ELISA為什么所有孔都完全沒顏色
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ELISA自己包被抗體—封閉—加樣—二抗—HRP—TMB顯色，上述步驟應(yīng)該是對(duì)的，為什么所有孔都完全沒顏色，做了6次了，怎么知道是哪一步出問題了，求大神解答！??！
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- zailaizhuomu 2013-07-16 00:00:00
- 如果你確定是步驟沒有問題的話，不顯色的因素很多，要一一排除。假如是二抗或者顯色液的問題，可以用二抗和顯色液混合看是否顯色，每個(gè)因素逐一排除。我們的ELISA檢測(cè)抗原或者抗體的步驟是這樣的，你可以做個(gè)參考：包被好抗體的板條，加入待測(cè)樣品，孵育后洗滌拍干，加入酶標(biāo)抗原孵育后洗滌拍干，加入顯色液顯色。
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- 我是LHNan 2013-07-15 00:00:00
- 全是陰性？ 你的試驗(yàn)想檢測(cè)什么？檢測(cè)抗原？檢測(cè)抗體？ 你這個(gè)實(shí)驗(yàn)思路問題很大。 你自己先固定抗體，加樣，是不是加抗原？再加二抗，請(qǐng)問，加不加這個(gè)樣，也就是加不加這個(gè)抗原，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果嗎？酶標(biāo)二抗是和抗體結(jié)合的。還有你的二抗和一抗之間中間隔了個(gè)抗原，二抗還能和抗體結(jié)合嗎？
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