血腦屏障 (BBB) 是哺乳動(dòng)物的一種特殊結(jié)構(gòu)，通過調(diào)節(jié)血液和血液之間離子、氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流入和流出，將大腦與血液分開，并維持zhongshu神經(jīng)系統(tǒng) (CNS) 的穩(wěn)態(tài)。該屏障主要由腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (BMEC)、星形膠質(zhì)細(xì)胞和周細(xì)胞組成。

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 (TGFβ1) 是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β (TGFβ) 家族成員之一，是一種多效性細(xì)胞因子，在多種病理和生理過程中發(fā)揮重要作用。

Hedgehog信號(hào)通路是重要的信號(hào)傳導(dǎo)通路，在多個(gè)物種中是保守的，并且在生理和病理過程的許多方面發(fā)揮著重要作用。典型Hedgehog信號(hào)由三種分泌配體Shh、Ihh和Dhh激活，細(xì)胞間信號(hào)由轉(zhuǎn)錄因子Gli1、Gli2和Gli3轉(zhuǎn)導(dǎo)。在zhongshu神經(jīng)系統(tǒng)中，Hedgehog信號(hào)通路決定了神經(jīng)管的形成和發(fā)育。

目前，已有研究表明Hedgehog信號(hào)與TGFβ1級(jí)聯(lián)反應(yīng)在癌癥發(fā)展和轉(zhuǎn)移中的相互作用。那么Hedgehog信號(hào)和TGFβ1級(jí)聯(lián)反應(yīng)之間的串?dāng)_是否會(huì)影響血腦屏障的功能呢，目前還尚不清晰。

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和湖北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室聯(lián)合在Brain Sciences雜志上發(fā)表了一篇名為《Astrocyte-Derived TGFβ1 Facilitates Blood–Brain Barrier Function via Non-Canonical Hedgehog Signaling in Brain Microvascular Endothelial Cells》，該文闡明了TGFβ1 介導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和大腦內(nèi)皮細(xì)胞之間的細(xì)胞間交流，這一發(fā)現(xiàn)將拓寬關(guān)于血腦屏障內(nèi)穩(wěn)態(tài)的現(xiàn)有知識(shí)，也可能有助于進(jìn)一步改善血腦屏障功能障礙的治療策略。

作者通過構(gòu)建人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (hBMECs) 與U251的單培養(yǎng)和共培養(yǎng)模型，證實(shí)了星形膠質(zhì)細(xì)胞衍生的TGFβ1增強(qiáng)了BMECs的屏障功能。實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫印跡和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等多種實(shí)驗(yàn)表明TGFβ1在BMECs中觸發(fā)Smad2/3的激活增加了Gli2的表達(dá)，Gli2是Hedgehog信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。Gli2與ZO-1啟動(dòng)子結(jié)合，增強(qiáng)ZO-1的表達(dá)，從而維持血腦屏障。星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的TGFβ1觸發(fā)BMECs中的TGFβ1-TGFBRII-Smad2/3-Gli1/2-ZO-1軸并維持正常的BBB功能。

文中作者通過免疫熒光技術(shù)，利用Echo Revolve正倒置一體顯微鏡進(jìn)行免疫熒光觀察。使用50ng/mL的重組TGFβ1 (rTGFβ1) 來(lái)刺激單層hBMECs，BMECs用綠色CD31標(biāo)記，結(jié)果表明與對(duì)照組相比，ZO-1表達(dá)顯著增加。

用4mg/kg的TGFβ/Smads信號(hào)抑制劑SD208處理小鼠，圖中虛線環(huán)表示BMECs中的Gli1或Gli2的表達(dá)量，結(jié)果表明與對(duì)照組相比，ZO-1、 Gli1和Gli2表達(dá)量均減少。

內(nèi)皮屏障功能方面發(fā)揮重要作用，提高了對(duì)血腦屏障功能的研究。這一發(fā)現(xiàn)也可能表明未來(lái)有可能使用TGFβ1和Hedgehog信號(hào)級(jí)聯(lián)來(lái)輔助治療血腦屏障功能障礙。

