Bicine緩沖劑即二羥乙基甘氨酸，CAS號(hào)150-25-4，他和Tr is一樣具有優(yōu)越的緩沖性能，是一種用途非常廣泛的生物緩沖劑，在一些要求高的生化檢測(cè)中漸漸取代傳統(tǒng)的磷酸鹽緩沖液。

Bicine緩沖劑即二羥乙基甘氨酸，CAS號(hào)150-25-4，是一種用途非常廣泛的生物緩沖劑，他和Tris一樣具有很好的緩沖性能，在一些要求高的生化檢測(cè)中漸漸取代傳統(tǒng)的磷酸鹽緩沖

Bicine是一種氨基酸衍生物，偏弱酸性，pH緩沖范圍是7.6-90，可溶于水以及常用的有機(jī)溶劑如DMF，DMSO，DMAc等。將粉末狀bicine配成溶液時(shí)，通常加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值，以到達(dá)實(shí)驗(yàn)或檢測(cè)需要的pH環(huán)境要求。如果實(shí)驗(yàn)環(huán)境需要排除鈉離子的干擾，則可以使用氫氧化鉀代替氫氧化鈉，再通過pH計(jì)測(cè)量pH調(diào)節(jié)Bicine溶液和堿液混合比例即可。

與其它生物緩沖劑的工作原理類似，Bicine因其具有兩性，當(dāng)反應(yīng)體系中加入酸和堿或者隨著反應(yīng)的進(jìn)行反應(yīng)環(huán)境的pH發(fā)生改變時(shí)，它能起到緩沖的作用，維持反應(yīng)體系的p值生化檢測(cè)中有酶或者蛋白及核算參與的反應(yīng)時(shí)直觀重要的，多數(shù)有機(jī)生物分子穩(wěn)定性及功能性對(duì)pH非常敏感

Bicne分子結(jié)構(gòu)與甘氨酸類似，氨基氮原子上的氫被兩個(gè)羥乙基取代，降低了氨基端的

水解能力，提高了其穩(wěn)定性同時(shí)具有氨基酸和氨基乙醇的性質(zhì)能夠以單陰離子(Bic-)形成金

屬配合物。用Bicine與氫氧化鈉配置成的緩沖體系，不會(huì)參與反應(yīng)體系的化學(xué)反應(yīng)，也不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)產(chǎn)生干擾，可耐化學(xué)作用和酶解作用。

德晟是一家專門從事生化檢測(cè)、體外診斷原料生產(chǎn)研發(fā)的廠家，在血液預(yù)處理、血液前處理及生化試劑盒方向有著豐富經(jīng)驗(yàn)，目前成熟的產(chǎn)品系列有采血管添加劑、顯色試劑、學(xué)發(fā)光試劑以及包含Bcine等十多種Goods試劑在內(nèi)的生物緩沖劑。專業(yè)廠家值得信賴。

Bicine(N,N-二羥乙基甘氨，CAS: 150-25-4)是一種白色粉末，它被廣泛用作緩沖劑的有機(jī)化合物。Bicine是兩性離子生物緩沖劑，通常在生物和生化研究中用作緩沖劑。它是Good’s的緩沖液之一，在20°C時(shí)的pKa為8.35。它是通過甘氨酸與環(huán)氧乙烷反應(yīng)，然后將所得內(nèi)酯水解而制備的。Bicine可用于氣體脫硫的胺系統(tǒng)中的污染物。它是在O 2，SO 2，H 2 S或硫代硫酸鹽存在下通過胺降解形成的。

1. Bicine作為Good's Buffer通常用于蛋白質(zhì)結(jié)晶的溶液中

Bicine是用途非常廣泛的一種Buffer,用于酶反應(yīng)緩沖液，電泳緩沖液，工作濃度從3-100mM。用于生物緩沖液，特別是低溫生化研究用；用于制備測(cè)定血清鳥嘌呤酶的穩(wěn)定底物溶液；采用交聯(lián)葡聚糖通過等速電泳對(duì)血漿蛋白進(jìn)行分級(jí)分離中的間隔臂。

2. Bicine已在色譜和聚合酶鏈反應(yīng)中用作緩沖劑

Bicine是一種兩性氨基酸緩沖劑，在pH7.6-9.0范圍內(nèi)（25°C時(shí)pKa為8.3）有活性。是低溫生化反應(yīng)推薦使用的緩沖液。且其具有不參加和不干擾生物化學(xué)反應(yīng)過程，可耐化學(xué)作用和酶解作用等優(yōu)點(diǎn)，因此常在色譜和聚合酶鏈反應(yīng)中被用作緩沖劑。

