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【THUNDER小課堂】自噬與老年病

  • 秀麗隱桿線蟲(chóng)中自噬過(guò)程的高對(duì)比度成像

    通過(guò)使用Small Volume Computational Clearing(SVCC)的THUNDER Imager Model Organism機(jī)型對(duì)模型生物秀麗隱桿線蟲(chóng)(一種線蟲(chóng))進(jìn)行高對(duì)比度成像,可幫助更深入地理解自噬與老年病之間的關(guān)聯(lián)。自噬是一個(gè)自然的過(guò)程,細(xì)胞通過(guò)這個(gè)過(guò)程來(lái)自我毀滅,以產(chǎn)生能量并維持細(xì)胞活性。感染或癌癥等疾病引發(fā)的應(yīng)激通常會(huì)觸發(fā)以病原體或癌細(xì)胞為目標(biāo)的自噬。自噬與年齡相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病之間的關(guān)系尚不清楚,對(duì)這種關(guān)系的深入理解可能有助于維持長(zhǎng)期健康。使用高對(duì)比度THUNDER成像進(jìn)行的秀麗隱桿線蟲(chóng)自噬機(jī)制研究可能有助于將其推向臨床應(yīng)用,從而實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。


    引言

    自噬是一種受調(diào)節(jié)的自我吞噬過(guò)程,其能幫助細(xì)胞維持穩(wěn)態(tài)并重新獲得能量[1,2]。在基礎(chǔ)狀態(tài)下,自噬可用于長(zhǎng)壽命蛋白的降解等,但它主要是在應(yīng)激反應(yīng)中被誘發(fā)。在感染這樣的應(yīng)激狀態(tài)下,其會(huì)靶向病原體,以進(jìn)行溶酶體降解。在癌細(xì)胞引發(fā)的代謝應(yīng)激中,自噬為細(xì)胞活性提供ATP,保持細(xì)胞活力。癌細(xì)胞會(huì)誘導(dǎo)自噬,使細(xì)胞吃掉自己,從而保護(hù)其免于細(xì)胞死亡。自噬的特征是形成自噬體,并涉及多個(gè)步驟:開(kāi)始、成核、延伸、成熟和降解。雖然自噬與健康有關(guān),但自噬與老年病(如神經(jīng)退行性疾?。┲g的關(guān)系仍不清楚[2]。如果能更好地理解這種關(guān)系,就可能會(huì)開(kāi)發(fā)出能促進(jìn)長(zhǎng)期健康的臨床應(yīng)用。

    線蟲(chóng)秀麗隱桿線蟲(chóng)是一種經(jīng)過(guò)充分研究的模型生物,使得我們可以在整體生物中研究自噬和年齡相關(guān)的病理機(jī)制[3,4]。

    本文介紹如何使用THUNDER Imager對(duì)自噬和老年病進(jìn)行詳細(xì)的研究。


    挑戰(zhàn)

    對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)成像時(shí),快速獲得銳利的高對(duì)比度3D成像,清晰展示重要細(xì)節(jié)的解決方案最為實(shí)用。常規(guī)的寬場(chǎng)顯微成像速度快,檢測(cè)靈敏度高,但是對(duì)厚標(biāo)本的成像,如整個(gè)生物體,通常會(huì)出現(xiàn)離焦信號(hào)模糊導(dǎo)致的對(duì)比度降低[5]。


    方法

    本研究中使用表達(dá)MAH215 [6]、GFP和mCherry的秀麗隱桿線蟲(chóng)。MAH215是一種雙色熒光mCherry:GFP:LGG-1蛋白,其可對(duì)自噬體和自噬溶酶體進(jìn)行可視化,以監(jiān)測(cè)自噬流。GFP(綠色)表示自噬體,而mCherry(紅色)表示自噬溶酶體,后者可在酸性環(huán)境中淬滅GFP,從而導(dǎo)致發(fā)射mCherry信號(hào)。使用THUNDER Imager Model Organism對(duì)線蟲(chóng)進(jìn)行成像,應(yīng)用Small volume computational clearing(SVCC)處理圖像[5],然后生成zui大強(qiáng)度投影。


    結(jié)果

    與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)顯微鏡相比,THUNDER Imager Model Organism能夠清除非焦面信號(hào),對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)進(jìn)行清晰的立體與宏觀成像[5]。這樣,就可以更加詳細(xì)地研究細(xì)胞過(guò)程并對(duì)其定量。

    圖1:秀麗隱桿線蟲(chóng)的宏觀擴(kuò)展景深圖像:原始寬場(chǎng)數(shù)據(jù)(左)和應(yīng)用SVCC后的THUNDER數(shù)據(jù)(右)。MAH215:自噬流,GFP(綠色):自噬體,mCherry(紅色):自噬溶酶體。

    圖片來(lái)源:Aditi U. Gurkar博士,美國(guó)匹茲堡大學(xué)醫(yī)學(xué)系。


    結(jié) 論

    與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)成像相比,THUNDER的Small volume computational clearing(SVCC)技術(shù)[5]在對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)成像時(shí)會(huì)顯著增強(qiáng)對(duì)比度,從而解析高度細(xì)節(jié)化和更加清晰的立體圖像。THUNDER技術(shù)具備的zhuo越成像功能有助于對(duì)自噬和老年病之間的關(guān)系進(jìn)行更深入的理解。


    References:(上下滑動(dòng)查看更多)

    1.A.U. Gurkar, K. Chu, L. Raj, R. Bouley, S.-H. Lee, Y.-B. Kim, S.E. Dunn, A. Mandinova, S.W. Lee, Identification of ROCK1 kinase as a critical regulator of Beclin1-mediated autophagy during metabolic stress, Nature Communications (2013) vol. 4, iss. 1, 2189, DOI: 10.1038/ncomms3189.

    2.Y. Aman, T. Schmauck-Medina, M. Hansen, R.I. Morimoto, A.K. Simon, I. Bjedov, K. Palikaras, A. Simonsen, T. Johansen, N. Tavernarakis, D.C. Rubinsztein, L. Partridge, G. Kroemer, J. Labbadia, E.F. Fang, Autophagy in healthy aging and disease. Nature Aging (2021) vol. 1, pp. 634–650, DOI: 10.1038/s43587-021-00098-4.

    3.L. Marchal, S. Hamsanathan, R. Karthikappallil, S. Han, H. Shinglot, A.U. Gurkar, Analysis of representative mutants for key DNA repair pathways on healthspan in Caenorhabditis elegans, Mechanisms of Ageing and Development (2021) vol. 200, 111573, DOI: 10.1016/j.mad.2021.111573.

    4.A.U. Gurkar, M.S. Gill, L.J. Niedernhofer, Genome Stability and Ageing, In A. Olsen, M. Gill, Eds. Ageing: Lessons from C. elegans. Healthy Ageing and Longevity (Springer, Cham., 2017) DOI: 10.1007/978-3-319-44703-2_11.

    5.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note: THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems. 

