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DNA抽提液中Tris-Hcl,EDTA,Nacl的配比是多少

零度右手 2017-01-15 09:39:19 461  瀏覽
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  • 蕭擎峰 2017-01-16 00:00:00
    1、1M Tris-HCL(pH8.0) 121.1g Tris溶于800ml無菌水中,加濃HCL調(diào)pH到8.0,定容至1L,高壓滅菌. 2、0.5M EDTA(pH8.0) 186.1g EDTA-Na·2H2O溶于800ml無菌水中,需用磁力攪拌器劇烈攪動(dòng),用NaOH調(diào)pH值到8.0(約20g),定容至1L,高壓滅菌. 3、3.5M NaCL 204.75g NaCL溶于1L無菌水中,高壓滅菌. 4、10% CTAB溶液 10gCTAB溶于80ml無菌水中,定容至100mL,高壓滅菌. 5、DNA提取液(500ml) 3.5M NaCL 200ml Tris-HCL 50ml EDTA 50ml 10%CTAB 100ml Water 100ml

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裂解是指細(xì)胞分裂或破裂的一種狀態(tài),裂解緩沖液是一種有助于打開細(xì)胞的溶液,它可以在一些實(shí)驗(yàn)分析需要提取細(xì)胞內(nèi)容物時(shí)進(jìn)行使用,例如科學(xué)家在從細(xì)胞中提取DNA或蛋白質(zhì)進(jìn)行分析時(shí)就必須使用裂解緩沖液來輔助完成。細(xì)胞裂解緩沖液種類有很多,其中較常見的一種是TRIS—HCL緩沖液。

TRIS—HCL可以保持細(xì)胞裂解緩沖液的PH值zui佳狀態(tài),所以常用它作為裂解緩沖液的主要成分。裂解緩沖液有助于打開細(xì)胞,可以對細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行篩選,例如鹽、清潔劑、螯合劑和抑zhi劑,以及一些堿性化學(xué)品。它不僅可以區(qū)分篩選甚至還可以去除這些物質(zhì)。

裂解液除了生物緩沖劑之外,還包括一種螯合劑和抑zhi劑,例如乙二胺四乙酸(EDTA),因?yàn)檫@種化學(xué)物質(zhì)與帶有兩個(gè)正電荷的金屬離子(例如鎂和鈣)結(jié)合,可以使它們不能用于其他反應(yīng)。許多 DNA 酶(咀嚼 DNA 的蛋白質(zhì))和蛋白酶(將其他蛋白質(zhì)切碎的蛋白質(zhì))需要鎂離子才能發(fā)揮作用,因此通過剝奪這些關(guān)鍵成分,EDTA 有助于降低蛋白酶或 DNA 酶的活性水平。

德晟為專業(yè)生產(chǎn)生物緩沖劑和EDTA的廠家,現(xiàn)在生產(chǎn)的生物緩沖劑類產(chǎn)品有TRIS、TRIS-HCL、 HEPES、 TAPS 、MOPS、 CAPS、 BICINE、 EPPS、 PEP等一系列生物緩沖液,目前成立已有十多年,擁有十分豐富的研發(fā)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)與產(chǎn)品知識,可為客戶提供大量技術(shù)支持與售后保障。如有需要?dú)g迎隨時(shí)聯(lián)系我們!


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