關(guān)于PCR反應(yīng)液純化回收后再電泳的問題
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如題 我跑RACE 每一次PCR的反應(yīng)液用TAKARA miniBEST 的純化Kit回收 回收之后的溶液和后續(xù)的巢式PCR產(chǎn)物一起跑電泳 這樣才能對比結(jié)果 可是每次在加樣的時(shí)候就發(fā)現(xiàn) 回收產(chǎn)物取5ul與1ul 6X Loading Buffer混合后加樣 混合液沉降不下去 會隨著槍頭的拔出被提到... 如題 我跑RACE 每一次PCR的反應(yīng)液用TAKARA miniBEST 的純化Kit回收 回收之后的溶液和后續(xù)的巢式PCR產(chǎn)物一起跑電泳 這樣才能對比結(jié)果 可是每次在加樣的時(shí)候就發(fā)現(xiàn) 回收產(chǎn)物取5ul與1ul 6X Loading Buffer混合后加樣 混合液沉降不下去 會隨著槍頭的拔出被提到加樣孔外面 然后很快就擴(kuò)散到TAE里面消失掉了 因?yàn)橹皼]做過回收產(chǎn)物的電泳 不知道問題出在哪里 是要用別的BUFFER呢還是溶液需要稀釋？ 有的能沉降下去有的不能…… 各路大神快來救命吧…… 展開
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- 習(xí)慣成自然PAP 2014-03-09 00:00:00
- 按說不會，loading里面的蔗糖就是幫助沉降的，注意把loading和樣品混合重復(fù)。不行試試10X loading buffer。
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