    6.J.T. Chang, C. Kumsta, A.B. Hellman, L.M. Adams, M. Hansen, Spatiotemporal regulation of autophagy during Caenorhabditis elegans aging, eLife (2017) vol. 6, e18459, DOI: 10.7554/eLife.18459.


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    THUNDER Imager Model Organism

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【THUNDER小課堂】自噬與老年病

秀麗隱桿線蟲(chóng)中自噬過(guò)程的高對(duì)比度成像

通過(guò)使用Small Volume Computational Clearing(SVCC)的THUNDER Imager Model Organism機(jī)型對(duì)模型生物秀麗隱桿線蟲(chóng)(一種線蟲(chóng))進(jìn)行高對(duì)比度成像,可幫助更深入地理解自噬與老年病之間的關(guān)聯(lián)。自噬是一個(gè)自然的過(guò)程,細(xì)胞通過(guò)這個(gè)過(guò)程來(lái)自我毀滅,以產(chǎn)生能量并維持細(xì)胞活性。感染或癌癥等疾病引發(fā)的應(yīng)激通常會(huì)觸發(fā)以病原體或癌細(xì)胞為目標(biāo)的自噬。自噬與年齡相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病之間的關(guān)系尚不清楚,對(duì)這種關(guān)系的深入理解可能有助于維持長(zhǎng)期健康。使用高對(duì)比度THUNDER成像進(jìn)行的秀麗隱桿線蟲(chóng)自噬機(jī)制研究可能有助于將其推向臨床應(yīng)用,從而實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。


引言

自噬是一種受調(diào)節(jié)的自我吞噬過(guò)程,其能幫助細(xì)胞維持穩(wěn)態(tài)并重新獲得能量[1,2]。在基礎(chǔ)狀態(tài)下,自噬可用于長(zhǎng)壽命蛋白的降解等,但它主要是在應(yīng)激反應(yīng)中被誘發(fā)。在感染這樣的應(yīng)激狀態(tài)下,其會(huì)靶向病原體,以進(jìn)行溶酶體降解。在癌細(xì)胞引發(fā)的代謝應(yīng)激中,自噬為細(xì)胞活性提供ATP,保持細(xì)胞活力。癌細(xì)胞會(huì)誘導(dǎo)自噬,使細(xì)胞吃掉自己,從而保護(hù)其免于細(xì)胞死亡。自噬的特征是形成自噬體,并涉及多個(gè)步驟:開(kāi)始、成核、延伸、成熟和降解。雖然自噬與健康有關(guān),但自噬與老年病(如神經(jīng)退行性疾?。┲g的關(guān)系仍不清楚[2]。如果能更好地理解這種關(guān)系,就可能會(huì)開(kāi)發(fā)出能促進(jìn)長(zhǎng)期健康的臨床應(yīng)用。

線蟲(chóng)秀麗隱桿線蟲(chóng)是一種經(jīng)過(guò)充分研究的模型生物,使得我們可以在整體生物中研究自噬和年齡相關(guān)的病理機(jī)制[3,4]。

本文介紹如何使用THUNDER Imager對(duì)自噬和老年病進(jìn)行詳細(xì)的研究。


挑戰(zhàn)

對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)成像時(shí),快速獲得銳利的高對(duì)比度3D成像,清晰展示重要細(xì)節(jié)的解決方案最為實(shí)用。常規(guī)的寬場(chǎng)顯微成像速度快,檢測(cè)靈敏度高,但是對(duì)厚標(biāo)本的成像,如整個(gè)生物體,通常會(huì)出現(xiàn)離焦信號(hào)模糊導(dǎo)致的對(duì)比度降低[5]。


方法

本研究中使用表達(dá)MAH215 [6]、GFP和mCherry的秀麗隱桿線蟲(chóng)。MAH215是一種雙色熒光mCherry:GFP:LGG-1蛋白,其可對(duì)自噬體和自噬溶酶體進(jìn)行可視化,以監(jiān)測(cè)自噬流。GFP(綠色)表示自噬體,而mCherry(紅色)表示自噬溶酶體,后者可在酸性環(huán)境中淬滅GFP,從而導(dǎo)致發(fā)射mCherry信號(hào)。使用THUNDER Imager Model Organism對(duì)線蟲(chóng)進(jìn)行成像應(yīng)用Small volume computational clearing(SVCC)處理圖像[5],然后生成zui大強(qiáng)度投影。


結(jié)果

與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)顯微鏡相比,THUNDER Imager Model Organism能夠清除非焦面信號(hào),對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)進(jìn)行清晰的立體與宏觀成像[5]。這樣,就可以更加詳細(xì)地研究細(xì)胞過(guò)程并對(duì)其定量。

圖1:秀麗隱桿線蟲(chóng)的宏觀擴(kuò)展景深圖像:原始寬場(chǎng)數(shù)據(jù)(左)和應(yīng)用SVCC后的THUNDER數(shù)據(jù)(右)。MAH215:自噬流,GFP(綠色):自噬體,mCherry(紅色):自噬溶酶體。

圖片來(lái)源:Aditi U. Gurkar博士,美國(guó)匹茲堡大學(xué)醫(yī)學(xué)系。


結(jié) 論

與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)成像相比,THUNDER的Small volume computational clearing(SVCC)技術(shù)[5]在對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)成像時(shí)會(huì)顯著增強(qiáng)對(duì)比度,從而解析高度細(xì)節(jié)化和更加清晰的立體圖像。THUNDER技術(shù)具備的zhuo越成像功能有助于對(duì)自噬和老年病之間的關(guān)系進(jìn)行更深入的理解。


References:(上下滑動(dòng)查看更多)

1.A.U. Gurkar, K. Chu, L. Raj, R. Bouley, S.-H. Lee, Y.-B. Kim, S.E. Dunn, A. Mandinova, S.W. Lee, Identification of ROCK1 kinase as a critical regulator of Beclin1-mediated autophagy during metabolic stress, Nature Communications (2013) vol. 4, iss. 1, 2189, DOI: 10.1038/ncomms3189.

2.Y. Aman, T. Schmauck-Medina, M. Hansen, R.I. Morimoto, A.K. Simon, I. Bjedov, K. Palikaras, A. Simonsen, T. Johansen, N. Tavernarakis, D.C. Rubinsztein, L. Partridge, G. Kroemer, J. Labbadia, E.F. Fang, Autophagy in healthy aging and disease. Nature Aging (2021) vol. 1, pp. 634–650, DOI: 10.1038/s43587-021-00098-4.

3.L. Marchal, S. Hamsanathan, R. Karthikappallil, S. Han, H. Shinglot, A.U. Gurkar, Analysis of representative mutants for key DNA repair pathways on healthspan in Caenorhabditis elegans, Mechanisms of Ageing and Development (2021) vol. 200, 111573, DOI: 10.1016/j.mad.2021.111573.

4.A.U. Gurkar, M.S. Gill, L.J. Niedernhofer, Genome Stability and Ageing, In A. Olsen, M. Gill, Eds. Ageing: Lessons from C. elegans. Healthy Ageing and Longevity (Springer, Cham., 2017) DOI: 10.1007/978-3-319-44703-2_11.

