免疫組化法（IHC）是使用抗體檢測組織切片（例如肝臟、胰-腺或心臟）中細(xì)胞蛋白質(zhì)（抗原）的過程。

當(dāng)組織樣本被送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行疾病檢查時，有幾個細(xì)節(jié)不易確定。幾種疾病或疾病亞型在顯微鏡下可能看起來相似或看起來具有相似大小的細(xì)胞，但具有不同的行為和必要的治-療，區(qū)分它們的最佳方法是檢測這些細(xì)胞上作為標(biāo)記的特定分子。免疫組化法（IHC）是一種使用抗體（匹配分子）的技術(shù)，用于尋找、識別附著在細(xì)胞上的標(biāo)記物。在顯微鏡下可以看到抗體本身，這有助于技術(shù)人員進(jìn)行精確識別。

免疫組化法（IHC）已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)中，特別是癌癥診斷。淋巴瘤是依賴于IHC進(jìn)行正確診斷和治-療決策的癌癥之一。

免疫組化常見問題：

問題一：我應(yīng)該使用PIER還是HIER進(jìn)行抗原修復(fù)？

固定過程可能會掩蓋抗原，導(dǎo)致抗體結(jié)合無法進(jìn)行。這種掩蓋可以通過一種稱為抗原修復(fù)/抗原去掩蔽的技術(shù)來逆轉(zhuǎn)，該技術(shù)可以通過加熱（HIER；熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)）或蛋白酶（PIER；蛋白水解誘導(dǎo)抗原修復(fù)）介導(dǎo)。后者使用蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶等酶。PIER方法通過降解掩蓋表位的肽而起作用。然而，PIER也可能導(dǎo)致樣品形態(tài)或抗原本身的改變。因此，PIER的使用頻率低于HIER，后者通過恢復(fù)表位的二級和三級結(jié)構(gòu)而起作用。

為了確定是否應(yīng)該進(jìn)行抗原修復(fù)以及采用哪種方法，應(yīng)遵循以下指南：

進(jìn)行文獻(xiàn)檢索，以確定其他研究人員如何可視化您感興趣的抗原。

檢查抗體供應(yīng)商是否推薦了特定的抗原修復(fù)-方案。

如果沒有特定的協(xié)議可用，我們建議使用HIER而不是PIER協(xié)議。

對于HIER，總是使用中性抗原修復(fù)緩沖液，并與未進(jìn)行抗原修復(fù)的樣品進(jìn)行比較。

如果中性染色溶液沒有產(chǎn)生良好的染色效果，則應(yīng)測試堿性或酸性抗原修復(fù)緩沖液。除了pH值外，其他需要優(yōu)化的參數(shù)是溫度和持續(xù)時間。理想情況下，嘗試各種pH值、溫度和時間組合。

為了排除由HIER過程引起的偽影，始終包括一個控制樣品，該樣品在沒有HIER步驟的情況下進(jìn)行染色。

問題二：如何選擇IHC實(shí)驗(yàn)的抗體，單克隆抗體還是多克隆抗體？

單克隆抗體和多克隆抗體的抗體特性決定了其優(yōu)缺點(diǎn)。單克隆抗體是針對單個表位的同種免疫球蛋白。抗體是由一個動物的單個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，因此在免疫化學(xué)上相似。多克隆抗體是針對同一抗原的各種表位的異質(zhì)抗體混合物?？贵w是由動物的不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，因此在免疫化學(xué)上不同。多克隆混合物中的抗體可能具有略微不同的特異性和親和力。

如果蛋白質(zhì)靶標(biāo)具有相同的氨基酸序列，單克隆抗體更合適。一旦抗原因各種原因發(fā)生構(gòu)象變化，如蛋白質(zhì)相互作用、翻譯后修飾、溫度、pH值、固定、鹽濃度等，單克隆抗體和抗原的聯(lián)合作用將受到嚴(yán)重影響。由于多克隆抗體具有多個表位，不受蛋白質(zhì)構(gòu)象變化的影響，一般來說，在一定范圍內(nèi)的pH和鹽濃度內(nèi)，多克隆抗體之間的抗原結(jié)合比單克隆抗體更穩(wěn)定。

