小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)說明書

　　BS-2331小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法檢測小鼠樣本中的GR濃度。預(yù)包被抗GR抗體的微孔板與樣本中GR結(jié)合后，依次加入生物素標(biāo)記的二抗和HRP標(biāo)記的親和素，通過TMB底物顯色反應(yīng)，450nm波長下測定吸光度值，標(biāo)準(zhǔn)曲線定量計(jì)算GR濃度。

　　二、試劑盒組成

　　組分規(guī)格保存條件

　　預(yù)包被微孔板96孔/48孔2-8℃密封

　　GR標(biāo)準(zhǔn)品6管(0-250pg/mL)-20℃分裝

　　生物素標(biāo)記抗體1瓶-20℃避光

　　HRP-親和素1瓶-20℃避光

　　TMB顯色液A/B各1瓶2-8℃避光

　　三、操作流程

　　樣本預(yù)處理

　　血清/血漿：4℃靜置30min后3000×g離心10min，取上清

　　組織勻漿：按1:9比例加入裂解液，冰上勻漿后離心取上清

　　檢測步驟

　　加樣：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各50μL/孔，設(shè)復(fù)孔

　　孵育：37℃ 90min后洗滌5次

　　顯色：TMB避光反應(yīng)15min，2M H?SO?終止

　　數(shù)據(jù)計(jì)算

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合要求R2≥0.99

　　樣本OD值需落在標(biāo)準(zhǔn)曲線20%-80%范圍內(nèi)

　　四、關(guān)鍵注意事項(xiàng)

　　樣本質(zhì)量：避免溶血樣本，反復(fù)凍融不超過3次

　　試劑平衡：使用前需室溫平衡30min

　　洗滌控制：每次洗滌后拍干，殘留液體影響精度

　　異常處理：若標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差，檢查稀釋液配制或更換新批次試劑

　　五、性能參數(shù)

　　靈敏度：<10 pg/mL

　　檢測范圍：10-250 pg/mL

　　批內(nèi)變異系數(shù)：≤10%

　　回收率：85%-115%

　　注意：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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