癌癥診療中,精準(zhǔn)識別腫瘤邊界是關(guān)鍵。然而,傳統(tǒng)影像學(xué)(CT、MRI)依賴解剖形態(tài)[1],HE染色雖是病理金標(biāo)準(zhǔn),卻因化學(xué)試劑依賴、樣本處理復(fù)雜、耗時長等問題。如今,拉曼光譜技術(shù)正以"無標(biāo)記、無損、分子級精準(zhǔn)"的優(yōu)勢,重塑腫瘤病理檢測格局。P300共聚焦拉曼光譜儀為實(shí)現(xiàn)腫瘤邊界的精準(zhǔn)識別提供了新的視角。
技術(shù)亮點(diǎn)
1. 共聚焦拉曼設(shè)計:
精準(zhǔn)聚焦生物信號,屏蔽雜光干擾,確保數(shù)據(jù)純凈度。
2. 多維校正:
內(nèi)置光譜校正裝置,數(shù)據(jù)穩(wěn)定性不受環(huán)境波動影響。
3. 零染色:
無需化學(xué)試劑處理,保留樣本原始形態(tài),避免染色偏差。
4. 分子級洞察:
直接解析核酸、蛋白、脂質(zhì)等代謝物振動信號,提供比形態(tài)學(xué)更早的病變預(yù)警。
案例實(shí)證:胃癌切片的分子級"指紋圖譜"
1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計
研究團(tuán)隊(duì)選取胃癌患者冷凍切片(厚度8 μm),對相鄰切片分別進(jìn)行HE染色與拉曼光譜采集。拉曼檢測切片置于專用芯片,避免普通載玻片信號干擾。
2. 結(jié)果
特征峰差異:如圖1 B所示,正常組織在748 cm?1(DNA/色氨酸特征)信號強(qiáng),腫瘤組織在1580 cm?1(DNA/苯丙氨酸特征)信號顯著增強(qiáng)。如圖1 C所示,正常組織和腫瘤組織在748、1126、1168、1222、1580、1632 cm-1處峰強(qiáng)均有差異。
圖1 正常組織與腫瘤組織拉曼光譜差異
拉曼光譜掃描+智能分析:對正常組織與腫瘤組織的混合區(qū)域光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)748與1580 cm-1的峰強(qiáng)與HE染色結(jié)果存在相關(guān)性,將拉曼光譜掃描結(jié)果進(jìn)行聚類和SVM分類,將結(jié)果中的不同分類采用偽彩標(biāo)記,如圖2 B IV、V所示,預(yù)測了腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的分界線。上述分類結(jié)果采用散點(diǎn)圖呈現(xiàn)如圖2 C所示,混合區(qū)域分類準(zhǔn)確率如圖2 D所示達(dá)到96%。
圖2 拉曼光譜掃描對腫瘤邊界的識別
研究意義
拉曼光譜掃描成像較自發(fā)熒光/漫反射成像在信噪比、準(zhǔn)確率[2]上提升較大,較HE染色流程又較為簡潔快速,保持樣品完整度的同時,能夠準(zhǔn)確定位腫瘤浸潤邊界,為醫(yī)學(xué)工作者提供分子級切除參考,無論是臨床手術(shù)參考,降低術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險,還是癌癥機(jī)制探索,P300共聚焦拉曼光譜儀無標(biāo)記、快速、高靈敏度的檢測將為癌癥相關(guān)的醫(yī)學(xué)研究提供全新視角。
參考文獻(xiàn):
[1] Wang, Y., Fang, L., Wang, Y., & Xiong, Z. (2024). Current Trends of Raman Spectroscopy in Clinic Settings: Opportunities and Challenges. Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany), 11(7), e2300668. https://doi.org/10.1002/advs.202300668
[2] Majumder, S. K., Keller, M. D., Boulos, F. I., Kelley, M. C., & Mahadevan-Jansen, A. (2008). Comparison of autofluorescence, diffuse reflectance, and Raman spectroscopy for breast tissue discrimination. Journal of biomedical optics, 13(5), 054009. https://doi.org/10.1117/1.2975962
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