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  Ameiy2011 2017-09-20 01:14:55

  質(zhì)粒如果需要測序，說明你們實驗室對這個質(zhì)粒中插入的基因序列不清楚，需要通過測序知道其中到底是什么基因，絕大多數(shù)情況下是做了克隆之后需要去確認插入到目的載體中的序列是不是正確，這樣才能進行下一步的實驗。PCR產(chǎn)物測序一般是為了確認PCR產(chǎn)物序列的正確，因為PCR過程中有可能會發(fā)生突變或者其他導(dǎo)致序列改變的情況，只有確認之后才能進行后續(xù)實驗。

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  敏姐是個好人0 2017-09-27 18:03:48

  　　質(zhì)粒和PCR產(chǎn)物需要拿去測序有2個目的，一是驗證插入序列的DNA序列是否無誤。第二是看插入的方向和位置是否正確。如果做定量PCR用到質(zhì)粒的話，一般是用來做標準曲線的。 　　聚合酶鏈式反應(yīng)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的Z大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行比對。這也是“微量證據(jù)”的威力之所在。由1983年美國Mullis首先提出設(shè)想，1985年由其發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng)，即簡易DNA擴增法，意味著PCR技術(shù)的真正誕生。到如今2013年，PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。1973 年，臺籍科學(xué)家錢嘉韻，發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定的Taq DNA聚合酶，為PCR技術(shù)發(fā)展也做出了基礎(chǔ)性貢獻。 　　PCR(聚合酶鏈式反應(yīng)）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶Z適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈?；诰酆厦钢圃斓腜CR儀實際就是一個溫控設(shè)備，能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進行控制。

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