国产三级在线看完整版-内射白嫩大屁股在线播放91-欧美精品国产精品综合-国产精品视频网站一区-一二三四在线观看视频韩国-国产不卡国产不卡国产精品不卡-日本岛国一区二区三区四区-成年人免费在线看片网站-熟女少妇一区二区三区四区

儀器網(yiqi.com)歡迎您!

| 注冊2 登錄
網站首頁-資訊-話題-產品-評測-品牌庫-供應商-展會-招標-采購-知識-技術-社區(qū)-資料-方案-產品庫-視頻

技術中心

當前位置:儀器網>技術中心> 應用方案> 正文

儀器應用 | MP-SPR:基于微米厚度水凝膠連續(xù)且無需標記的小分子監(jiān)測技術

來源:北京正通遠恒科技有限公司 更新時間:2025-10-09 15:45:19 閱讀量:100
導讀:表面等離子體共振(SPR)長期以來一直被用于無標記檢測分子表面間的相互作用,然而,面對水凝膠或功能性聚合物薄膜這類柔軟且厚實的材料時,傳統(tǒng)SPR單獨使用無法發(fā)揮作用,而具有波導檢測功能的MP-SPR能夠對適體交聯(lián)水凝膠進行靈敏且實時的表征。





MP-SPR:基于微米厚度水凝膠連續(xù)且無需標記的小分子監(jiān)測技術




表面等離子體共振(SPR)長期以來一直被用于無標記檢測分子間的相互作用,尤其是在表面進行檢測。然而,當應用于諸如水凝膠或功能性聚合物薄膜這類柔軟且厚實的材料時,傳統(tǒng)的SPR單獨使用可能無法充分捕捉材料內部更深處發(fā)生的變化。這就是波導效應在等離子體生物傳感中成為一種強大優(yōu)勢的地方。本應用說明介紹了具有波導檢測功能的MP-SPR如何能夠對一種新型的適體交聯(lián)水凝膠(適體凝膠)進行靈敏且實時的表征,這種適體凝膠是為連續(xù)監(jiān)測抗生素萬古霉素而設計的。(圖1)

圖1:MP-SPR 兼具波導模式和表面等離子體共振模式

圖片

BioNavis MP-SPR 400 KONTIO(左)、410A KAURIS(右)

在多參數(shù)表面等離子體共振(MP-SPR)技術中,如果金屬表面存在一層較厚的介質層(通常厚度大于200納米),那么除了表面等離子體波之外,它還能支持波導模式。這些模式的產生是因為這層厚的介質層具有類似于光學波導的特性,能夠捕獲光線并使MP-SPR信號產生額外的共振特征。通過分析這些共振波谷的數(shù)量和位置,具有內置波導功能的MP-SPR成為了表征多層薄膜或厚涂層厚度及折射率的有力工具,有時可達數(shù)十微米。相比之下,傳統(tǒng)的表面等離子體共振僅限于近表面區(qū)域,通常在金界面附近200至300納米范圍內。在本應用說明中,通過連續(xù)監(jiān)測完整的表面等離子體共振曲線,能夠測量適配體水凝膠層與萬古霉素的相互作用,超出標準的表面等離子體共振檢測范圍。

經過鍍金處理的MP-SPR傳感器上覆蓋了一層薄的水凝膠層,該水凝膠由8股的聚乙二醇-諾伯森單元(10千道爾頓)通過巰基化分裂適體序列以不同構型(單巰基化分裂適體對(MM)、單巰基化和雙巰基化分裂適體對(MD)、雙巰基化分裂適體對(DD)以及雙巰基化完整母適體序列(Full))交聯(lián)而成。在紫外線誘導的巰基-烯鍵偶聯(lián)作用下,該水凝膠與巰基功能化的金表面發(fā)生共價結合,從而形成一個穩(wěn)定且響應靈敏的基質。分裂適體經過精心設計,能夠識別萬古霉素,并同時充當動態(tài)交聯(lián)劑。實驗在生理溫度(37°C)下進行,采用連續(xù)流動(50 μL/min)的方式在含有2毫摩爾氯化鎂的 PBS(pH = 7.4)溶液中進行,使用配備有670納米和785納米激光波長的四通道MP-SPR 400 KONTIO系統(tǒng)。通過將波導模式反射率光譜(使用670納米激光波長)與菲涅爾模型進行擬合,提取了水凝膠的參數(shù)——厚度(d)和折射率(n)。這些參數(shù)估計為2.41微米和1.3510(圖2)。


圖2用于從波導模式中提取水凝膠的折射率和光學厚度的實驗數(shù)據(jù)擬合的代表性示例,該示例是從全反射率(使用670納米激光波長記錄)光譜中得出的,其結果以藍色框進行突出顯示。


當萬古霉素被引入微流控腔中時,便觀察到了清晰的光學反應。這種水凝膠的厚度有所減?。é),這是由于分析物引起的收縮所致,同時其折射率也有所增加(Δn),這反映了局部的致密化和分子結合事件(圖2和圖3)。這些結構變化是通過表面等離子共振(SPR)和波導模式同時檢測到的。特別是波導模式顯示出更高的靈敏度。這主要是由于其狹窄的共振寬度,即反射率下降的半峰全寬(FWHM)。更窄的FWHM會導致更清晰、更明顯的信號,從而在實時檢測過程中實現(xiàn)更高的角度分辨率和更低的基線噪聲。這最終提高了檢測限(LOD)。

