人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

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　　BS-0376人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體夾心法或固相夾心法ELISA技術(shù)。通過包被抗體捕獲樣本中的Casp-3，再與酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后，顏色深淺與Casp-3濃度成正比。

　　二、試劑盒組成

　　主要組分?：

　　預(yù)包被微孔板(48孔/96孔配置)

　　標(biāo)準(zhǔn)品(濃度通常為2700ng/L)

　　酶標(biāo)試劑(HRP標(biāo)記抗體)

　　顯色液(底物A/B)

　　終止液(酸性溶液)

　　濃縮洗滌液(20×或30×)

　　輔助材料需自備?：

　　蒸餾水、移液器(5-1000μL范圍)

　　酶標(biāo)儀(450nm)、離心機(jī)、37℃恒溫箱

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：避免溶血，離心取上清(2000-3000轉(zhuǎn)/分，10-20分鐘)

　　組織勻漿?：加入生理鹽水勻漿后離心

　　保存?：短期存于4℃，長期需分裝凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融

　　四、操作步驟

　　試劑準(zhǔn)備?：

　　恢復(fù)所有組分至室溫(約20分鐘)

　　稀釋洗滌液(如20×稀釋為1×工作液)

　　加樣與溫育?：

　　依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本(建議10μL)至對應(yīng)孔

　　加入生物素化抗體，37℃溫育30-60分鐘

　　洗滌5次(手工或洗板機(jī))

　　顯色與終止?：

　　加入TMB底物，避光反應(yīng)15分鐘

　　加終止液后立即測定OD450nm值

　　五、注意事項(xiàng)

　　安全操作?：

　　避免接觸終止液和顯色劑，若接觸需立即沖洗

　　禁止用嘴吸取試劑

　　實(shí)驗(yàn)控制?：

　　不同批號試劑不可混用

　　嚴(yán)格控制溫育時(shí)間和溫度

　　避免孔間交叉污染(使用一次性吸頭)

　　數(shù)據(jù)計(jì)算?：

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度繪制曲線，計(jì)算樣本濃度

　　六、保存與有效期

　　未開封試劑盒：2-8℃保存，有效期通常為6個(gè)月

　　開封后：板條需密封防潮，試劑按標(biāo)簽要求存放

　　注：以上資料僅供參考，如需具體品牌試劑盒的完整說明，可咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商的詳細(xì)文檔。

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