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等電聚焦電泳法測定蛋白質(zhì)的等電點時應(yīng)注意哪些

wpm871130 2011-11-20 15:44:48 556  瀏覽
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參與評論

全部評論(2條)

  • auroralqh 2011-11-21 00:00:00
    控制以下幾項:槽液的PH、電導(dǎo)率、固體份、顏基比、溫度,電泳時電壓

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  • zhuoyue234 2012-06-07 00:00:00
    1.上樣前沖去上樣空底部未聚合的丙稀酰胺,否則電泳過程中會發(fā)生聚合; 2.現(xiàn)在有商品化的等電聚焦凝膠,但只限于水平平板電泳系統(tǒng)(如Pharmmacia-LKB,Hoefer). 3.加入過硫酸胺和TEMED,輕輕混勻(開始聚合,操作要迅速); 4.將上述混勻溶液倒如灌膠器(盡量避免氣泡產(chǎn)生); 5.插入梳子,將梳子侵入膠內(nèi)(不要產(chǎn)生氣泡); 6.聚合約1小時; 7.聚合完成,小心拔去梳子; 8.將凝膠同冷卻裝置連接后插入電泳池,蛋白樣品上樣前Z好用陽極電極液注入上槽中確定是否有滲漏。

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