Sephadex LH-20產(chǎn)品目前僅以散裝填料形式售賣，沒有預(yù)裝柱產(chǎn)品。散裝填料以干粉形式包裝，在使用前需要完成的第一步就是填料的溶脹。

在室溫下，用過量的實(shí)驗(yàn)所用溶劑將干粉填料溶脹至少3個(gè)小時(shí)，一般采用過量溶劑過夜溶脹。需要注意的是，在整個(gè)溶脹過程中避免過度劇烈的攪拌，比如切勿使用磁力攪拌器，可以選用輕柔溫和的攪拌方式。 

一定要用實(shí)驗(yàn)時(shí)所用的流動(dòng)相去溶脹填料和裝柱，由于不同試劑之間的溶脹系數(shù)差異較大（圖3），溶脹時(shí)和實(shí)驗(yàn)時(shí)采用的流動(dòng)相不同會(huì)導(dǎo)致填料柱床的高度發(fā)生顯著的變化。針對(duì)不同樣品，根據(jù)已有的文獻(xiàn)報(bào)道或者使用經(jīng)驗(yàn)來(lái)選擇合適的流動(dòng)相。

舉例說明：如果后續(xù)實(shí)驗(yàn)過程中所使用的流動(dòng)相是100%純甲醇，那么就使用100%純甲醇對(duì)干粉填料進(jìn)行溶脹，甲醇的溶脹系數(shù)是3.9-4.1 mL/g干粉，取中位數(shù)4.0進(jìn)行計(jì)算，如果取25 g Sephadex LH-20干粉，溶脹時(shí)間是室溫條件下至少3個(gè)小時(shí)，溶脹后的填料體積大約是100 mL。

為了保證較高的分辨率，建議樣品的上樣量是整個(gè)柱子柱體積的1%-2%，柱體積100 mL也就意味著單次上樣體積約1-2 mL。樣品和所有緩沖液都需要經(jīng)過離心或者0.45 μm的膜過濾以去除不溶物。

產(chǎn)品說明書中推薦搭配Sephadex LH-20使用的是耐受有機(jī)溶劑的SR (Solvent Resistant) 空柱，但SR空柱產(chǎn)品目前已經(jīng)全部停產(chǎn)。

作為替代產(chǎn)品，優(yōu)先推薦使用Tricorn空柱，Tricorn 5 mm直徑的柱子柱管最高20 cm，可以裝填4 mL填料；Tricorn 10 mm 直徑的柱子柱管最高60 cm，可以裝填47 mL填料。需要注意的是，最好更換Tricorn空柱的密封圈以獲得更強(qiáng)的化學(xué)耐受性，例如Solvent-resistant O-rings (PFR, perfluoro-rubber)（貨號(hào)18115303用于Tricorn 5 mm空柱，貨號(hào)18115312用于Tricorn 10 mm空柱），可以耐受100%純甲醇。

建議在選擇合適大小的空柱前，根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需要使用的具體化學(xué)試劑，確認(rèn)空柱及其零部件是否耐受。

填料使用完畢后，建議用2-3倍柱體積的洗脫液進(jìn)行沖洗再生，如果后續(xù)實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相發(fā)生變化，需要用新的流動(dòng)相重新進(jìn)行平衡。

Sephadex LH-20干粉填料可以在4-30攝氏度的條件下保存，裝填好的柱子和已溶脹后的填料建議在4-8攝氏度冰箱保存，選用抑菌劑或20%乙醇作為保存液即可。

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