5.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note: THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems. 

6.J.T. Chang, C. Kumsta, A.B. Hellman, L.M. Adams, M. Hansen, Spatiotemporal regulation of autophagy during Caenorhabditis elegans aging, eLife (2017) vol. 6, e18459, DOI: 10.7554/eLife.18459.


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THUNDER Imager Model Organism

2023-03-07 11:55:46 210 0
【THUNDER小課堂】腦神經(jīng)發(fā)育

整個(gè)小鼠胚胎的圖像:(左)原始寬場(chǎng)成像結(jié)果和(右)應(yīng)用Large Volume Computational Clearing(LVCC)后的成像結(jié)果。圖片來(lái)源:A. Popratiloff和Z. Motahari,美國(guó)喬治·華盛頓大學(xué)。


本文介紹了如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing(LVCC)對(duì)小鼠胚胎快速、高對(duì)比度成像,實(shí)現(xiàn)了對(duì)軸突生長(zhǎng)和腦神經(jīng)發(fā)育的研究。許多在發(fā)育早期階段損害神經(jīng)回路發(fā)育的遺傳性疾病被認(rèn)為會(huì)對(duì)行為造成干擾。用小鼠模型研究早期神經(jīng)發(fā)育的細(xì)胞變化、定義與人類疾病相似的行為及潛在發(fā)育機(jī)制,是非常困難的。而鑒別發(fā)育的神經(jīng)元回路中三叉神經(jīng)(其參與面部感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)機(jī)能)軸突生長(zhǎng)的早期分化,使得這些困難迎刃而解。


簡(jiǎn)

人們普遍認(rèn)為,很多遺傳性疾病都通過(guò)損害神經(jīng)回路發(fā)育的早期階段來(lái)對(duì)行為產(chǎn)生干擾[1]。事實(shí)證明,在模型動(dòng)物中分辨早期神經(jīng)發(fā)育中細(xì)胞的此類變化具有一定的難度。用與人類遺傳性疾病中臨床顯著缺陷相似的基因突變小鼠模型來(lái)定義行為、神經(jīng)回路和潛在發(fā)育機(jī)制,是非常困難的[1]。檢測(cè)單個(gè)神經(jīng)元初始分化中的變化難以實(shí)現(xiàn)。這些挑戰(zhàn)可通過(guò)確定發(fā)育的神經(jīng)回路中三叉神經(jīng)這一關(guān)鍵組分的軸突生長(zhǎng)的早期分化來(lái)解決[1]。通過(guò)著眼于參與面部感覺(jué)及運(yùn)動(dòng)機(jī)能如哺乳、進(jìn)食、咬、咀嚼和吞咽等的三叉神經(jīng)(腦神經(jīng)V),以及軸突生長(zhǎng)和原生傳導(dǎo)通路,可以對(duì)使用組織學(xué)處理可能會(huì)缺失的三維環(huán)境進(jìn)行研究[1]。本文介紹如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing(LVCC)[2,3]對(duì)小鼠胚胎快速、高對(duì)比度成像,以幫助進(jìn)行腦神經(jīng)發(fā)育研究。


戰(zhàn)

如要以實(shí)用高效的方式對(duì)整個(gè)小鼠胚胎成像,快速、清晰的高對(duì)比度3D成像解決方案,對(duì)于重要細(xì)節(jié)展示和解析大有益處。相較于激光共聚焦成像,可在很短的時(shí)間內(nèi)一次性采集到完整胚胎的成像結(jié)果。傳統(tǒng)寬場(chǎng)顯微成像速度快,檢測(cè)靈敏度高,但是對(duì)厚標(biāo)本的成像,如小鼠胚胎,通常會(huì)由于非焦平面信號(hào)的影響,呈現(xiàn)模糊的成像結(jié)果,降低圖像對(duì)比度[2,3]。


使用THUNDER Imager 3D Cell Culture對(duì)小鼠胚胎成像。使用抗βIII微管蛋白(Tuj1)抗體對(duì)胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)和腦神經(jīng)進(jìn)行染色。結(jié)合BABB透明化處理,即可對(duì)整個(gè)胚胎中的神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行三維結(jié)構(gòu)成像。圖1中的圖像使用數(shù)值孔徑(NA)0.75、工作距離700μm的20x多浸液物鏡采集。該圖像由32個(gè)視野拼接組成,成像深度為672 μm(337層切),采集了完整的胚胎結(jié)構(gòu)。數(shù)據(jù)采集總時(shí)長(zhǎng)為18分鐘。


結(jié)

通過(guò)LVCC和Instant Computational Clearing(ICC)將寬場(chǎng)成像固有的非焦面模糊信號(hào)清除[2,3]。之后,再使用徠卡自適應(yīng)式反卷積技術(shù)來(lái)增強(qiáng)三維特征結(jié)構(gòu)的分辨率[4]。這種成像模式便于觀察胚胎的神經(jīng)結(jié)構(gòu)以及胚胎的整體布局中更有價(jià)值的神經(jīng)元定位

圖1:展示整個(gè)小鼠胚胎的俯視圖,顯示原始數(shù)據(jù)(A)與應(yīng)用LVCC后(B)的差異。根據(jù)相對(duì)物鏡深度進(jìn)行顏色標(biāo)識(shí)的胚胎的角度視圖,其中zui大深度為672 μm。C)應(yīng)用LVCC后的腦部側(cè)視圖,顯示了沿Z軸方向的精密細(xì)節(jié)。圖片來(lái)源:Anastas Popratiloff博士和Zahra Motahari博士,喬治·華盛頓大學(xué)納米制造與成像中心(GWNIC),美國(guó)華盛頓特區(qū)。

結(jié)論

與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)成像不同,THUNDER技術(shù)Large Volume Computational Clearing(LVCC)[2,3]在對(duì)小鼠胚胎中的腦神經(jīng)發(fā)育成像時(shí),顯著增強(qiáng)了圖像對(duì)比度,對(duì)精密細(xì)節(jié)有更好的解析。


References:

1.Z. Motahari, T.M. Maynard, A. Popratiloff, S.A. Moody, A.-S. LaMantia, Aberrant early growth of individual trigeminal sensory and motor axons in a series of mouse genetic models of 22q11.2 deletion syndrome, Human Molecular Genetics (2020) vol. 29, iss. 18, pp. 3081-3093, DOI: 10.1093/hmg/ddaa199.

2.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note: THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems.

3.L. Felts, V. Kohli, J.M. Marr, J. Schumacher, O. Schlicker, An Introduction to Computational Clearing: A New Method to Remove Out-of-Focus Blur, Science Lab (2020) Leica Microsystems.

4.V. Kohli, J.M. Marr, O. Schlicker, L. Felts, The Power of Pairing Adaptive Deconvolution with Computational Clearing: Technical Brief, Science Lab (2021) Leica Microsystems. 