問題三：一抗的孵育時間多久？

一抗的孵育時間與溫度,抗體濃度有關(guān)。一般情況下,在37℃的條件下,孵育1-2小時左右。在室溫的條件下,孵育3小時左右。在4℃的條件下,孵育18-24小時左右。

義翹神州提供石蠟切片免疫組化（IHC）檢測服務(wù)，更多免疫組化的問題可以上義翹神州網(wǎng)咨詢！https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service

流動分析儀分有連續(xù)流動分析儀和間隔流動分析儀，是一種管道化的流動分析法。

它的設(shè)備結(jié)構(gòu)較為簡單，采用的管道大多由聚乙烯、聚四氟乙烯等材料制成的，具有良好的耐腐蝕性。

由于流動分析去除了繁瑣的流程，還能連續(xù)自動分析，工作人員操作中也更簡便，分析速度更快，節(jié)省了人力資源。

氣泡間隔技術(shù)降低了樣品之間的交叉污染，反應(yīng)過程靈敏，分析頻率高，精密度更高。

流動分析儀只需要很少的試劑就可以準(zhǔn)確分析，節(jié)省試劑和費(fèi)用，對環(huán)境更友好。

它的應(yīng)用范圍很廣，在YL衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)礦產(chǎn)、化學(xué)分析、環(huán)境分析等方面發(fā)揮著重大作用?？煞治霾煌愋偷乃ǖ乇硭⒌叵滤?、廢水、海洋水等），分析酒水飲料等食品，幫助監(jiān)測食品安全，分析土壤植物，幫助保護(hù)自然環(huán)境等等。

雜交瘤技術(shù)又稱細(xì)胞融合技術(shù)，是將兩個或多個細(xì)胞融合成一個。 融合后形成的雜交瘤細(xì)胞承襲了兩親本細(xì)胞的特征。 自發(fā)的細(xì)胞融合很少發(fā)生，當(dāng)加入一種融合劑，如：聚乙二醇（常用）、仙臺病毒或溶血卵磷脂后，兩種細(xì)胞就可發(fā)生融合。 首先是質(zhì)膜互相融合，形成具有兩個或多個核的異核體，細(xì)胞進(jìn)一步分裂時，核互相融合，形成了雜交細(xì)胞。

雜交瘤技術(shù)優(yōu)缺點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：與傳統(tǒng)的免疫動物方法制備抗體相比，利用雜交瘤技術(shù)可以制備出高純度的單抗，并且可以進(jìn)行單克隆抗體的大量生產(chǎn)。

缺點(diǎn)：a.操作步驟繁瑣。b.利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)出的單克隆抗體多為鼠源性，而鼠源性抗體在應(yīng)用中有諸多問題，例如被人類免疫系統(tǒng)所識別，產(chǎn)生人抗鼠抗體( HAMA）反應(yīng)、在人體循環(huán)系統(tǒng)中很快被清除等。

雜交瘤技術(shù)應(yīng)用：

①診斷應(yīng)用：單克隆抗體在疾病診斷中發(fā)揮了重要作用，其優(yōu)點(diǎn)在于診斷準(zhǔn)確且無交叉反應(yīng)，例如在乙型肝炎及潛伏的乙型肝炎病毒的診斷中，單克隆抗體能顯著減少假陰性的漏診。

②治-療載體：單克隆抗體也可作為治-療疾病的載體。通過與抗腫瘤藥物結(jié)合，單克隆抗體能在體內(nèi)選擇性集中攻擊腫瘤細(xì)胞，具有靶向性，從而減少對正常組織的損傷并減輕抗-癌藥物的副作用。因此，載藥單克隆抗體被譽(yù)為“生物導(dǎo)-彈”。