3. Bicine在陽離子交換色譜中的流動(dòng)相緩沖液和洗脫液

Bicine在薄層離子交換中的用途用于蛋白質(zhì)拆分層析方法已經(jīng)得到證實(shí)。Bicine已用于肽和蛋白質(zhì)結(jié)晶。四元過渡態(tài)類似物肌酸激酶在反應(yīng)緩沖液中使用了Bicine。一種蛋白質(zhì)SDS-PAGE的多相緩沖液系統(tǒng)并結(jié)合了Bicine的肽已經(jīng)被廣泛應(yīng)用在體外診斷臨床試驗(yàn)中。

4. 作為螯合劑應(yīng)用于土壤修復(fù)。

由于Bicine分子中含有兩個(gè)-OH，一個(gè)-COOH，有良好的螯合性能，能夠螯合銅、鎘，以及鉛離子等重金屬離子，但不能螯合鈣鎂離子。因此，Bicine常作為螯合劑用于修復(fù)重金屬污染的土壤。Bicine|150-25-4|在中性和酸性條件下對(duì)重金屬都有很好的洗脫能力，能夠高xiao去除污染土壤中的Cu、Cd、Pb的離子，Bicine|150-25-4|為活性組分的淋洗液，不僅能淋洗修復(fù)重金屬污染土壤，而且可避免土壤中植物營(yíng)養(yǎng)元素鈣鎂的流失，安全環(huán)保，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成二次污染。

德晟是專業(yè)體外診斷試劑及采血管添加劑試劑供應(yīng)商，專業(yè)提供如：CAPS，MOPS，TRIS，MOPSO，HEPES等緩沖劑及各種抗凝和促凝試劑。我司生產(chǎn)的緩沖劑純度＞99%，吸光度＜0.05，水溶性好，工藝穩(wěn)定，可保證產(chǎn)品外觀為純白色晶體粉末。

PIPES，中文名為1-4-哌嗪二乙磺酸，是一種兩性緩沖液pH緩沖范圍是6.1-75，不溶于水，溶于NaOH水溶液。其在pH7.2-74范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用生物緩沖這樣的溶液叫做緩沖溶液。

PIPES緩沖劑的應(yīng)用:

PIPES緩沖劑廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)，色譜，化妝品，診斷測(cè)試，蛋白質(zhì)純化和電子顯微鏡研究。PIPES緩沖劑類似于MES緩沖劑和MOPS緩沖劑，不過該生物緩沖劑缺乏與大多數(shù)金屬離子形成螯合物的能力，所以在金屬離子溶液中推薦用作非配位緩沖劑。

PIPES緩沖劑的優(yōu)勢(shì):

近段時(shí)間從專業(yè)文獻(xiàn)上得知，在人體皮膚，人體肥厚疤以及軟體動(dòng)物神經(jīng)組織等各種組織的超微結(jié)構(gòu)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)所使用的戊二醛溶液中，相比較添加NaOH-PIPES緩沖劑與PIPES緩沖劑的差異。結(jié)果表明，添加了NaOH-PIPES緩沖劑后可以幫助研究人員觀察到細(xì)胞器和組織之間的更多細(xì)節(jié)，并且細(xì)胞質(zhì)的一致性更均勻。如果添加NaOH-PIPES緩沖劑則能更普遍的觀測(cè)到微絲和微管。此外，證明了PIPESBuffer與培養(yǎng)物中的活細(xì)胞具有可比性。

PIPES不同于含二(2-羥乙基)氨基基團(tuán)的緩沖劑(如Bis-tris，Bicine)，與多數(shù)金屬離子不能形成穩(wěn)定配合物，適用于含有金屬離子的溶液體系中的緩沖劑。根據(jù)已有的研究結(jié)果PIPES可被應(yīng)用于使用磷酸纖維素色譜純化微管蛋白，用于凝膠過濾法純化重組GTP結(jié)合蛋白ARF1和ARF2，作為緩沖液從大腸桿菌中結(jié)晶轉(zhuǎn)酮酶。另外，由于PIPES能形成自由基，因此不適合應(yīng)用于氧化還原體系。在陽離子交換色譜法，應(yīng)當(dāng)使用低濃度的PIPES緩沖液，這是因?yàn)镻IPES具有相對(duì)較大的離子強(qiáng)度，而且其pKa值具有濃度依賴性。

如何選擇緩沖劑？

選擇緩沖體系，其解離常數(shù)pKa值應(yīng)該在設(shè)定的pH上下一個(gè)pH值單位內(nèi)，因?yàn)榫彌_液的pKa變化超過一個(gè)pH單位時(shí)，其緩沖能力就會(huì)明顯下降；