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THUNDER Imager 3D Live Cell 和 3D Cell Culture


2023-04-04 15:58:48 291 0
【THUNDER小課堂】腫瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的成像

本文展示了如何使用THUNDER Imager Tissue和Large Volume Computational Clearing(LVCC)實(shí)現(xiàn)尤文(尤因)肉瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié)觀察,從而協(xié)助本研究的進(jìn)行?;罴?xì)胞成像等技術(shù)在了解腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移研究中至關(guān)重要。真核細(xì)胞中的有絲分裂紡錘體由中空的微管組成。它在有絲分裂期間的細(xì)胞內(nèi)重復(fù)染色體分離和分裂細(xì)胞細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的構(gòu)建過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。在尤文肉瘤這一類的腫瘤細(xì)胞中,有絲分裂障礙的觸發(fā)因子可通過(guò)檢查有絲分裂紡錘體的機(jī)能障礙來(lái)得以確認(rèn)。


簡(jiǎn)介

使用熒光顯微鏡可以研究腫瘤形成和進(jìn)展過(guò)程中組織及細(xì)胞內(nèi)部發(fā)生的變化。像活細(xì)胞成像這樣的技術(shù)對(duì)更加深入地了解腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的。

在真核細(xì)胞中,由中空微管組成的有絲分裂紡錘體,有助于構(gòu)建復(fù)制細(xì)胞的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu),并在有絲分裂過(guò)程中將復(fù)制的染色體從原始細(xì)胞中分離出來(lái)。在尤文肉瘤這一類的腫瘤細(xì)胞中,有絲分裂障礙的觸發(fā)因子可通過(guò)檢查有絲分裂紡錘體的機(jī)能障礙來(lái)得以確認(rèn)[1]。

肉瘤是肌肉或骨骼等結(jié)締組織中形成的一類腫瘤。尤文肉瘤和橫紋肌肉瘤,分別生長(zhǎng)于骨骼和肌肉中,是一種傾向于發(fā)生在骨骼生長(zhǎng)活躍區(qū)域附近的兒科腫瘤。除了手術(shù)和化療之外,電離輻射也被用于治療這類腫瘤,但這可能會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)中的骨骼受到永jiu性損傷,包括不對(duì)稱生長(zhǎng)停滯、脛骨畸形及骨折概率增加等。骨骼損傷的嚴(yán)重度在很大程度上與骨骼接受的輻射劑量成正比。因此,我們有理由認(rèn)為,選擇性放射致敏腫瘤組織的策略可降低實(shí)現(xiàn)局部控制所需的輻射劑量,并能最大限度降低對(duì)鄰近健康組織造成的間接損傷

運(yùn)用體外研究和小鼠異種移植模型系統(tǒng),對(duì)使用mRNA合成抑zhi劑光神霉素A預(yù)處理,可以通過(guò)改變輻射損傷的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)實(shí)現(xiàn)選擇性放射致敏EWS:Fli1+腫瘤細(xì)胞的假設(shè)進(jìn)行了驗(yàn)證[2]。結(jié)果表明,光神霉素A可以通過(guò)抑zhi參與DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄,使EWS:Fli1+細(xì)胞在體內(nèi)外顯著放射增敏,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞程序性死亡[2]。

使用THUNDER Imager Tissue和Large Volume Computational Clearing(LVCC)可以揭示肉瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié),協(xié)助癌癥研究人員獲得更有用的見(jiàn)解。


挑戰(zhàn)

在有絲分裂紡錘體成像中,可對(duì)其實(shí)現(xiàn)快速成像,并獲得清晰的高對(duì)比度3D成像以清晰展示重要細(xì)節(jié)的解決方案最為實(shí)用。傳統(tǒng)的寬場(chǎng)顯微成像速度快,檢測(cè)靈敏度高,但不幸的是對(duì)于厚樣本的成像通常會(huì)出現(xiàn)失焦不清晰或模糊的情況,這會(huì)降低對(duì)比度[3]。要闡明有絲分裂的不穩(wěn)定性在癌癥等復(fù)雜疾病中的作用,這需要在同一樣本中進(jìn)行多個(gè)關(guān)聯(lián)生物學(xué)標(biāo)記。


方法

該研究中使用了尤文肉瘤細(xì)胞(SK-ES-1)。對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行α-微管蛋白(Clone YL1/2 Thermo-Fisher Scientific # MA1-80017,按1:500比例稀釋/ Dylight 488偶聯(lián)驢抗大鼠 Thermo-Fisher Scientific #SA5-10026)、γ-微管蛋白(Clone TU-30,AbCam # ab27074,按1:200比例稀釋/Dylight 550偶聯(lián)驢抗小鼠 Thermo-Fisher Scientific # SA5-10167)和DNA(Hoechst 33342藍(lán))進(jìn)行染色。染色后,使用介質(zhì)ProLong Glass Antifade(Thermo-Fisher Scientific #P36981)進(jìn)行蓋玻片封片,并通過(guò)使用63×/1.4 NA(數(shù)值孔徑)的油鏡進(jìn)行THUNDER Imager Tissue成像。圖像采集使用大體積成像解析(LVCC)[3]模式,并生成最大化投影圖像數(shù)據(jù)


結(jié)果

在有絲分裂過(guò)程中,α-微管蛋白(綠色)形成有絲分裂紡錘體,染色單體(藍(lán)色)會(huì)附著在有絲分裂紡錘體上,而γ-微管蛋白(紅色)集中定位在分裂細(xì)胞中的紡錘極上。通過(guò)THUNDER技術(shù)可觀察到肉瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié)。清晰的圖像可以展示清晰的結(jié)構(gòu),以便進(jìn)行分割和進(jìn)一步的分析。

圖1:尤文肉瘤細(xì)胞SK-ES-1 α-微管蛋白(綠色)、γ-微管蛋白(紅色)和DNA(藍(lán)色)染色后的最大化投影:原始圖像數(shù)據(jù)(左)和THUNDER LVCC模式成像數(shù)據(jù)(右)。


 結(jié) 論 

THUNDER Large Volume Computational Clearing(LVCC)[3]進(jìn)行尤文肉瘤細(xì)胞中的有絲分裂紡錘體成像時(shí)可顯著增強(qiáng)對(duì)比度。與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)成像相比,其可展示細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié)。

References:

1.S. Rello-Varona, D. Herrero-Martín, L. Lagares-Tena, R. López-Alemany, N. Mulet-Margalef, J. Huertas-Martínez, S. Garcia-Monclús, X. García del Muro, C. Mu?oz-Pinedo, O. Martínez Tirado, The importance of being dead: cell death mechanisms assessment in anti-sarcoma therapy, Frontiers in Oncology (2015) vol. 5, p. 82, DOI: 10.3389/fonc.2015.00082.

2.M. Yun Lin, T.A. Damron, M.E. Oest, J.A. Horton, Mithramycin A Radiosensitizes EWS:Fli1+ Ewing Sarcoma Cells by Inhibiting Double Strand Break Repair, Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. (2021) vol. 109, iss. 5, pp. 1454-1471, DOI: 10.1016/j.ijrobp.2020.12.010.

