化合物與代謝物的定量分析是藥物研發(fā)、生物發(fā)酵、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)化學(xué)分析方法通常依賴復(fù)雜的前處理步驟和破壞性檢測(cè),耗時(shí)耗力且難以實(shí)現(xiàn)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。如何快速、無損地獲取目標(biāo)物質(zhì)的濃度信息,成為分析科學(xué)中的一大挑戰(zhàn)。
P300共聚焦拉曼光譜儀,憑借其高靈敏度為化合物/代謝物的定量檢測(cè)提供了高效解決方案。
01
應(yīng)用優(yōu)勢(shì)
01
高靈敏定量
02
智能數(shù)據(jù)分析
搭載HOOKE IntP智能分析軟件,一鍵峰強(qiáng)計(jì)算
03
適用性廣泛
支持各種大分子與小分子物質(zhì)檢測(cè),方法兼容性強(qiáng)
02
應(yīng)用案例
化合物梯度稀釋定量分析
1. 樣品信息
選取棕櫚酸與對(duì)氰基苯甲醛作為目標(biāo)化合物,通過DMSO溶劑進(jìn)行2倍梯度稀釋,連續(xù)稀釋8個(gè)濃度梯度(1 M~7.8125 mM)。
2. 實(shí)驗(yàn)流程
圖1 化合物梯度稀釋與檢測(cè)流程示意圖
3. 結(jié)果
P300采集的不同濃度棕櫚酸和氰基苯甲醛的拉曼光譜如圖2 A,C所示,圖中不同顏色代表不同濃度梯度的化合物溶液,每個(gè)化合物8個(gè)濃度梯度。從圖中可以看出,棕櫚酸在2850 cm-1峰位處因濃度變化有所差異,而氰基苯甲醛在2230 cm-1峰位處的峰強(qiáng)也受到濃度影響(圖2)。
圖2 不同濃度化合物拉曼光譜
因此,取棕櫚酸2850 cm-1處的峰強(qiáng)和氰基苯甲醛2230 cm-1峰位處的峰強(qiáng)分別與化合物溶液濃度建立線性回歸模型(圖2 B,D),并計(jì)算兩種溶液的檢測(cè)限[1],結(jié)果顯示,兩化合物的濃度與特征峰強(qiáng)度呈強(qiáng)相關(guān)性(R2>0.99),檢測(cè)限分別達(dá)26.32 mM與5.55 mM。
03
小結(jié)
本案例中,P300共聚焦拉曼光譜儀通過其高靈敏度光譜采集與智能數(shù)據(jù)分析,成功實(shí)現(xiàn)了化合物濃度的準(zhǔn)確定量。該方法無需復(fù)雜前處理,支持動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)與多物質(zhì)分析,為藥物開發(fā)、生物發(fā)酵優(yōu)化及環(huán)境污染物檢測(cè)提供了高效工具。
參考文獻(xiàn):
[1] Huang, Y.-H.; Wei, H.; Santiago, P. J.; Thrift, W. J.; Ragan, R.; Jiang, S. Sensing Antibiotics in Wastewater Using Surface-Enhanced Raman Scattering. Environ. Sci. Technol. 2023, 57 (12), 4880–4891.
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