③異種蛋白質(zhì)問題：目前大多數(shù)單克隆抗體為鼠-鼠型，對于人體來說屬于異種蛋白質(zhì)，容易引起排異反應(yīng)，限制了其在治-療中的應(yīng)用。

④人-人型單克隆抗體的研究：為了解決排異問題，研究者正在努力研發(fā)人-人型單克隆抗體，以利于其在治-療中的廣泛應(yīng)用。

雜交瘤技術(shù)常見問題解析：

①電融合和PEG融合的區(qū)別？

PEG化學(xué)融合是利用聚乙二醇分子能夠改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的特性來實(shí)現(xiàn)細(xì)胞融合的過程。聚乙二醇可以使兩個細(xì)胞接觸點(diǎn)質(zhì)膜的脂質(zhì)分子發(fā)生疏散和重組，兩個細(xì)胞接觸部位的質(zhì)膜由于相互親和以及彼此的表面張力作用，從而發(fā)生細(xì)胞融合。電融合則是先通過高頻交流電壓，使細(xì)胞成串珠狀排列，實(shí)現(xiàn)點(diǎn)接觸；然后施加方波脈沖，擊穿兩個細(xì)胞接觸部位的質(zhì)膜，質(zhì)膜脂質(zhì)分子發(fā)生重組，同時由于細(xì)胞表面張力作用，完成細(xì)胞融合。電融合法比PEG融合法有明顯的優(yōu)點(diǎn)：細(xì)胞融合率高，有利于雜交瘤的篩選；電脈沖擊穿對細(xì)胞的損傷小，有利于融合后細(xì)胞的生長增殖；可直接觀察融合過程；便于有目的地控制選擇融合條件。

②為什么要推薦進(jìn)行2~3輪有限稀釋獲得穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株？

陽性單克隆細(xì)胞的獲得通常進(jìn)行至少2輪有限稀釋，原因主要考慮兩點(diǎn)。第一，有限稀釋過程中，大多數(shù)是通過實(shí)驗(yàn)者在顯微鏡下觀察細(xì)胞團(tuán)狀態(tài)來判定是否是單克隆，存在一定的主觀經(jīng)驗(yàn)值，至少進(jìn)行兩輪有限稀釋可以增加判斷的準(zhǔn)確性；第二，雜交瘤細(xì)胞由兩個細(xì)胞融合而成，存在基因的不穩(wěn)定性，連續(xù)2輪有限稀釋，客觀上增加了篩選中細(xì)胞培養(yǎng)時間，有利于淘汰不穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株。

③為什么要使用核酸免疫？

重組蛋白由于免疫靶向明確、劑量可控等優(yōu)勢，通常作為動物免疫階段的首-選免疫原。但有些重組蛋白因?yàn)楸磉_(dá)純化困難，很難大量獲得并用于動物免疫；另外，重組蛋白與天然樣本之間存在或多少的結(jié)構(gòu)差異。而核酸免疫，跳過了蛋白表達(dá)純化的過程，成功避開了蛋白生產(chǎn)的難題，通過核酸體內(nèi)表達(dá)的蛋白結(jié)構(gòu)也更加接近天然蛋白，故而可以作為重組蛋白免疫的有效補(bǔ)充手段。但核酸免疫的免疫劑量很難判斷，整體免疫效價(jià)也會普遍低于蛋白和多肽免疫。

④除弗氏佐劑之外，免疫佐劑還有哪些？

免疫佐劑是指那些同抗原一起或預(yù)先注入機(jī)體內(nèi)能增強(qiáng)機(jī)體對抗原的免疫應(yīng)答能力或改變免疫應(yīng)答類型的輔助物質(zhì)。佐劑的免疫生物學(xué)作用是增強(qiáng)免疫原性、增強(qiáng)抗體的滴度、改變抗體產(chǎn)生的類型、引起或增強(qiáng)遲發(fā)超敏反應(yīng)等。除經(jīng)典的弗氏佐劑外，各類不同功能的佐劑也層出不窮，比較常見的有：1）無機(jī)佐劑，如磷酸鋁佐劑、氫氧化鋁佐劑；2）生物類佐劑，如以細(xì)菌胞壁或產(chǎn)物為主要組成的佐劑；3）具有佐劑活性的細(xì)胞因子類，如GSF、IL1、IL2、IFN -γ等；4）人工合成佐劑，如cpG等。

