒，后撤掉圓筒開始計(jì)時(shí)，同時(shí)給與動物刺激（強(qiáng)光，聲音等）。

• 動物成功進(jìn)入目標(biāo)箱，則讓動物在目標(biāo)箱內(nèi)停留30秒。

• 若動物4分鐘內(nèi)沒有找到目標(biāo)箱，則誘導(dǎo)動物進(jìn)入目標(biāo)箱，停留30秒。

④ 隨機(jī)轉(zhuǎn)動圓盤，使孔位與上一次實(shí)驗(yàn)不同，但目標(biāo)箱的方位始終保持不變。每天重復(fù)2次上一步的實(shí)驗(yàn)流程。

04.數(shù)據(jù)分析

① 第 一次探究洞的潛伏期，到達(dá)目標(biāo)洞的時(shí)間，每只動物的錯(cuò)誤次數(shù)（探究一個(gè)錯(cuò)誤的洞即視為錯(cuò)誤一次）。

• 潛伏期僅做參考，潛伏期越短，說明動物學(xué)會了迷宮原理，記憶水平越好。

• 到達(dá)目標(biāo)洞的時(shí)間越短，說明動物記憶水平越好。

• 動物錯(cuò)誤次數(shù)越多，說明動物學(xué)會了迷宮原理，但沒有記住目標(biāo)箱的位置。

② 采用單因素方差分析（one way-ANOVA），當(dāng)多組間有差異時(shí)，兩兩比較采用Fisher's LSD post hoc多重比較方法。

③P<0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。

05.注意事項(xiàng)

• 每只動物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)進(jìn)行環(huán)境清理，盡可能去除上一只動物的氣味。

• 不同品系動物對此實(shí)驗(yàn)的偏好性有很大不同，建議使用C57BL/6J小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

【參考文獻(xiàn)】

Rosenfeld Cheryl S,Ferguson Sherry A,Barnes maze testing strategies with small and large rodent models.[J] .J Vis Exp, 2014, undefined: e51194.

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