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雙向電泳中樣品蛋白質(zhì)濃度要求?Z好能具體說明!

我是*年派大欣 2011-02-24 00:32:58 305  瀏覽
  •  

參與評(píng)論

全部評(píng)論(2條)

  • 巨蟹king87 2012-03-06 00:00:00
    我用的是伯樂的一套雙向電泳系統(tǒng),關(guān)于蛋白濃度的問題得視你自己的樣品來定,其實(shí)手冊(cè)上給的參考蛋白濃度有點(diǎn)低,有時(shí)候甚至低了1倍,這需要你通過上樣量實(shí)驗(yàn)來確定你的樣品到底上多少濃度Z合適

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    評(píng)論

  • wyp6203 2011-02-25 00:00:00
    要看樓主你所有的儀器和IEF strip的要求吧?我用過的是這家公司的GE Healthcare。他們的蛋白質(zhì)濃度要求就寫在使用手冊(cè)里面。 http://www.gelifesciences.com/aptrix/upp01077.nsf/Content/2d_electrophoresis~2delectrophoresis_handbook 一般來說濃度高些沒關(guān)系,上樣時(shí)反正會(huì)加緩沖液。上樣是根據(jù)蛋白質(zhì)總量來上的,所以濃度太低時(shí),儀器又限制了上樣總?cè)莘e,會(huì)加不上去足夠的蛋白質(zhì)量,Z后膠拿出來染色,蛋白質(zhì)點(diǎn)淡得看不見,拿去測(cè)序就更沒戲了。 2D步驟很多,需要優(yōu)化,樓主如果沒有足夠的廠商技術(shù)支持或者前輩帶著,自己慢慢摸索有得你受的。

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