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問答社區(qū)

常規(guī)PAGE和SDS PAGE電泳有何異同?

1662614205白波 2009-01-04 14:48:45 584  瀏覽
  • 從原理等分析,考試要考的,拜托大家了

參與評(píng)論

全部評(píng)論(4條)

  • 紫依飄苓 2009-01-07 00:00:00
    SDS是一種陰離子去垢劑,能讓寡聚體蛋白中不同的亞基分離,而不能使二硫鍵打開。如果想讓二硫鍵打開,必須要用2-巰基乙醇或過氧酸來處理。(二樓的回答還是比較準(zhǔn)確的) 常規(guī)PAGE又稱Native-PAGE,是在不改變蛋白質(zhì)的活性的基礎(chǔ)上做的電泳,即不加入任何變性劑。

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    評(píng)論

  • 何度未來 2009-01-07 00:00:00
    主要就是看有沒有sds,sds的作用相當(dāng)與把蛋白質(zhì)包一層膜,從而屏蔽電子大小帶來的作用,蛋白質(zhì)的移動(dòng)速度只與該蛋白大小有關(guān)。

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    評(píng)論

  • xuan5036126 2009-01-05 00:00:00
    SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中引進(jìn)SDS(十二烷基硫酸鈉), SDS能斷裂分子內(nèi)和分子間氫鍵,破壞蛋白質(zhì)的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),強(qiáng)還原劑能使半胱氨酸之間的二硫鍵斷裂,蛋白質(zhì)在一定濃度的含有強(qiáng)還原劑的SDS溶液中,與SDS分子按比例結(jié)合,形成帶負(fù)電荷的SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物,這種復(fù)合物由于結(jié)合大量的SDS,使蛋白質(zhì)喪失了原有的電荷狀態(tài)形成僅保持原有分子大小為特征的負(fù)離子團(tuán)塊,從而降低或消除了各種蛋白質(zhì)分子之間天然的電荷差異,由于SDS與蛋白質(zhì)的結(jié)合是按重量成比例的,因此在進(jìn)行電泳時(shí),蛋白質(zhì)分子的遷移速度取決于分子大小。當(dāng)分子量在15KD到200KD之間時(shí),蛋白質(zhì)的遷移率和分子量的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW為分子量,X為遷移率,k、b均為常數(shù),若將已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的遷移率對(duì)分子量對(duì)數(shù)作圖,可獲得一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,未知蛋白質(zhì)在相同條件下進(jìn)行電泳,根據(jù)它的電泳遷移率即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得分子量。

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    評(píng)論

  • 沾化人lv 2017-12-16 15:42:53
    利用的原理都是膠體的電泳,自由平面(介質(zhì))都相同,SDS是在原有的PAGE基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),就是加了SDS使樣品(蛋白)的荷質(zhì)比相同,形狀都變成長(zhǎng)圓柱體,則樣品的遷移率就只與分子量有關(guān),可以較準(zhǔn)確的分離開質(zhì)量不同的成份,目的比一般的電泳更明確

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    評(píng)論

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