一、樣品前處理

1、 所用試劑

1.1  Loading Buffer：鈉鹽系統(tǒng)，pH 2.2

1.2 濃鹽酸，濃度≥36%,優(yōu)級純

1.3 6mol/L 鹽酸：取500mL 鹽酸加水稀釋至1000mL,混勻

1.4 水：去離子水

1.5 17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品

2、前處理設(shè)備

1）分析天平:精度為 0.0001g

2）移液槍及槍頭

3）一次性注射器及0.22um濾膜

4）低范圍pH試紙

5）真空干燥烘箱

6）無油真空泵

7）電熱平板及稱量瓶

3、樣品制備（參考GB 5009.124-2016食品中氨基酸的測定）

移液槍準(zhǔn)確移取試樣1mL，加入水解管中，加入10mL 6mol/L鹽酸(1.3)，冷凍3min?5min,接到真空泵的抽氣管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮?dú)?重復(fù)抽真空-充入氮?dú)獠襟E3次后,在充氮?dú)鉅顟B(tài)下擰緊螺蓋。 將水解管放入真空干燥箱中，110°C水解22-24h，冷卻、混勻、開管、轉(zhuǎn)移并定容到50ml容量瓶中，用移液槍取適量水解液于稱量瓶中，在電熱平板上60℃濃縮至干，必要時加入少許水(1.4)，重復(fù)蒸干1-2次，加入適量PH2.2的稀釋上機(jī)用檸檬酸鈉緩沖液溶解(1.1),振蕩混勻后,吸取溶液通過0.22 μm 濾膜后,轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶,為樣品測定液,供儀器測定用。

二、分析方法描述（Biochrom 30+）

氨基酸分析儀分析方法參數(shù)：

1）色譜柱：Biochrom Na型陽離子交換樹脂柱，4.6x20cm

2）分離程序：

運(yùn)行時間：經(jīng)分析時間+再生時間 60.15min

3）反應(yīng)單元溫度：135°C

4）檢測波長：570nm、440nm同時檢測

三、樣品中氨基酸含量的計算

樣品測定液氨基酸的含量按式（1）計算:

Ci = Cs/As × Ai× F ………………（1）式中:

Ci ——樣品測定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Cs ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Ai ——試樣測定液氨基酸i的峰面積;

As ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積;

F ——樣品稀釋倍數(shù)。

附：茶葉中的酸水解氨基酸種類及其分析圖譜、做樣結(jié)果：

圖1.  樣品01

圖2.  樣品02

圖3.  樣品03

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