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- bnf56 2017-04-24 00:00:00
- 紫外可見分光光度計(jì)定量測定校零后還要測定空白對照的吸光度嗎 紫外-可見分光光度法是在190~800nm波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸光度,用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測定的方法。當(dāng)光穿過被測物質(zhì)溶液時(shí),物質(zhì)對光的吸收程度隨光的波長不同而變化。因此,通過測定物質(zhì)在不同波長處的吸光度,并繪制其吸光度與波長的關(guān)系圖即得被測物質(zhì)的吸收光譜。從吸收光譜中,可以確定Z大吸收波長λmax和Z小吸收波長λmin。物質(zhì)的吸收光譜具有與其結(jié)構(gòu)相關(guān)的特征性。因此,可以通過特定波長范圍內(nèi)樣品的光譜與對照光譜或?qū)φ掌饭庾V的比較,或通過確定Z大吸收波長,或通過測量兩個(gè)特定波長處的吸收比值而鑒別物質(zhì)。用于定量時(shí),在Z大吸收波長處測量一定濃度樣品溶液的吸光度,并與一定濃度的對照溶液的吸光度進(jìn)行比較或采用吸收系數(shù)法求算出樣品溶液的濃度
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方法參考:
本實(shí)驗(yàn)參照標(biāo)準(zhǔn)方法:GB13197-91,GB/T5009.49-2003,GB/T 5750.10-2006。
方法原理:在過量銨鹽存在下,甲醛與乙酰丙酮生成黃色絡(luò)合物,于 415nm 波長處進(jìn)行分光光度測定。
儀器試劑:SP-752PC紫外可見分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司),本實(shí)驗(yàn)所用試劑除另有說明外,均為分析純試劑;所用水為實(shí)驗(yàn)室自制的超純水。硫酸(H2SO4):ρ=1.84g/mL,硫酸溶液:C(1/2 H2SO4)=1mol/L。硫酸溶液:C(1/2H2SO4)=6mol/L。氫氧化鈉液:C(NaOH)=1mol/L。碘溶液:C(1/2I2)≈0.05 mol/L。
先稱取 5g 碘化鉀于小燒杯中,用少量水溶解,再稱取1.5875g 碘粒于碘化鉀溶液中,用玻璃棒攪拌使充分溶解,然后轉(zhuǎn)入250ml 容量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,避光保存。
乙酰丙酮溶液:稱取25g乙酸銨于小燒杯中,加入0.4ml 乙酰丙酮和3ml 乙酸,再加入用少量水溶解后轉(zhuǎn)入100ml 容量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。
重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液:C(1/6K2Cr2O7)=0.0500mol/L。準(zhǔn)確稱取0.2452g 已于110℃干燥2h、并在干燥器中放置冷卻后的優(yōu)級純重鉻酸鉀于100ml 容量瓶中,用適量水溶解后定容至刻度,搖勻。
硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液:C(Na2S2O3·5H2O)≈0.05mol/L。取800ml 純水于1L大燒杯中,煮沸后冷卻至室溫備用。稱取6.25g硫代硫酸鈉于小燒杯中,用適量煮沸并放冷的水溶解后轉(zhuǎn)入500ml 容量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻。加入0.2g氫氧化鈉,避光保存。使用前用重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定,其方法如下:
于250ml碘量瓶內(nèi),加入1g碘化鉀及50ml水,加入200ml重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.2.7),5ml硫酸溶液(3.2.3),混勻,于暗處放置5min。用硫代硫酸鈉溶液滴定,待滴定至溶液呈淡黃色時(shí),加入1ml淀粉指示(3.2.11),繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去,記下用量(V1)。硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定濃度,由式(1)計(jì)算:
式中,
C1——硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度,mol/L;
C2——重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,mol/L;
V1——滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液體積,ml;
V2——取用重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,ml。甲醛標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液的配制與標(biāo)定:吸取36%~38%甲醛溶液0.7ml于250ml 容量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。此標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液每毫升約含1mg甲醛。將配制好的溶液置冰箱4℃中可保存半年。吸取20.0ml甲醛標(biāo)準(zhǔn)貯備液于250ml碘量瓶中,加入50.0ml碘溶液(3.2.5),15ml氫氧化鈉溶液(3.2.4),混勻,放置15min。加入20ml硫酸溶液(3.2.2),混勻,再放置15min。用硫代硫酸鈉溶液(3.2.8)滴定至溶液呈淡黃色,加1ml淀粉指示劑(3.2.11),繼續(xù)滴定至藍(lán)色褪去,記下用量(V)。同時(shí)取20.0ml水代替甲醛貯備液進(jìn)行空白試驗(yàn),記下硫代硫酸鈉溶液用量(V0)。甲醛標(biāo)準(zhǔn)貯備液的濃度,由式(2)計(jì)算:
式中,
C——甲醛標(biāo)準(zhǔn)貯備液的濃度,mol/L;
C1——硫代硫酸鈉溶液濃度,mol/L;
V——滴定甲醛貯備液時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液體積,ml;
V0——空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉溶液體積,ml;
15——甲醛(1/2HCHO)的摩爾質(zhì)量。甲醛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液:取甲醛標(biāo)準(zhǔn)貯備液稀釋成每毫升含有10.0μg 甲醛的使用溶液。使用時(shí)當(dāng)天配制。
淀粉指示劑(5g/L):稱取0.25g可溶性淀粉于50ml容量瓶中,定容至刻度,搖勻,于沸水浴中充分溶解,冷卻后備用。使用時(shí)當(dāng)天配制。
分析步驟
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:取6支25ml具塞比色管,分別加入0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、8.00ml甲醛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(3.2.10),加水至刻度,使甲醛濃度分別為0.0、0.2、0.4、1.2、2.0、3.2μg/ml。分別加入2.0ml乙酰丙酮溶液(3.2.6),搖勻,于沸水浴中加熱10min,冷卻。用10mm的比色皿,以濃度為零的溶液為參比,在415nm 波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo)、甲醛濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
樣品測定:取10.00ml自來水樣(徐匯區(qū)正常供用的自來水)于25ml比色管中,用水稀釋至刻度,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的顯色方法進(jìn)行分光光度測定,同時(shí)以水代替自來水樣做空白試驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)及圖形如下:
自來水樣測試與結(jié)果計(jì)算:
自來水中甲醛含量=
測試濃度×稀釋倍數(shù)=[0.00046-(-0.01566)]×25/10=0.04μg/ml。
若對照方法Z低檢出限0.05μg/ml,則表明該地區(qū)自來水中甲醛濃度低于檢出范圍。(來源:上海光譜儀器有限公司)
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