參與評(píng)論

評(píng)論

登錄后參與評(píng)論

全部評(píng)論(3條)

• 

  叢中笑燁 2011-03-23 00:00:00

  除色譜柱有特別說(shuō)明（可以反沖），一般還是不要反沖，容易把填料沖壞，非要反沖的話（倒過(guò)來(lái)接就可以了）注意時(shí)間不要太長(zhǎng)。

  贊(12)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論

• 

  chenliGX 2017-09-28 15:29:39

  反向沖洗柱子的好處是有的，當(dāng)一個(gè)色譜柱壓力過(guò)大的時(shí)候可以反沖。反沖的時(shí)候要注意以下幾點(diǎn)： 1.反沖由于可以把柱子入口出的雜志沖洗下來(lái)，所以要把檢測(cè)器斷開(kāi)，以免污染流通池，甚至堵塞流通池。 2.反沖時(shí)應(yīng)該把流速調(diào)至底流速長(zhǎng)時(shí)間來(lái)沖洗。 3.根據(jù)自己用的柱子情況分析到底是什么原因堵塞，可以用易溶于污染物的溶劑來(lái)清洗。目前較多的是緩沖鹽鹽析造成，可以用大量的水來(lái)沖洗。 4.反沖后要把柱子正過(guò)來(lái)使用，盡量避免長(zhǎng)期反復(fù)正反使用。 5.除色譜柱有特別說(shuō)明（可以反沖），一般還是不要反沖，容易把填料沖壞，非要反沖的話（倒過(guò)來(lái)接就可以了）注意時(shí)間不要太長(zhǎng)。