參考文獻(xiàn)：

Fu J, Li L, Huo D, et al. Astrocyte-Derived TGFβ1 Facilitates Blood-Brain Barrier Function via Non-Canonical Hedgehog Signaling in Brain Microvascular Endothelial Cells. Brain Sci. 2021;11(1):77. Published 2021 Jan 8. doi:10.3390/brainsci11010077

熒光顯微鏡常與免疫組織化學(xué)和切片技術(shù)相互結(jié)合應(yīng)用于科研、檢驗(yàn)等多個(gè)領(lǐng)域，比如某一些樣品在常規(guī)光學(xué)顯微鏡下（明場(chǎng)下）無(wú)法被有效的觀察，再比如某種病原標(biāo)記物已做了標(biāo)識(shí)，但在顯微鏡下仍然難以辨識(shí)。而熒光標(biāo)識(shí)只在特定波長(zhǎng)的光源激發(fā)下才會(huì)發(fā)光，而且發(fā)出的光也具有特定的波長(zhǎng)。（廣東顯微鏡廠家-廣州市明慧科技顯微鏡）

而激光具有單一的波長(zhǎng)，高準(zhǔn)確性等特點(diǎn)，對(duì)激發(fā)樣品有更好的選擇性，也更容易濾除激發(fā)光對(duì)熒光的干擾，因此一般熒光顯微鏡都選用激光作為激發(fā)光源，可以得到較好的成像質(zhì)量。這就有了顯微鏡熒光模塊的出現(xiàn)，顯微鏡集成熒光模塊的應(yīng)用是多方面的，作為正置顯微鏡、倒置顯微鏡、體視顯微鏡的通用型熒光模塊，標(biāo)配紫外、藍(lán)色、綠色等激發(fā)光組，通過滑塊/拉桿/旋鈕/旋鈕輕松切換激發(fā)光進(jìn)行熒光或明場(chǎng)觀察，廣泛應(yīng)用于呼吸道疾病、生殖道疾病、結(jié)核桿菌、自身免疫性疾病等領(lǐng)域的熒光檢測(cè)。（廣東顯微鏡廠家-廣州市明慧科技顯微鏡）

熒光模塊設(shè)計(jì)升級(jí)顯微鏡熒光功能特點(diǎn)：
LED即開即用，開機(jī)無(wú)須預(yù)熱；使用壽命長(zhǎng)；
大功率LED熒光光源，使用壽命長(zhǎng)，無(wú)需更換燈泡，人工維護(hù)成本低；
通過電源適配器實(shí)時(shí)顯示通道和亮度情況；
多個(gè)高效熒光波段可供選擇，可用于不同領(lǐng)域的熒光檢測(cè)；
雙光路熒光集成模塊化設(shè)計(jì)產(chǎn)品。轉(zhuǎn)盤切換4孔位熒光通道，聯(lián)動(dòng)LED照明激發(fā);
卡口及濾光片均采用大口徑，保證激發(fā)光更均勻，視野更光寬，成像更清晰；
滿足大部分科研要求，支持特殊波段需求定制；
滿足國(guó)內(nèi)外大部分品牌顯微鏡定制，輕松為普通顯微鏡實(shí)現(xiàn)熒光觀察一大功能。
熒光模塊設(shè)計(jì)升級(jí)顯微鏡熒光功能，基于外形精簡(jiǎn)、操作安裝簡(jiǎn)便的設(shè)計(jì)理念，將驅(qū)動(dòng)電源、聚光光路及熒光濾光組整合為一體，有單色熒光、雙色熒光及多色熒光等多種配置方案可選，支持特殊波段需求定制，實(shí)現(xiàn)熒光、明場(chǎng)切換觀察，優(yōu)于汞燈的激發(fā)光強(qiáng)度，為弱熒光樣品觀測(cè)實(shí)現(xiàn)更為清晰、明亮的熒光成像。顯微鏡熒光模塊能夠滿足大部分的熒光科研實(shí)驗(yàn)需求，輕松結(jié)合不同品牌的顯微鏡，無(wú)需改變顯微鏡原有的光學(xué)系統(tǒng)，支持特殊波段需求定制，給普通的顯微鏡“一鍵”升級(jí)熒光。（廣東顯微鏡廠家-廣州市明慧科技顯微鏡）