參與評論

評論

登錄后參與評論

全部評論(1條)

• 

  qwekkll 2017-08-29 00:00:00

  在做ELISA實驗時，洗板有兩種方法：手工法洗板和洗板機洗板。二者沒有本質(zhì)的差別，只要操作合乎要求，均能得到正確、可靠的結果。手工洗板是每次反應溫育后，將反應液吸出或甩干，然后在板孔中加滿洗液，放置2～3 min后，將洗液吸出或甩干再在吸水紙上拍干。重復上述洗滌步驟3～4次，Z后在吸水紙上拍干即可。手工洗板人為因素比較大，實驗人員必須經(jīng)驗豐富，洗滌次數(shù)要足夠，沖擊力又不要太大，加入的洗液量以剛滿反應孔為限，防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈，同時防止孔與孔之間液體交叉。洗滌結束后扣干亦非常重要，否則易造成假陽性。每次洗完板后，在吸水紙上輕輕拍干，拍板時要垂直，避免交叉感染。用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離;吸水紙要一次性使用，應使用不易脫落碎屑的吸水紙為宜。酶結合物不耐干燥，特別在較高的溫度下更易失活，所以拍干的反應板應盡量縮短在空氣中暴露的時間，時間越長，吸光度值越低。洗板機洗板是將手工操作改由洗板機進行，人為因素少，速度快，條件恒定，但是使用洗板機洗板的一個特點是，每次洗板后不能拍干，故有較多的液體殘留，需增加洗板次數(shù)來減少這種誤差。洗板機洗板次數(shù)越少，假陽性越高，本實驗中，洗板1次，假陽性率高達90%;洗板2次，假陽性率為38%;洗板3次，假陽性率為2%;洗板4～5次，未出現(xiàn)假陽性。洗板次數(shù)并非越多越好，太多不但浪費人力、物力，并且也會導致假陰性結果，所以一般試劑盒要求洗板4～5次即可。洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出。為了洗滌效果較好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1～2次，能達到理想的洗滌效果。

  贊(5)

  回復(0)

  評論

  評論

  登錄后參與評論