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- jmbmbmbmbm 2016-11-14 00:00:00
- 如何分別從細胞漿和細胞核中抽提RNA 操作步驟： 樣品處理： a. 植物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混勻。 b. 動物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液，用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。 c. 貼壁細胞：直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細胞，每106細胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。 d. 細胞懸液：離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml裂解液混勻。 e. 血液處理：取0.2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細胞裂解液，混勻后室溫放置10分鐘，10000rpm離心1分鐘。棄上清，若沉淀含有紅細胞，可加入2倍體積紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml裂解液混勻。 將處理后的樣品在室溫放置5分鐘，使得核酸蛋白復合物完全分離。 向勻漿樣品中加0.2ml氯仿，蓋好管蓋，劇烈振蕩15秒，室溫放置3-5分鐘。 2-8℃ 12000 rpm離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中，把水相轉移到新管中，不要吸到沉淀。
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