3.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note : THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems.


相關(guān)產(chǎn)品

THUNDER Imager Tissue全景組織顯微成像系統(tǒng)



2023-03-20 14:23:30 920 0
【THUNDER小課堂】D2多巴胺受體在神經(jīng)元中的表達(dá)

小鼠大腦黑質(zhì)的快速、高對(duì)比度成像


本文討論如何通過(guò)使用Instant Computational Clearing(ICC)的THUNDER Imager 3D Assay比傳統(tǒng)寬場(chǎng)顯微鏡更加清晰地觀察小鼠腦黑質(zhì)中的D2多巴胺受體(D2R)。研究人員還可以使用THUNDER Imager優(yōu)化腦樣本的抗體染色。D2R是一種突觸后受體,可在紋狀體中高度表達(dá)。D2R激活會(huì)導(dǎo)致與細(xì)胞分化、生長(zhǎng)、代謝等相關(guān)的信號(hào)通路。D2R在多巴胺能神經(jīng)傳遞和運(yùn)動(dòng)控制中也發(fā)揮著重要的作用。這種類型的神經(jīng)科學(xué)研究旨在更好地理解基因表達(dá)如何調(diào)控帕金森病、肌張力障礙、舞蹈癥和精神錯(cuò)亂等疾病。

簡(jiǎn)  介  

D2多巴胺受體(D2R)是一種突觸后受體,其在紋狀體中高度表達(dá),D2R激活會(huì)導(dǎo)致與細(xì)胞分化、生長(zhǎng)、代謝及凋亡等相關(guān)的信號(hào)通路。D2R在多巴胺能神經(jīng)傳遞和運(yùn)動(dòng)控制中也發(fā)揮著重要的作用。神經(jīng)科學(xué)研究的目的是全方位了解基因表達(dá)的改變?nèi)绾握{(diào)控帕金森病、肌張力障礙、舞蹈癥、嗜睡癥、強(qiáng)迫癥、精神錯(cuò)亂和情緒不穩(wěn)定等疾病引發(fā)的認(rèn)知功能障礙。本研究對(duì)小鼠腦部黑質(zhì)區(qū)[3]神經(jīng)元[1,2]中的D2多巴胺受體表達(dá)水平進(jìn)行了檢測(cè)。使用傳統(tǒng)的熒光寬視場(chǎng)成像時(shí),圖像結(jié)果可能非常模糊,因此,通常會(huì)使用共聚焦顯微鏡來(lái)代替[4]。研究結(jié)果顯示,與傳統(tǒng)寬場(chǎng)顯微鏡相比,通過(guò)使用Instant Computational Clearing(ICC)的THUNDER Imager 3D Assay能更加清晰地觀察到小鼠腦黑質(zhì)致密區(qū)的D2多巴胺受體(D2R)。


挑 戰(zhàn)  

在這種神經(jīng)科學(xué)研究中,能夠快速篩查腦部樣本的成像解決方案會(huì)非常有用。高質(zhì)量的圖像對(duì)于清晰解析被染色的多巴胺受體也必不可少。較厚的樣本需要以良好的對(duì)比度對(duì)其內(nèi)部深處進(jìn)行成像。寬視場(chǎng)顯微鏡成像快速,并具有較高的檢測(cè)靈敏度,但由于非焦平面的信號(hào)干擾,通常會(huì)在厚樣本上觀察到模糊信號(hào),從而顯著降低圖像的對(duì)比度[5,6]。


方 法  

本研究中使用了小鼠大腦黑質(zhì)區(qū)樣本,對(duì)其進(jìn)行免疫染色,以顯示D2多巴胺受體(D2R)(紅色)、神經(jīng)元(TH抗體,綠色)和細(xì)胞核(DAPI,藍(lán)色)。使用倒置的復(fù)合顯微鏡平臺(tái)THUNDER Imager 3D Assay對(duì)腦樣本進(jìn)行了成像,并應(yīng)用了即刻成像解析(ICC)。


結(jié) 果  

在本研究中,ICC后的THUNDER圖像(見(jiàn)圖1)中實(shí)時(shí)顯示了小鼠腦樣本深處的清晰細(xì)節(jié),且無(wú)任何離焦模糊。


圖1:顯示D2R(紅色)、CA神經(jīng)元(綠色)和細(xì)胞核(藍(lán)色)的小鼠腦部圖像。

A) 原始寬場(chǎng)數(shù)據(jù)和 B) 應(yīng)用ICC后的數(shù)據(jù)。

圖片來(lái)源:Qi Wang博士,美國(guó)德克薩斯州休斯頓貝勒醫(yī)學(xué)院。


結(jié) 論

與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)成像結(jié)果相比,THUNDER圖像可以更清晰地顯示被染色受體在腦部的位置。



2023-07-17 14:27:23 260 0
hela細(xì)胞中誘導(dǎo)自噬一般血清饑餓處理多久
 
2017-03-16 06:15:10 607 1
【明華小課堂】氘燈與氙燈的對(duì)比

       光源是光學(xué)系統(tǒng)分析部件的關(guān)鍵組成部分,對(duì)于紫外差分超低排放分析儀而言,一款能在工作波段內(nèi)提供足夠強(qiáng)度的能量,具有連續(xù)穩(wěn)定的輸出,同時(shí)能兼顧使用壽命要求的光源,也就顯得尤為重要。不少光譜分析儀器使用氘燈或氙燈來(lái)提供紫外和可見(jiàn)光區(qū)域能量。

       話不多說(shuō),咱直接進(jìn)入主題,今天的明華小課堂主要從以下4個(gè)方面來(lái)比對(duì)一下氘燈與氙燈之間的優(yōu)劣。

       氘燈的穩(wěn)定性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于氙燈。在紫外煙氣分析儀中,作為整個(gè)光路系統(tǒng)的光源,它的穩(wěn)定性直接決定了儀器的測(cè)量精度及穩(wěn)定性 ,所以氘燈始終是高端紫外光學(xué)儀器的shou選光源。

       氘燈的光譜覆蓋范圍一般為:190~400nm ,氙燈的光譜覆蓋范圍一般為:190~1100nm。氙燈的光譜范圍很寬,除了覆蓋了紫外光還包含部分可見(jiàn)光,但是氘燈在紫外光區(qū)域的總體能量要強(qiáng)于氙燈,而且光譜形狀要比氙燈平緩的多,更能有效YZ由于光譜變化導(dǎo)致的零漂。

       光譜的應(yīng)用范圍越窄,可用的光譜儀的光學(xué)分辨率就能越高 ,所反映的光譜變化也就越精細(xì),非常有利于提高儀器的檢出限。

       氘燈的光譜覆蓋了SO2/NO/NO2等多種氣體的吸收,其中NO計(jì)算所需波段在200nm~230nm。氙燈在200~230nm處能量較低,而氘燈在這一波段具有足夠強(qiáng)度的能量信號(hào),更有利于NO的計(jì)算。