  贊(11)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論

• 

  焚嶼g 2011-04-01 00:00:00

  轉(zhuǎn)載”《分析測(cè)試百科網(wǎng)》實(shí)用資料！色譜柱沖洗一點(diǎn)意見(jiàn)??！ 主要針對(duì)的反向色譜柱而講！ 1.色譜柱簡(jiǎn)介 Z常用的色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性添充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠Z為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類(lèi)型的硅烷鍵合硅膠(如氰基硅烷鍵合相和氨基硅烷鍵合相等)也有使用，正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換填充劑用于離子交換色譜;凝膠或高分子多孔微球等填充劑用于分子排阻色譜;手性鍵合填充劑用于對(duì)映異構(gòu)體的拆分分析。 填充劑的性能(如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團(tuán)的表面覆蓋度、含炭量和鍵合類(lèi)型等)以及色譜柱的填充，直接影響待測(cè)物的保留行為和分離效果?？讖皆?5nm(1nm=10埃)以下的填料適合于分析分子量小于 2000的化合物，分子量大于2000的化合物則應(yīng)選擇孔徑在30nm以上的填料。以硅膠為載體的一般鍵合固定相填充劑適用PH2~8的流動(dòng)相。當(dāng)PH大于8時(shí)，可使載體硅膠溶解;當(dāng)PH小于2時(shí)，與硅膠相連的化學(xué)鍵合相易水解脫落。當(dāng)色譜系統(tǒng)中需使用PH大于8的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐堿的填充劑，如采用高純硅膠為載體并具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠、包裹聚合物填充劑、有機(jī)-無(wú)機(jī)雜化填充劑或非硅膠填充劑等;當(dāng)需使用PH小于2的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐酸的填充劑，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護(hù)作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠、有機(jī)-無(wú)機(jī)雜化填充劑等。 2.色譜柱的沖洗體積確定 一般情況都是沖洗色譜柱10-20倍柱體積，具體可以這樣計(jì)算，根據(jù)柱內(nèi)徑和柱長(zhǎng)算出色譜柱內(nèi)體積。短柱一般時(shí)間就是30分鐘、長(zhǎng)柱一般沖洗60分鐘就可以了。舉例：內(nèi)經(jīng)為4.6mm、長(zhǎng)250mm，其柱內(nèi)體積=3.14*4.6*4.6/4*250=4.153毫升，流速是1.0毫升每分鐘，折中取15被柱內(nèi)體積，則沖洗時(shí)間就出來(lái)了。 3.色譜柱沖洗 沖洗色譜柱Z好在分析結(jié)束后，用流動(dòng)相沖洗到基線平穩(wěn)，然后用10%左右的有機(jī)溶劑沖洗色譜柱，主要是沖洗干凈流動(dòng)相中的緩沖鹽。然后用100有機(jī)溶劑沖洗。Z好是梯度變化沖洗。分析物可能為一些能溶解在水中，有些需要用純?nèi)軇┎拍芡耆コ?。如果分析時(shí)間緊迫一定要把鹽分沖洗干凈，一般情況不要用純水沖洗色譜柱，特別是反向柱的填料的鍵合集團(tuán)容易折斷，對(duì)色譜柱造成損傷。色譜柱被使用在某種程度上就是開(kāi)始被污染了，所以色譜柱的壽命和我們使用的情況有很大的關(guān)系。雖然被污染但是對(duì)我們分析目標(biāo)物沒(méi)有造成影響我們也就是認(rèn)為還能用。 4.色譜柱維護(hù)沖洗 常見(jiàn)故障篩板阻塞，解決辦法是：a、過(guò)濾流動(dòng)相;b、過(guò)濾樣品;c、運(yùn)用在線過(guò)濾或保護(hù)柱。 柱頭塌陷解決方法是：：a、避免使用PH>8的流動(dòng)相(針對(duì)大部分硅膠的柱子);b、使用保護(hù)柱 ;c、使用預(yù)柱(飽和色譜柱)。 前面談到的不管用什么溶劑一定要加入一定比例的用機(jī)溶劑，主要是考慮到一些疏水基團(tuán)在有機(jī)溶劑里面容易伸展利于沖洗其包藏的雜質(zhì)等。當(dāng)我們的色譜柱在壓力和柱效下降時(shí)，我可以拆開(kāi)泵近端柱頭的螺絲取出篩板，清洗篩板以及觀察里面的填料，如填料污染嚴(yán)重，就要進(jìn)行挖取一部分被污染的填料然后用其他廢棄的柱子相同填料來(lái)填補(bǔ)，用新的篩板或清洗好的篩板擰好螺絲。然后沖洗觀察柱壓變化和測(cè)試柱效等。 5.特殊沖洗 強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積，對(duì)樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰形變寬、拖尾，使柱效下降，同時(shí)也會(huì)引起保留時(shí)間的變化，累積到一定程度時(shí)還會(huì)導(dǎo)致柱壓升高。由于強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物對(duì)色譜分離的影響是一個(gè)累積效應(yīng)，需要一定的時(shí)間才會(huì)體現(xiàn)出來(lái)，但對(duì)許多樣品特別是復(fù)雜樣品而言，很難判斷其是否含有強(qiáng)保留物質(zhì)，因此要防止強(qiáng)保留物質(zhì)的累積，需要在每天的日常維護(hù)中用純甲醇或乙腈清洗色譜柱。 清洗方法： 1.未使用緩沖鹽：每天分析完成后，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。 2. 使用過(guò)緩沖鹽：分析完成后，先用上述方法除去緩沖鹽，然后再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱 60min。 3.補(bǔ)救方法： 水——乙腈——氯仿(或異丙醇)——乙腈——水 每一步以 1.0ml/min 流速反向沖洗色譜柱 60min。 希望大家提出更好的建議和辦法。 朋友可以到行業(yè)內(nèi)專業(yè)的網(wǎng)站進(jìn)行交流學(xué)習(xí)！ 分析測(cè)試百科網(wǎng)這塊做得不錯(cuò)，氣相、液相、質(zhì)譜、光譜、藥物分析、化學(xué)分析、食品分析。這方面的專家比較多，基本上問(wèn)題都能得到解答，有問(wèn)題可去那提問(wèn)，網(wǎng)址百度搜下就有。

  贊(13)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論