茜素紅S染色液配制方法及染色原理

　　茜素紅S是橙黃色的針狀體。溶于水，微溶于醇，不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素經(jīng)發(fā)煙硫酸磺化，然后轉(zhuǎn)變?yōu)殁c鹽制得。屬一種蒽醌(Anthraquinone)類的衍生物，是茜素磺酸鈉鹽，它能與鈣鹽以鰲和方式形成復(fù)合物，用以識(shí)別組織細(xì)胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過(guò)茜紅素染色，產(chǎn)生橘紅色沉積。

　　原理：茜素紅S(Alizarin Red S)鈣染色法是一種旨在通過(guò)鰲和技術(shù)，使鈣離子和茜素紅S產(chǎn)生復(fù)合物，來(lái)分析固定處理的細(xì)胞樣本中橘紅色鈣沉積現(xiàn)象的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。主要適用于動(dòng)物原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測(cè)。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。

　　用途:絡(luò)合滴定指示劑和酸堿指示劑。茜素紅能和許多金屬離子生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)色物，在分析中常用作金屬指示劑;光度法測(cè)定金屬離子的顯色劑;在分析中常用作金屬指示劑;光度法測(cè)定金屬離子的顯色劑;酸堿指示劑，一變色范圍PH值3.7(黃)～5.2(紫)，第二變色范圍PH值10.1(紫)～12.0(淺黃);用于極譜法測(cè)定金屬離子。

　　配制方法：將托盤天平上稱取0.1g茜素磺酸鈉定溶于100ml蒸餾水中轉(zhuǎn)移入滴瓶中，貼標(biāo)簽備用。 或用茜素紅粉加PBS溶解后，要注意調(diào)節(jié)PH值到7.2過(guò)濾就可以了。0.1%的茜素紅Tris-HCL(PH8.3), Tris的濃度做分子生物學(xué)一樣的，用0.Imol/L的HCI或0 1%的NaOH調(diào)節(jié)。

　　保存：常溫保存，有效期6個(gè)月。

　　注意事項(xiàng)：

　　1.試劑溶液在樣品表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿樣品表面。

　　2.茜素紅S染色時(shí)間根據(jù)鈣鹽的含量來(lái)確定?？稍陲@微鏡下面觀察，見(jiàn)鈣鹽成較深的橘紅色即取出洗滌，如染色液時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可能出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。

　　3.為了您的健康和安全，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

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