       紫外方法能直接測(cè)量NO2,但存在光譜吸收較弱、干擾大(來(lái)自系統(tǒng)的干擾或其他煙氣成分的干擾 )等難點(diǎn),是所有紫外煙氣分析儀廠家都無(wú)法逃避的問(wèn)題。明華經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究和大量的數(shù)據(jù)驗(yàn)證,在氘燈光譜范圍內(nèi),選取Z優(yōu)的NO2吸收波段,結(jié)合獨(dú)有的分析算法,使得NO2的測(cè)量無(wú)論是零點(diǎn)還是精度都近乎wan美。

       普通的氘燈壽命只有2000小時(shí),明華MH3200型 紫外煙氣分析儀選用的進(jìn)口氘燈采用了特殊的處理工藝,連續(xù)使用8000小時(shí),能量衰減不到百分之四十,完全滿足便攜儀器的應(yīng)用。

       優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的光源加之進(jìn)口高分辨率的光譜儀,為便攜儀器在復(fù)雜煙氣環(huán)境下提取有效光譜信息提供了堅(jiān)實(shí)保障。這是明華選擇氘燈的初衷,也是明華將氘燈作為shou選光源的不二理由。此外,紫外差分算法的穩(wěn)定性、提取有效信號(hào)的能力、處理干擾的能力,更是評(píng)估一款紫外分析儀必要且重要的指標(biāo)。



2020-03-19 10:38:51 839 0
原子熒光小課堂—關(guān)注檢測(cè)細(xì)節(jié)

       隨著食品中重金屬超標(biāo)案例的增多,人們對(duì)于食品中重金屬檢測(cè)的關(guān)注度越來(lái)越高,這對(duì)食品中重金屬的檢測(cè)提出了更高的要求。實(shí)際上,食品檢測(cè)所得到的數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確與否和檢測(cè)中使用的檢測(cè)方法、使用的儀器以及使用的試劑、稱裝試劑的器皿等都有著密不可分的關(guān)系,其中檢測(cè)時(shí)使用的試劑、稱裝試劑的器皿是在檢測(cè)中Z容易被忽略的因素,今天金索坤和大家分享一下在使用原子熒光光度計(jì)檢測(cè)砷、汞等重金屬元素時(shí),使用的試劑和器皿對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的影響。

       首先是檢測(cè)中使用的試劑:有一些實(shí)驗(yàn)操作人員會(huì)認(rèn)為,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中已經(jīng)扣除了空白值,所以試劑底值對(duì)檢測(cè)結(jié)果不會(huì)產(chǎn)生影響。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題,我們可以設(shè)想一下,如果空白的熒光強(qiáng)度100,漂移為5%,那么5個(gè)熒光強(qiáng)度的差值對(duì)測(cè)設(shè)的結(jié)果影響的確不是很大,但如果空白的熒光強(qiáng)度為1000,那么就會(huì)有50個(gè)熒光強(qiáng)度的差值,如果樣品正好也是50個(gè)熒光強(qiáng)度,那么就會(huì)對(duì)測(cè)試結(jié)果產(chǎn)生很大的影響。值得注意的是,不同廠家生產(chǎn)的試劑是不同的,同一廠家不同批號(hào)的試劑也會(huì)有差異,甚至于同一廠家生產(chǎn)的相同批號(hào)的試劑也會(huì)因?yàn)椴煌脑噭┢慷煌?。所以就需要通過(guò)空白試驗(yàn)來(lái)減少試劑對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。

       另外,檢測(cè)過(guò)程中使用到的器皿也可能對(duì)檢測(cè)產(chǎn)生影響。所以器皿在使用前需要用酸浸泡。Z好直接將酸倒入器皿進(jìn)行浸泡,而不是直接將器皿浸泡在酸缸中,因?yàn)樗岣滓部赡鼙晃廴?。配制?biāo)準(zhǔn)溶液的時(shí)候加入重鉻酸鉀可以減少器皿對(duì)汞的吸附。另外,實(shí)驗(yàn)證明與玻璃器皿相比,塑料器皿對(duì)汞的吸附性更小。

       當(dāng)然,除了檢測(cè)時(shí)使用的試劑、稱裝試劑的器皿之外,檢測(cè)中使用的檢測(cè)方法、使用的儀器對(duì)檢測(cè)結(jié)果同樣也有很大影響。原子熒光光度計(jì)作為檢測(cè)砷、汞等重金屬元素的主要儀器,在食品檢測(cè)中發(fā)揮很大作用。北京金索坤技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司作為原子熒光技術(shù)的領(lǐng)跑者,經(jīng)過(guò)三十多年的研究,傾心打造出檢測(cè)元素多、測(cè)試速度快、技術(shù)指標(biāo)好、安裝省事操作省心節(jié)約耗材的新一代原子熒光光度計(jì),提高食品中重金屬檢測(cè)的準(zhǔn)確性。相信有了先進(jìn)的檢測(cè)儀器再加上對(duì)檢測(cè)細(xì)節(jié)足夠關(guān)注一定能很好地完成檢測(cè)任務(wù).

金索坤新SK-盛析 原子熒光光度計(jì)產(chǎn)品特色

1. 增加快速建立標(biāo)準(zhǔn)曲線功能,簡(jiǎn)化操作,提高測(cè)試效率。

2. 無(wú)需動(dòng)力,自動(dòng)排廢,提高反應(yīng)穩(wěn)定性,精簡(jiǎn)裝置。

3. 電路上增加分道信號(hào)控制模塊,可保證雙道同測(cè)砷銻及砷汞同測(cè)時(shí),效果更佳。

4. 氬氣流量采用進(jìn)口質(zhì)量流量計(jì)的數(shù)字控制方式,提高儀器在長(zhǎng)時(shí)間工作下的穩(wěn)定性。

金索坤SK-盛析 原子熒光光度計(jì)




(來(lái)源:北京金索坤技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司)


2019-10-28 09:22:25 486 0
LINSEIS小課堂:《STA 同步分析儀》

     同步熱分析儀(STA)是將熱重分析 (TG )與差熱分析(DTA )或差示掃描量熱 (DSC )結(jié)合為一體,在同一次測(cè)量中利用同一樣品可同步得到熱重與差熱信息的儀器。

STA的應(yīng)用范圍

       具體研究:無(wú)機(jī)物、有機(jī)物及聚合物的熱分解;金屬在高溫下受各種氣體的腐蝕過(guò)程;固態(tài)反應(yīng);礦物的煅燒和冶煉;液體的蒸餾和汽化;煤、石油和木材的熱解過(guò)程;含濕量、揮發(fā)物及灰分含量的測(cè)定;升華過(guò)程;脫水和吸濕;爆炸材料的研究;反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的研究;發(fā)現(xiàn)新化合物;吸附和解吸;催化活度的測(cè)定;表面積的測(cè)定;氧化穩(wěn)定性和還原穩(wěn)定性的研究;反應(yīng)機(jī)制的研究。

LINSEIS STA 優(yōu)點(diǎn)

