紫外分析儀分為很多系列,有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列,不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長引進(jìn)電泳分析、檢測(cè),PCR產(chǎn)物檢測(cè),DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。
分子生藥學(xué)中的應(yīng)用
1、生物類生藥系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系上的樹狀圖,特別是種內(nèi)水平能夠通過RAPD標(biāo)記來制作。此對(duì)于生藥親緣進(jìn)化關(guān)系來說,開辟了尋找新的yao用資源的方法。
2、基因圖譜能夠通過RAPD標(biāo)記來構(gòu)建,進(jìn)行基因定位,和擴(kuò)增與測(cè)序未知序列的DNA片段。
3、構(gòu)建遺傳連鎖圖譜也可以使用RAPD標(biāo)記,對(duì)yao用植物育種進(jìn)行指導(dǎo),使品種間雜化和自交得以避免,將優(yōu)良性狀的品種選育出來。
4、物種的親緣關(guān)系和進(jìn)化趨勢(shì)的探討以及物種的遺傳多樣性的檢測(cè)可以采用RAPD方法。所以yao用植物資源保護(hù)和種質(zhì)資源保存是以RAPD方法為依據(jù)的,尤其在研究瀕危物種方面的意義更加的重大。
5、隨著不斷深入地研究植物藥,人們?cè)絹碓街匾暺鹆丝沙掷m(xù)開發(fā)利用yao用植物資源的問題。yao用植物生物多樣性應(yīng)用RAPD技術(shù)來進(jìn)行研究,能夠在遺傳多樣性水平上對(duì)天然產(chǎn)物多樣性與物種、生態(tài)及地理分布的關(guān)系進(jìn)行了解,對(duì)潛在的藥物資源進(jìn)行挖掘,尋找到新藥開發(fā)的方法。
6、生藥的分類可以使用RAPD標(biāo)記,對(duì)生物不同種、亞種、變種甚至株在DNA分子水平上進(jìn)行鑒別。
技術(shù)差別
PCR技術(shù)是RAPD技術(shù)的起源,然而RAPD技術(shù)又和PCR技術(shù)有所不同。隨機(jī)擴(kuò)增引物是它們所體現(xiàn)的主要差別。
基因組的檢測(cè)是通過一系列隨機(jī)引物利用RAPD 技術(shù)進(jìn)行的,所以多個(gè)基因位點(diǎn)會(huì)被檢測(cè)出來,有著比較大的覆蓋率,并且越多的引物就會(huì)有越廣的覆蓋面,也會(huì)隨之增加遺傳信息。RAPD 多態(tài)信息含量(PIC) 值在0. 2 - 0. 9 之間,有著比較大的波動(dòng)。
首先隨機(jī)擴(kuò)增引物不是成對(duì)(正、反向引物)加入,而是單個(gè)加入。然后 隨機(jī)引物不長,10個(gè)堿基通常是RAPD技術(shù)采用的引物的長度,因?yàn)殡S機(jī)引物不長,所以相較于常規(guī)PCR,RAPD有著相對(duì)比較低的退火溫度,35-45攝氏度為反應(yīng)通常的退火溫度的范圍。
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