緩沖體系不應(yīng)影響蛋白質(zhì)的活性或者DNA的穩(wěn)定性，并避免其他離子的干擾；

另外，還要考慮溫度的影響：溫度不僅對(duì)緩沖液有影響，對(duì)細(xì)胞也有影響，大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞在37℃的生理狀況下pH為7.0~7.5，而在溫度下降到0℃時(shí)可達(dá)到8.0。

一、磷酸鹽緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：

是使用很廣泛的一種緩沖劑，由于它有二級(jí)解離，所以緩沖的pH值范圍很廣，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液。

優(yōu)點(diǎn)：

易配成各種濃度

適用pH范圍寬

pH受溫度影響小

稀釋后pH變化小

缺點(diǎn)：

易與常見的鈣離子、鎂離子及重金屬離子締合成沉淀。

二、Tris緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：

Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍。

優(yōu)點(diǎn)：

堿性較強(qiáng)，可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的但范圍pH緩沖液；

對(duì)生物化學(xué)過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀；

易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封；

此緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

缺點(diǎn)：

pH受濃度影響較大，稀釋10倍，pH變化大于0.1

溫度效應(yīng)大，如4℃時(shí)pH=8.4，37℃時(shí)pH=7.4

三、HEPES緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：

HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。

優(yōu)點(diǎn)：

在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時(shí)能維持較恒定的pH值，并對(duì)細(xì)胞無毒性作用。

缺點(diǎn)：

在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒，與其他緩沖劑相比價(jià)格略貴。

四、PIPES緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：

PIPES是哌嗪緩沖液家族的一員，與HEPES屬于同一家族。它是兩性離子Good's緩沖液，在6.1至7.5的pH范圍內(nèi)有效。由于pH范圍與HEPES略有不同，PIPES的濃度僅為HEPES濃度的一半。

優(yōu)點(diǎn)：

該緩沖劑不會(huì)與金屬絡(luò)合，因此可用于含金屬離子的溶液；

可以用于色譜分析，電子顯微鏡固定植物細(xì)胞，以及代替草甘膦緩沖液。

缺點(diǎn)：

當(dāng)溶液的pH值升高到6.5以上時(shí)，PIPES的游離酸才容易溶解，但是PIPES的鈉鹽很容易溶解；

如果使用的是游離酸形式的緩沖液，請(qǐng)使用氫氧化鈉將其轉(zhuǎn)化為鈉鹽，以提高在較低pH下的溶解度；

像HEPES一樣，PIPES不適用于涉及氧化還原反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)，因?yàn)樗鼤?huì)導(dǎo)致自由基的形成。

目前新冠病毒不斷，對(duì)于人類日常生活都造成了嚴(yán)重的影響。核酸檢測(cè)是新冠病毒的一種檢測(cè)方法，在核酸檢測(cè)的具體流程中，核酸提取是十分關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。根據(jù)已公開報(bào)道，TRIS、EDTA等試劑在核酸提取中發(fā)揮著重要的作用。

核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，包括脫氧核糖核酸和核糖核酸兩類，是生命的最基本物質(zhì)之一。核酸提取是指利用物理、化學(xué)等方法將核酸從樣品中分離出來的過程，是核酸擴(kuò)增、DNA片段連接、載體構(gòu)建、高通量測(cè)序等一系列分子生物學(xué)分析的前提技術(shù)，是生命科學(xué)研究、生物及時(shí)應(yīng)用及基因診斷中非常重要的一項(xiàng)技術(shù)，因此，核酸的提取具有十分重要的意義。

一般來說，核酸提取是需要多步驟的工作，首先需要對(duì)細(xì)胞、組織材料等生物樣本材料進(jìn)行破碎處理，失活核酸酶，釋放核酸，而TRIS、EDTA等試劑的作用主要體現(xiàn)在釋放核酸環(huán)節(jié)。

核酸在酸性溶液中易水解，在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。而TRIS即三羥甲基氨基甲烷，PH緩沖范圍：7.0-9.0，能夠維持待提取樣品裂解后釋放的核酸的穩(wěn)定性，以避免核酸的降解，提高核酸的濃度和純度。

EDTA即乙二胺四乙酸，其能夠與Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等金屬離子結(jié)合，可防止金屬離子激活蛋白酶，從而減少金屬離子對(duì)核酸質(zhì)量的影響。

綜上，TRIS、EDTA等試劑在核酸提取過程中，能夠充分有效地裂解細(xì)胞，使細(xì)胞中的核酸能夠充分釋放，得到濃度更高的核酸，有利于提高核酸的質(zhì)量，保證后續(xù)操作的準(zhǔn)確性。

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