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大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒實驗使用說明書主要包括實驗原理、試劑盒內(nèi)容、樣本處理、實驗步驟及注意事項等部分?。
BS-8545 大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒 試劑盒廠家:天津本生
實驗原理
大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。已知SDH濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將SDH和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中SDH的濃度呈比例關(guān)系?。
試劑盒內(nèi)容
試劑盒通常包含以下組件(以96孔配置為例):
96孔板(預(yù)包被)1塊
96孔板覆膜若干
標準品及標準品稀釋緩沖液
生物素標記的抗SDH抗體
親和鏈酶素-HRP
洗滌緩沖液
底物A、B
終止液
使用說明書1份?12樣本處理
血清或血漿樣本應(yīng)避免溶血、高血脂,懸浮物應(yīng)離心去除。
樣本應(yīng)盡早檢測,2-8℃保存不超過48小時;長時間保存需冷凍(-20℃或-80℃),避免反復(fù)凍融?3。
實驗步驟
?洗滌液配置?:用蒸餾水按一定比例稀釋濃縮洗滌液?。
?標準品配制?:按說明書要求對標準品進行稀釋,制備不同濃度的標準品溶液?。
?加樣?:將標準品和樣本加入微孔中,加入生物素化抗體工作液,溫育并洗滌。
?加酶?:加入親和素標記的HRP,再次溫育并洗滌。
?顯色?:加入底物A、B,避光反應(yīng),產(chǎn)生顏色。
?終止?:加入終止液,終止反應(yīng)。
?讀數(shù)?:用酶標儀在指定波長下測定吸光度,計算樣品濃度?。
注意事項
實驗過程中需嚴格控制溫育時間和溫度。
洗滌步驟要徹底,以去除未結(jié)合的試劑。
底物顯色反應(yīng)需在避光條件下進行。
樣本稀釋倍數(shù)需根據(jù)實際情況確定,必要時進行預(yù)實驗?。
以上信息僅供參考,具體實驗步驟和注意事項應(yīng)以試劑盒附帶的使用說明書為準。
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