圖1. 細胞凋亡進程圖^[1]

細胞凋亡的誘導(dǎo)途徑主要包括外源性（Extrinsic）和內(nèi)源性（Intrinsic）兩種。

外源性途徑（死亡受體途徑）由細胞外部信號誘導(dǎo)，通過死亡受體介導(dǎo)。關(guān)鍵分子包括Fas受體和腫瘤壞死因子受體（TNFR）。當配體（如FasL或TNF-α）與死亡受體結(jié)合時，形成死亡誘導(dǎo)信號復(fù)合物（DISC），DISC激活Caspase-8，隨后激活下游效應(yīng)Caspase（如Caspase-3），引發(fā)細胞凋亡。

內(nèi)源性途徑（線粒體途徑）由細胞內(nèi)部信號（如DNA損傷、氧化應(yīng)激）誘導(dǎo)，主要通過線粒體介導(dǎo)。關(guān)鍵分子包括Bcl-2家族蛋白質(zhì)（如Bax、Bak）。促凋亡信號導(dǎo)致Bax/Bak在線粒體膜上聚集，形成孔道，釋放細胞色素c。細胞色素c與Apaf-1和Caspase-9形成凋亡小體，激活Caspase-9，并進一步激活下游效應(yīng)Caspase（效應(yīng)型半胱天冬酶），執(zhí)行細胞凋亡。

圖2. 內(nèi)源性途徑和外源性途徑細胞凋亡^[2]

但無論外源或是內(nèi)源性途徑細胞凋亡，二者均通過激活效應(yīng)Caspase啟動細胞凋亡過程，效應(yīng)Caspase是參與細胞凋亡過程的關(guān)鍵酶類，主要包括Caspase 3/7，因此，檢測Caspase 3/7的活性對確認細胞是否發(fā)生凋亡、藥物篩選和疾病研究非常重要。

常用檢測方法根據(jù)實驗樣本的不同，可以分為均質(zhì)法、FLICA（Fluorochrome-Labeled Inhibitors of Caspases）、熒光底物法、基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET，F(xiàn)luorescence Resonance Energy Transfer）的檢測方法以及抗體檢測法，這些方法幫助研究細胞凋亡的機制和過程。

關(guān)于caspase的更多信息可以進入“凋亡使者-Caspase在凋亡分析中的應(yīng)用”COT課程了解：

圖3. CellEvent Caspase3/7檢測原理及Workflow

圖5. 不同濃度（0 μM 左，0.11 μM 右）

星形孢菌素誘導(dǎo)細胞凋亡流式圖

參考資料與文獻：

1. Invitrogen 細胞功能分析產(chǎn)品選擇指南

2. Yuan, J., & Ofengeim, D. (2024). A guide to cell death pathways. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 25(5), 379-395.

3. “凋亡使者-Caspase在凋亡分析中的應(yīng)用” 賽默飛COT課程