⑤雜交瘤融合后主克隆接種96孔細(xì)胞培養(yǎng)板數(shù)量通常是多少？

融合后的主克隆細(xì)胞接種96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的數(shù)量與融合效率和脾細(xì)胞多少有密切關(guān)系。PEG化學(xué)融合后的主克隆，通常一只小鼠的脾細(xì)胞可以接種8-15塊96孔細(xì)胞培養(yǎng)板；電融合因?yàn)槿诤闲蚀蟠筇岣?，通常一只小鼠的脾?xì)胞可以接種30~50塊96孔細(xì)胞培養(yǎng)板。

更多雜交瘤技術(shù)開發(fā)平臺詳情可以關(guān)注：https://cn.sinobiological.com/services/platform/hybridoma-development

義翹神州：蛋白與抗體的專業(yè)引領(lǐng)者，歡迎通過百度搜索“義翹神州”與我們?nèi)〉寐?lián)系。

拉力試驗(yàn)機(jī)適用于塑料板材、管材、異型材，塑料薄膜及橡膠、電線電纜、鋼材、玻纖維等材料的各種物理機(jī)械性能測試為材料開發(fā)，為物性試驗(yàn)、教學(xué)研究、質(zhì)量控制等不可缺少的檢測設(shè)備。下文一起了解拉力試驗(yàn)機(jī)的常見問題與解決辦法。

　　1、拉力試驗(yàn)機(jī)要注意哪些配置部件和技術(shù)參數(shù)?比如橫梁、電機(jī)、油泵、拉升空間、重量等等。

　　解決方法：拉力機(jī)的行程關(guān)系著你的拉壓彎剪的試驗(yàn)空間，關(guān)鍵看你主要做什么試驗(yàn)?有些用戶購買了試驗(yàn)機(jī)，很少做實(shí)驗(yàn)，這都是常見的事;電機(jī)和油泵的好壞決定其壽命和噪聲大小(油路結(jié)構(gòu)也決定噪聲大小)。試驗(yàn)的材料決定夾具類型，比如拉鋼絞線就要用專門的鋼絞線拉伸夾具。重量一般都是由噸位決定的，各個廠家相差不大。除了這些，還要看機(jī)器的精度，電氣控制的穩(wěn)定性及安全保護(hù)的措施得當(dāng)。控制器的精度及采集速率，試驗(yàn)軟件的兼容性和易用性及正確性!這些細(xì)節(jié)都關(guān)系你的試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　2、拉力試驗(yàn)機(jī)的夾具有污物需要清洗嗎?如何清洗?

　　解決方法：不用洗，用油擦一下就可以了。因?yàn)閵A具都是金屬的，不可以用水清洗，有油擦拭干凈就可以了，要保證不能生銹。影響外觀。

　　3、像拉力試驗(yàn)機(jī)這種大型設(shè)備，需不需要裝穩(wěn)壓電源的呢?

　　解決方法：目前國內(nèi)的電網(wǎng)還是比較穩(wěn)定的，除非設(shè)備有要求，否則沒有必要?？刂埔幌聦?shí)驗(yàn)室溫濕度倒是對設(shè)備有好處。