      1.同步測(cè)量樣品質(zhì)量、熱量變化

      2. -150℃ 至 2400℃,可以同時(shí)搭載雙爐體

      3. 適用氧化還原性氣氛

      4.提供水蒸氣,熱紅、熱質(zhì)聯(lián)用等附件

STA 實(shí)驗(yàn)中注意事項(xiàng)

       1、檢查坩堝是否潔凈、無(wú)破損或裂紋,應(yīng)使用鑷子夾取,避免用手觸摸。干鍋用完后需用超聲處理,然后酒精清洗并干燥。

       2、定期清潔爐腔出氣口,用無(wú)水酒精去除垢物,防止堵塞。

       3、通過(guò)惰性氣氛下草酸鈣的差熱曲線定期檢查儀器的氣密性

tips:高精密儀器使用需要用戶使用嚴(yán)格按照操作手冊(cè)與售后工程師的培訓(xùn),定期的檢修與故障排查能使儀器擁有更長(zhǎng)久的使用壽命。LINSEIS專業(yè)售后團(tuán)隊(duì),期待與您的合作。

2019-11-21 09:32:43 464 0
【百特小課堂】重現(xiàn)性與重復(fù)性有何區(qū)別


2022-03-16 10:34:14 168 0
『色譜耗材小課堂系列』之中藥篇


2023-05-31 11:40:04 181 0
本生課堂:實(shí)驗(yàn)室微量移液器小知識(shí)

 本生課堂:實(shí)驗(yàn)室微量移液器小知識(shí)

  微量移液器是一種標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,用于精確地量取和轉(zhuǎn)移少量液體。市場(chǎng)上有幾種類型的微量移液器,可根據(jù)以下類型進(jìn)行分類:

  體積:固定或可變體積的微量移液器

  操作原理:空氣置換或容積式微量移液器。

  操作機(jī)構(gòu):機(jī)械或電子微量移液器

  通道數(shù):?jiǎn)瓮ǖ阑蚨嗤ǖ牢⒘恳埔浩鳌?/p>

  學(xué)會(huì)正確使用微量移液器被認(rèn)為是一項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)室技能,它是微生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、大學(xué)和研究實(shí)驗(yàn)室廣泛使用的工具。

  


  微量移液器部件:

  盡管微量移液器不盡相同,但所有微量移液器的基本部件都是相同的:

  柱塞是微量移液器的最頂端部分,用于調(diào)節(jié)體積以及將所需量的液體吸入和分配到微量移液器的。柱塞中有兩個(gè)擋塊,用于在正向和反向移液中吸取液體。

  彈出按鈕:只需按下吸頭彈出按鈕,即可輕松從微量移液器中取出吸頭,而無(wú)需接觸它們。

  容量窗口:調(diào)整后的容量顯示在容量窗口中(要吸入/分配的容量)。

  微量移液器軸:是充滿空氣的管子。推動(dòng)活塞排出桿中包含的一定體積的空氣,釋放活塞允許這些空氣返回桿。

  微量移液器吸頭:是附在微量移液器上的吸頭,用于收集液體,然后將其從一個(gè)地方轉(zhuǎn)移到另一個(gè)地方。不同尺寸的吸頭用于收集不同體積的液體。



  微量移液器的類型:

  根據(jù)體積的微量移液器類型

  固定體積微量移液器:固定體積微量移液器的體積不能改變,每次分配時(shí)分配相同數(shù)量的液體。

  可變體積微量移液器:可以根據(jù)微量移液器的容量(特定的最小和體積范圍)調(diào)整要吸取或分配的液體體積。

  根據(jù)操作機(jī)制的微量移液器類型:

  機(jī)械移液器中的柱塞壓力和真空被電動(dòng)移液器中的按鈕所取代,并且可以對(duì)電動(dòng)移液器進(jìn)行編程以遵循您的工作協(xié)議。

  排氣式微量移液器:當(dāng)柱塞被壓下時(shí),它會(huì)下降到儀器內(nèi)部以排出空氣。排出的空氣量等于吸入/分配的液體量。

  容積式微量移液器:柱塞與樣品直接接觸,在這些微量移液器中,包含筒和柱塞(如注射器)。

  微量移液器如何工作?

  當(dāng)柱塞被按下時(shí),由于微量移液器吸頭中的液體也被推出的力,微量移液器套管內(nèi)的空氣被排出。

  當(dāng)活塞向上運(yùn)動(dòng)時(shí),在活塞騰出的空間內(nèi)產(chǎn)生真空。這導(dǎo)致吸嘴中的空氣上升以填充空置空間,然后吸嘴中的空氣被吸入吸嘴的液體代替。

  【本文標(biāo)簽】 移液器 吸頭 移液器吸頭 微量移液器

  本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。


2023-07-21 11:15:47 410 0
干貨| Joe Flow的流變學(xué)小課堂

錐板、平板和同軸圓筒?選擇的煩惱!

       由于現(xiàn)在流變儀用戶通常會(huì)擁有多個(gè)測(cè)試夾具,可以從流變專業(yè)角度表征大部分材料。但是,選擇正確的測(cè)夾具應(yīng)該遵循什么標(biāo)準(zhǔn)呢?

       選擇Z合適的測(cè)試系統(tǒng),需要考慮下列問(wèn)題:

       樣品稠度如何?位于流變之路的哪一段?

       有無(wú)顆粒,粒徑大???

       樣品量有多少?

       容不容易清洗?

       樣品發(fā)生沉降或溶劑是否揮發(fā)?

       不同測(cè)試系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)?


       樣品稠度?

       表1 給出了從低粘度液體到固體不同材料的總覽和大致分類。每一列給出Z通用測(cè)試類型和推薦測(cè)試夾具。

       樣品粘度越低,測(cè)試轉(zhuǎn)子的表面積應(yīng)該要越大。

       低粘度樣品通常使用同軸圓筒測(cè)試系統(tǒng)測(cè)試。在高剪切速率下,離心力導(dǎo)致測(cè)試間隙中產(chǎn)生湍流(Taylor 旋渦),使得表觀粘度增加。因此,不應(yīng)該超過(guò)臨界剪切速率。

       我們的推薦:越是粘性的材料,更應(yīng)該采用類似錐板或平板測(cè)試夾具。



       有無(wú)顆粒,粒徑大???

       測(cè)試系統(tǒng)的選擇也依賴于樣品中顆粒的Z大粒徑。測(cè)試間隙應(yīng)該足夠大,保證顆粒之間無(wú)互相干擾。因此,測(cè)試間隙應(yīng)該至少大于Z大粒徑的5 倍(10 倍更好)。

       這對(duì)錐板夾具更為關(guān)鍵,為防止錐和底板發(fā)生摩擦,在錐頂端打磨掉一定的高度,成為平臺(tái)。圖2 顯示通用錐板的間隙值。

       如果樣品中含有顆粒,會(huì)在頂端發(fā)生聚集,產(chǎn)生不真實(shí)的結(jié)果。

       如果樣品中包含大顆粒,應(yīng)該使用平行板夾具。測(cè)量間隙可以根據(jù)需要設(shè)定(推薦: 0.25 mm ~ 2 mm)。


       有多少樣品可用于測(cè)試?

