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- lksjy34 2017-01-06 00:00:00
- 脫氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid，DNA）是一切生物細(xì)胞的重要組成成分，主要存在于細(xì)胞核中，鹽溶法是提取DNA的常規(guī)技術(shù)之一。從細(xì)胞中分離得到的DNA是與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA，其中還含有大量RNA，即核糖核蛋白。如何有效地將這兩種核蛋白分開(kāi)是技術(shù)的關(guān)鍵。DNA不溶于0.14mol/L 的NaCl溶液中，而RNA則能溶于0.14mol/L 的NaCl溶液之中，利用這一性質(zhì)就可以將二者從破碎細(xì)胞漿液中分開(kāi)。制備過(guò)程中，細(xì)胞破碎的同時(shí)就有Dnase釋放到提取液中，使DNA因被降解而影響得率，在提取緩沖液中加入適量的檸檬酸鹽和EDTA，既可YZ酶的活性又可使蛋白質(zhì)變性而與核酸分離，再加入陰離子去垢劑0.15％的SDS，經(jīng)過(guò)2h攪拌，或用氯仿－異醇除去蛋白，通過(guò)離心使蛋白質(zhì)沉淀而除去，得到的是含有核酸的上清液。然后用95％的預(yù)冷乙醇即可把DNA從除去蛋白質(zhì)的提取液中沉淀出來(lái)。
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