寧夏綠水試驗(yàn)儀器有限公司是集研發(fā)、制造、銷售、服務(wù)于一體的高新技術(shù)企業(yè)。是由寧夏青山試驗(yàn)機(jī)有限公司的“青山”牌試驗(yàn)機(jī)和寧夏綠水試驗(yàn)儀器有限公司“綠水”牌試驗(yàn)機(jī)兩品牌組成的試驗(yàn)機(jī)聯(lián)合體，公司主要產(chǎn)品：電子式拉力試驗(yàn)機(jī)、微機(jī)控制扭轉(zhuǎn)試驗(yàn)機(jī)、疲勞試驗(yàn)機(jī)、工藝性試驗(yàn)機(jī)（機(jī)動彎折、線材扭轉(zhuǎn)、線材纏繞等）、扭距標(biāo)準(zhǔn)機(jī)、微機(jī)控制wan能試驗(yàn)機(jī)等各種類型測試設(shè)備，工藝試驗(yàn)機(jī)是金屬制品行業(yè)配套檢測設(shè)備。

公司地址：寧夏銀川市興慶區(qū)科技園興春路281號

銷售熱線：0951-8989817,8989813

服務(wù)熱線：139-0959-6520

桌面五軸數(shù)控機(jī)床打通教學(xué)與實(shí)踐

桌上五軸機(jī)床是育能公司根據(jù)新的已頒發(fā)實(shí)行的職業(yè)教育法，公司為落實(shí)新修訂的《職業(yè)教育法》精神，提高職業(yè)教育人才培養(yǎng)質(zhì)量，開展職業(yè)教育體驗(yàn)活動等要求，同時也為更好地服務(wù)智能制造、工業(yè)物聯(lián)網(wǎng)相關(guān)專業(yè)建設(shè)和職業(yè)教育示范性項(xiàng)目而研發(fā)出的一款“桌上五軸機(jī)床”，該產(chǎn)品是研發(fā)計(jì)劃產(chǎn)品之一，是制造領(lǐng)域中外人文交流人才培養(yǎng)基地配套產(chǎn)品之一。

桌面五軸數(shù)控機(jī)床其特征為：

1、外型幾何尺寸?。和庑纬叽缭陂L930mm、寬750mm、高920mm以內(nèi)；

2、單臺耗電少：一般單臺耗電在1KVA以下，并使用220v/單相電源；

3、后續(xù)材料消耗少：使用小尺寸坯料做學(xué)生實(shí)習(xí)加工，消耗相當(dāng)于生產(chǎn)型機(jī)床的1/10；

4、具有數(shù)控加工基本功能：具有大型數(shù)控機(jī)床ISO G代碼格式編程和加工、手工編程和操作、自動程序加工等功能；

5、具有教學(xué)特點(diǎn)：編程與操作簡便易行、數(shù)控軟件具有加工仿真和脫機(jī)加工仿真、機(jī)床護(hù)罩外殼及安全門保護(hù)裝置，可使學(xué)生觀察機(jī)床結(jié)構(gòu)和工作狀態(tài)等；

6、具有高安全性：凡是有可能造成人及事故的地方均有安全保護(hù)設(shè)置，例如防護(hù)門安全開關(guān)、切屑防護(hù)罩、電路漏電保護(hù)、安全電源插座、機(jī)械棱角插上保護(hù)等措施。

桌面五軸數(shù)控機(jī)床特點(diǎn)

相對于大型生產(chǎn)型五軸數(shù)控機(jī)床，桌上五軸機(jī)具有以下優(yōu)越性：

1、適合青少年“好奇、好動、好學(xué)”的特點(diǎn)，使學(xué)生學(xué)習(xí)積極性和潛能得到更好的發(fā)揮；

2、占地少，一定的教室空間可以增加8~10倍的實(shí)習(xí)工位數(shù)；

3、耗電和實(shí)習(xí)材料消耗少，可以增加學(xué)生實(shí)習(xí)的課時；

4、帶班師資少，大約節(jié)省五分之一的師資力量；

5、安全系數(shù)高可以避免人機(jī)事故的發(fā)生

6、大型生產(chǎn)型五軸數(shù)控機(jī)床用于專業(yè)教學(xué)后期階段的生產(chǎn)實(shí)習(xí)，桌上五軸機(jī)床用于專業(yè)教學(xué)前期的實(shí)習(xí)，互為補(bǔ)充，形成一條科學(xué)合理的教學(xué)鏈條。