圖3通過計算厚度的相對變化(Δd%)和折射率的相對變化(Δn),以評估1毫摩爾萬古霉素在不同交聯(lián)構型下的結合效果所產生的影響。

事實上,對比分析圖4表明,當通過最小的表面等離子體共振入射角偏移(Δθmin)進行追蹤時,適配體膠實現(xiàn)了0.25微摩爾的檢測限;而在特定角度下監(jiān)測的波導模式反射率變化(ΔR)則實現(xiàn)了更高的檢測限,為0.16微摩爾。作為參考,缺乏水凝膠體積和波導放大作用的適配體單層傳感器的檢測限則高達1.36微摩爾。

除了在緩沖液中的表現(xiàn)外,該適配體還經過了與生理環(huán)境相關的介質中的測試(此處未展示相關數(shù)據(jù))。在200倍稀釋的大鼠血漿(模擬間質液)中,該傳感器的檢測限保持在0.32微摩爾。在未稀釋的馬血清和5倍稀釋的人血漿中,分別實現(xiàn)了0.27微摩爾和0.68微摩爾的檢測限。這些數(shù)值是基于Δθmin監(jiān)測得出的。

將光波導模式分析整合到MP-SPR框架中,為軟物質生物傳感帶來了強大的新功能。在本研究中,波導模式具有更高的分辨率、更低的檢測限以及厚度和折射率參數(shù)的評估能力,而僅依靠傳統(tǒng)的SPR峰最小角度監(jiān)測則無法達到如此準確的程度。

圖4在不同萬古霉素濃度下記錄的aptagel的全角度反射率(R)譜圖,展示了兩種分析模式:(1)波導反射率變化(ΔR);(2)使用670納米激光波長記錄的SPR角度變化(Δθmin,見圖注)。

圖片


【END】



電話:010-64415767 | 010-64448295

郵箱:info@honoprof.com

地址:北京市朝陽區(qū)勝古中路2號院6號樓企發(fā)大廈C座210室





圖片



參與評論

全部評論(0條)

相關產品推薦(★較多用戶關注☆)
你可能還想看
  • 技術
  • 資訊
  • 百科
  • 應用
  • 分子雜交技術應用
    DNA 片段與RNA片段之間或者DNA片段之間不一樣,若兩者之間的核苷酸排列順序互補也能夠復性,使新的雙螺旋結構形成,這種根據(jù)互補堿基配對,結合不完全互補的兩條多核苷酸的過程,叫做分子雜交。
    2025-10-191328閱讀
  • “3微米”還是“5微米”?組織切片厚度的標準之爭與選擇科學
    組織切片厚度是樣本信息完整性與成像分辨率的核心平衡參數(shù):過薄(<2μm)易丟失細胞層連續(xù)性,過厚(>8μm)則導致細胞重疊、染色滲透不均。3μm和5μm作為臨床病理與科研領域的主流規(guī)格,其差異源于不同場景對“微觀結構精準度”與“宏觀微環(huán)境覆蓋”的需求分化——臨床診斷側重單個細胞形態(tài)識別,3μm更適配
    2026-04-1028閱讀 組織切片機
  • 紫外分析儀RAPD分子生藥學中的應用和技術差別
    紫外分析儀有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列,不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長引進電泳分析、檢測,PCR產物檢測,DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。
    2025-10-181280閱讀
  • 連續(xù)流動分析技術介紹
    一種以丹麥技術大學的J.Ruzicka和EH.Hansen提出的流動注射的概念為原理所設計出來的分析儀器,稱為流動注射分析儀。
    2025-10-211462閱讀 流動注射分析儀
  • 凝膠色譜儀的應用,凝膠色譜儀器
    隨著技術的不斷進步,凝膠色譜儀的性能將進一步提高。未來的發(fā)展方向包括提高分離效率、縮短分析時間以及擴展應用范圍。結合自動化和信息技術,凝膠色譜儀將實現(xiàn)更高水平的智能化,使得樣品分析更加高效、準確。
    2025-10-21136閱讀 凝膠色譜儀
  • 查看更多
版權與免責聲明

①本文由儀器網入駐的作者或注冊的會員撰寫并發(fā)布,觀點僅代表作者本人,不代表儀器網立場。若內容侵犯到您的合法權益,請及時告訴,我們立即通知作者,并馬上刪除。

②凡本網注明"來源:儀器網"的所有作品,版權均屬于儀器網,轉載時須經本網同意,并請注明儀器網(m.sdczts.cn)。

③本網轉載并注明來源的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點或證實其內容的真實性,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品來源,并自負版權等法律責任。

④若本站內容侵犯到您的合法權益,請及時告訴,我們馬上修改或刪除。郵箱:hezou_yiqi

熱點文章
超聲波密度計在鉀肥行業(yè)母液蒸發(fā)與回收環(huán)節(jié)的具體應用
電表遠距高采低補失效?易控寶空載直補一招搞定
EAD Talk:SCIEX ZenoTOF全新EAciD技術高效解碼人血清N-糖蛋白組
光度絡合滴定(一)
宏微睿儀核酸提取儀選購和使用中的30個常見問題
【瀝青試驗系列】第十四章:——瀝青混合料性能評價(第二篇)
GB 23200.122-2026草甘膦檢測實操答疑專場:制標人耿岳博士在線親授解決方案
精準監(jiān)測氨逃逸,四方儀器護航企業(yè)綠色達標排放
在銅礦濃密機底流場景安裝超聲波密度計的具體應用
詢價有禮 | 奧豪斯電化學產品解決方案
近期話題
相關產品

在線留言

上傳文檔或圖片,大小不超過10M
換一張?
取消