       有時(shí)由于只有少量樣品而限制了測(cè)試夾具的選擇,因而無(wú)法選擇同軸圓筒測(cè)試系統(tǒng)。

這種情況下,推薦使用錐板或平行板夾具,比如,只有0.09ml樣品,可采用CP40-0.3(直徑: 40 mm, 角度: 0.3°)。


       清洗是否困難?

       如果測(cè)試結(jié)束后測(cè)試系統(tǒng)難以清洗,可更換為平行板或錐板,同軸圓筒測(cè)試系統(tǒng)清洗相對(duì)困難。

所有類型的測(cè)試系統(tǒng)都有一次性配件,可拋棄或者單獨(dú)清洗,一次性配件是固化過(guò)程測(cè)量所需要的。


       樣品是否會(huì)沉淀或揮發(fā)?

       樣品含有溶劑,若使用平行板,錐板或雙間隙系統(tǒng),樣品可能在邊緣變干,導(dǎo)致測(cè)試的粘度偏高。

       因此可能的話,請(qǐng)使用同軸圓筒系統(tǒng),即使樣品表面變干,也不影響測(cè)試結(jié)果。

       當(dāng)使用錐板和平行板測(cè)試系統(tǒng)時(shí),有以下幾種方法防止樣品揮發(fā)變干:

       使用低粘度硅油涂在樣品周圍或表面

       使用防揮發(fā)罩,形成溶劑的飽和蒸氣壓

       如果使用帕爾貼上控溫罩,可以使用專用的防揮發(fā)模塊,達(dá)到Z大程 度的密封和減少樣品裸露面積。

       如果樣品發(fā)生沉降,由于只測(cè)試了液相,樣品粘度可能偏低,對(duì)此類樣品推薦使用同軸圓筒系統(tǒng)。


      不同測(cè)試系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)?



       特殊情況解決方案

       如果樣品滑移,應(yīng)該使用磨砂或刻痕夾具,對(duì)挑戰(zhàn)性樣品需要特殊材質(zhì)的夾具。如果樣品中顆粒粒徑大于1mm,推薦使用球型系統(tǒng)或槳式轉(zhuǎn)子。

       如果使用特殊系統(tǒng),每次都采用相同的方法是很重要的,以獲得可以比較的結(jié)果。



2020-01-14 17:18:04 496 0
安泰小課堂:LCR數(shù)字電橋安全操作指南

LCR數(shù)字電橋是用來(lái)仿真元器件正常工作條件下的電感,電容,阻抗的儀器,能夠執(zhí)行從毫歐至兆歐低頻到 GHz 的元器件阻抗分析,測(cè)量參數(shù)包含 Z、Y、θ、Rs(ESR)、Rp、Rdc(直流電阻)、X、G、B、Cs、Cp、Ls、Lp、D(tanδ)、Q,更進(jìn)一步的還包括測(cè)量速度,以及在測(cè)試中施加電壓或者電流偏置的功能,廣泛用于半導(dǎo)體元件測(cè)試、介質(zhì)材料測(cè)試、半導(dǎo)體元件測(cè)試等,今天安泰測(cè)試就給大家分享一下LCR數(shù)字電橋安全操作指南,希望大家在使用LCR數(shù)字電橋能夠注意:

一、確保正確接地

1、一定要使用儀器隨附的三相交流電源線。

2、進(jìn)行正確的接地可防止產(chǎn)生對(duì)儀器和操作人員有害的靜電。

3、不要使用會(huì)導(dǎo)致接地保護(hù)失效的無(wú)保護(hù)接地導(dǎo)體的引出線、電源線或自耦變壓器。

4、使用前務(wù)必檢查交流電源的質(zhì)量和極性。一般情況下儀器使用的電壓為 100V、120V、220V( 誤差 ±10%) 或 240V( 誤差+5%/-10%)。典型的接地電阻值 <1Ω,零線和地線之間的電壓 <1V,必要時(shí)可能需要配置不間斷電源 [UPS]。

二、LCR數(shù)字電橋的使用注意事項(xiàng)

1、為保證操作人員的人身安全,在將電源接至儀器前,應(yīng)檢查使用場(chǎng)合的電源線、零線、保護(hù)地線是否與大地連接,以防機(jī)殼帶電。

為確保儀器的安全,在將電源接至儀器錢,應(yīng)查看儀器的電源是 AC220V 還是 AC110V。因?yàn)榇蟛糠謨x器的電源接口可作AC220V(AC240V)、AC110V(AC110V)的選擇。若不注意而插錯(cuò)電源,輕則燒斷保險(xiǎn),重則燒壞儀器。一單保險(xiǎn)燒壞,所更換保險(xiǎn)的標(biāo)稱電源值不能超過(guò)儀器上所指示的電流值,否則接錯(cuò)電源后保險(xiǎn)不起作用會(huì)燒壞儀器。

2、預(yù)熱

接通電源后,顯示屏應(yīng)有顯示。有自檢功能的儀器,應(yīng)在其自檢通過(guò)后,預(yù)熱 10 分鐘或按說(shuō)明書(shū)規(guī)定時(shí)間預(yù)熱后開(kāi)始使用。

3、接線

一般 LCR 表的測(cè)量段接口有五端。分別為:HD(電流高端)、HS(電壓高端)、LS(電壓低端)、LD(電流低端)、GND(接地端),每個(gè)測(cè)試端均有屏蔽層與機(jī)殼相連。用作測(cè)量的電纜長(zhǎng)度應(yīng)盡量短,有屏蔽的電纜較理想。

4、遵守防靜電規(guī)程

靜電放電(ESD)可能損傷或損壞電子元件。一定要盡可能在防靜電工作區(qū)進(jìn)行測(cè)試。將產(chǎn)生靜電的材料與所有元件分開(kāi)至少一米遠(yuǎn)。

5、檢查溫度和濕度

請(qǐng)務(wù)必將儀器保存在潔凈、干燥的環(huán)境中。典型的最佳工作溫度為 23° C 至 -5° C,環(huán)境溫度不要超過(guò) 35° C。

6、經(jīng)常檢查并及時(shí)清潔散熱孔和散熱風(fēng)扇。

7、保持工作環(huán)境整潔。塵土可能會(huì)造成儀器因?yàn)殪o電而損壞,積攢在風(fēng)扇上的塵垢,有時(shí)會(huì)造成儀器不能啟動(dòng)。

以上就是安泰測(cè)試為大家分享的LCR數(shù)字電橋安全操作指南,建議大家在使用儀器時(shí)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,正確的操作儀器不僅可以延長(zhǎng)儀器使用壽命,還能讓你高效的工作,如果大家在使用LCR數(shù)字電橋過(guò)程中有什么問(wèn)題,歡迎咨詢安泰測(cè)試網(wǎng)www.agitek.com.cn。 


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