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  pptang10 2008-09-13 00:00:00

  色譜柱柱效降低，經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相處理使其柱效有所恢復(fù)。我一般直接倒用，再堅(jiān)持一陣。

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  明陽(yáng)天 2017-09-15 12:10:41

  色譜柱使用久了，會(huì)出現(xiàn)分離度降低，理論塔板數(shù)降低等柱效降低的現(xiàn)象，適當(dāng)處理能使柱效恢復(fù)。但不是所有柱子 都能倒沖的，Z好問(wèn)問(wèn)生產(chǎn)商。不了解的話，還是按下面的方法處理一下試試。 常規(guī)處理:硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱每一次用完后用低流速長(zhǎng)時(shí)間的二氯甲烷或正己烷等溶劑沖洗;鍵合相硅膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱先用蒸餾水沖洗，再用甲醇沖洗，然后用甲醇與蒸餾水以一定比例混合的溶液沖洗后過(guò)夜。 對(duì)于已使用一段時(shí)間后柱效下降的色譜柱可按以下方法進(jìn)行再生。再生處理包括活化(右→左)和凈化(左→右)兩種。硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱按下列順序沖洗:三甲基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。鍵合相硅膠柱:蒸餾水←→甲醇(沖洗過(guò)程中可加入少量二甲基甲酰胺)。離子交換樹(shù)脂柱:高濃度的NaCl溶液(1-2molL的NaCl溶液)可使大部分樹(shù)脂再生，油脂等少數(shù)與樹(shù)脂緊密結(jié)合的物質(zhì)可用低濃度堿溶液(如0.1molL的NaOH溶液)沖洗，酸性有機(jī)物吸附在固定相的用低pH緩沖液沖洗，堿性有機(jī)物用高pH緩沖液沖洗，然后再用蒸餾水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸餾水沖洗。凝膠色譜柱:由于凝膠色譜柱是根據(jù)被分離物質(zhì)的分子量大小而分離物質(zhì)，通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑(0.2%-1%NP-40或Lubrol)沖洗可除去大部分的結(jié)合物質(zhì)，如果一些污染物仍然不能清除時(shí)，用24%或30%乙腈沖洗過(guò)夜可除去疏水蛋白，用30%-50%乙酸可除去親水蛋白，用蛋白水解酶處理可分解凝膠中剩余的痕量胃蛋白酶，然后再用蒸餾水←→甲醇←→蒸餾水沖洗。 已污染的色譜柱的處理:因保留強(qiáng)的物質(zhì)污染，流動(dòng)相或樣品中不溶物沉積于柱頭，可用下列方法洗滌:去除脂類可用四氫呋喃、乙腈或甲醇洗滌;去除蛋白質(zhì)可用乙腈、丙醇和1%三進(jìn)行梯度洗脫;一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脫，同時(shí)反復(fù)注入100-200ml的四氫呋喃。 柱頭處理:對(duì)于柱頭堵塞污染嚴(yán)重的情況而且用溶劑沖洗無(wú)效的色譜柱，只有打開(kāi)柱子去除柱頂?shù)奶盍现匮b:先拆下不銹鋼燒結(jié)過(guò)濾器，檢查柱床，常見(jiàn)凹陷或受污染的帶色填料，剔去不規(guī)則床層和帶色填料，使柱床顯白色并完全水平，再用甲醇作糊狀填料勻漿液，將糊狀填料勻漿液滴在柱上靠重力從勻漿液中排出甲醇液，重復(fù)直到填料水平。 柱子的貯存:首先柱子必須清洗干凈后才能貯存，柱子不能貯存在水或水性溶劑中，否則會(huì)引起微生物的滋生。極性色譜柱可用適當(dāng)溶劑如二氯甲烷沖洗;鍵合相色譜柱用甲醇沖洗;陰離子交換色譜柱用0.002%洗必泰(雙氯苯雙胍己烷)的緩沖液沖洗，陽(yáng)離子交換色譜柱用0.005%硫柳汞緩沖液沖洗;凝膠色譜柱用緩沖液中加0.02%疊氮化鈉或用20%乙醇沖洗。再將柱子兩頭密封，以防止溶劑蒸發(fā)使柱子干燥而引起柱子結(jié)構(gòu)的幾何學(xué)改變。

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