關(guān)于全氟化合物
全氟和多氟化合物（PFASs）是一類新興的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，常被用于表面活性劑、洗滌劑、防火泡沫、皮革制品和食品包裝的制造等。由于PFASs中的C-F鍵具有較強的穩(wěn)定性，PFASs表現(xiàn)出極強的持久性，并具有生物蓄積性和毒性。目前在土壤、水、大氣、灰塵以及食品等介質(zhì)中均可檢測出PFASs。PFASs可以通過飲水、食物、空氣等多種途徑進入人體。毒理學(xué)研究顯示 PFASs 具有發(fā)育毒性和生殖毒性，可造成肝損傷和慢性腎臟疾病。人體生物監(jiān)測被認(rèn)為是最理想的監(jiān)測和評估手段。血清中PFASs 的濃度水平可以直接反映人體暴露后吸收的水平，因此血清被廣泛用作評價PFASs的生物監(jiān)測基質(zhì)。
然而血清基質(zhì)復(fù)雜，且現(xiàn)有的檢測方法大多采用液液萃取方法，血清樣本及試劑消耗量大，且前處理步驟繁瑣。因此，建立血液中多種PFASs的高效、快速、準(zhǔn)確定量檢測方法尤其重要。
創(chuàng)新產(chǎn)品：HMR超效分體96孔板
聚焦生物樣品前處理技術(shù)，創(chuàng)新推出Anavo HMR超效分體96孔板，助力測定血清中17種全氟與多氟烷基化合物；相比傳統(tǒng)的液液萃取前處理過程，優(yōu)勢如下:
01
更少前處理步驟&時間
Anavo HMR超效分體96孔板，采用新型無機固相萃取材料，可選擇性去除復(fù)雜基質(zhì)中脂質(zhì)，無需反復(fù)液液萃取提取、超聲、離心等步驟，血樣可直接上樣凈化。僅需一步，即可同時在管內(nèi)完成蛋白沉淀和樣品凈化。
下面以處理96個樣為例，與傳統(tǒng)方法進行對比。
從以上對比可以看出，傳統(tǒng)方法需要反復(fù)超聲提取，多次離心取上清液等繁瑣步驟，才能完成樣品凈化，大約需要150min完成前處理。
而HMR超效分體96孔板，一步凈化法，可同時在管內(nèi)完成蛋白沉淀和樣品凈化，極大簡化前處理步驟，耗時僅需50 min，凈化時間比傳統(tǒng)方法縮短了3倍，極大簡化前處理步驟，而且大大節(jié)省了寶貴的前處理時間。
02
更優(yōu)的凈化效果
HMR無機固相萃取填料特異性吸附磷脂基團，可消除磷脂帶來的基質(zhì)效應(yīng)問題。
更干凈的凈化效果，此外，HMR-Lipid特異性吸附磷脂基團，可消除磷脂帶來的基質(zhì)效應(yīng)問題。
03
更少的上樣量
凈化小柱采用階梯式設(shè)計+30 μm小粒徑填料，同樣質(zhì)量的填料，更高的柱床和理論塔板數(shù)，更優(yōu)凈化效果。同時，更少上樣量，特別適用于血清等特別珍貴的生物樣本的前處理。
傳統(tǒng)方法需上樣200 μL以上，HMR超效分體96孔板僅需50 μL，大大節(jié)省了寶貴的樣品。
04
更少的試劑用量
更少的試劑使用量。相比于傳統(tǒng)方法，試劑使用量更小，更加環(huán)保。
血清中17種全氟及多氟烷基化合物測定
1、樣品前處理
(1) 準(zhǔn)確吸取50 μL血清至HMR超效分體96孔板（貨號：AN25M006）中，加入同位素內(nèi)標(biāo)工作溶液，沿萃取柱內(nèi)壁緩慢加入200 μL乙腈，通風(fēng)柜內(nèi)放置5 min，待溶液通過篩板進入填料中。
(2) 將HMR超效分體96孔板轉(zhuǎn)移至正壓裝置上，逐步施加壓力，將小柱中的液體完全緩慢排出，液體收集至96孔板中。加入200 μL乙腈，重復(fù)提取操作一次。收集兩次流出液，40 ℃氮氣吹至近干，加入50 μL甲醇-水（1:1，v/v）復(fù)溶，放置于96孔板渦旋混勻儀混勻1 min，直接上機檢測
前處理注意事項
1、內(nèi)標(biāo)體積太?。?0、20微升），稍微有損失，就會影響定量，所以建議先加樣品、再加內(nèi)標(biāo)，最后加乙腈；
2、加液體過程中，一定注意盡量讓移液槍的槍頭接近凈化管中最上層篩板加液。需要正確使用移液槍，特別是小體積加樣時；
3、建議分兩次加入乙腈。如果只加一次乙腈，可能洗脫不完全，凈化管里有殘留。壓完一次，加入乙腈，再正壓；
4、乙腈：血清的比例從3：1開始優(yōu)化；
5、其他項目根據(jù)化合物的性質(zhì)選擇甲醇或乙腈作為提取溶劑。
2、色譜條件
色譜柱：Leosil C18/PFP核殼柱 (2.7μm, 100* 2.1mm）貨號：AN80A001；
流動相：5mmol/L乙酸銨甲醇（A），5mmol/L乙酸銨水溶液（B）
流速：0.4mL/min
柱溫：40 ℃
進樣量：5μL
梯度洗脫程序
3、質(zhì)譜條件
AB 6500+質(zhì)譜檢測器采用多反應(yīng)檢測模式（Multiple Reaction Monitoring，MRM），ESI負(fù)離子模式。
離子源：電噴霧離子源；
掃描方式：負(fù)離子掃描；
檢測方式：多反應(yīng)離子監(jiān)測（MRM）；
電噴霧電壓：-4500V；
離子源溫度：400℃；
輔助氣1：60psi；
輔助氣2：60psi；
氣簾氣：30psi；
碰撞氣體：Medium。
4、目標(biāo)PFASs的離子對、錐孔電壓、碰撞能量等參數(shù)見下表
5、加標(biāo)回收率和精密度(n=6)
6、譜圖
17種PFASs的總離子流圖（質(zhì)量濃度10μg/L）
7、結(jié)論
本研究建立了人體血清中17種全氟及多氟烷基化合物的高通量固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。相比以往液液萃取的提取方法，該方法可以在固相萃取柱中同時實現(xiàn)提取和凈化，并且可以與96孔板適配，更加高效便捷，方法準(zhǔn)確度高，血清樣本用量少，適合開展血清中全氟及多氟烷基化合物大批量檢測工作。
方法配套關(guān)鍵耗材
方法配套儀器
關(guān)于Anavo HMR超效分體96孔板
關(guān)于納鷗科
北京有限公司（簡稱：），集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體，致力于不斷研發(fā)出更好、更先進的產(chǎn)品，解決客戶在檢測中遇到的困難，竭力幫助檢測工作者優(yōu)化檢測效果、提高檢測效率。
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