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980下轉(zhuǎn)換熒光光譜儀應(yīng)用之生物醫(yī)療檢測

來源:上海如海光電科技有限公司 更新時間:2025-05-16 18:30:15 閱讀量:70
導(dǎo)讀:如海光電聚焦980nm下轉(zhuǎn)換熒光技術(shù),為生物醫(yī)學(xué)成像、藥物遞送與干細胞追蹤等前沿研究提供精準光譜解決方案。


在納米科技日新月異的今天,980 下轉(zhuǎn)換熒光技術(shù)憑借其獨特的優(yōu)勢,成為科研領(lǐng)域的焦點,尤其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力。在生物醫(yī)學(xué)光學(xué)領(lǐng)域,近紅外二區(qū)(NIR-II, 1000-2100nm)熒光檢測技術(shù)正憑借其卓越的組織穿透能力和低背景干擾特性,成為精準診斷與治療的核心發(fā)展方向,為相關(guān)領(lǐng)域研究提供技術(shù)支持。

01

測量原理


980 下轉(zhuǎn)換熒光是一種先進的激光誘導(dǎo)熒光光譜技術(shù)。其基本原理是利用 980nm 波長的激光作為激發(fā)光源,當(dāng)樣品受到這種特定波長的激光照射時,樣品中的特定分子或納米顆粒會吸收光子能量,其內(nèi)部電子會躍遷到高能態(tài)。然而,這種高能態(tài)并不穩(wěn)定,電子會迅速通過非輻射躍遷回到低能態(tài),同時釋放出熒光光子,這些光子的波長主要集中在 1500-2100nm 的近紅外區(qū)域。

圖 1 熒光的基本原理示意圖

下轉(zhuǎn)換熒光(Downconversion Fluorescence)是一種光致發(fā)光現(xiàn)象,其核心在于材料吸收高能光子后,通過多級能量傳遞或量子剪裁(Quantum Cutting)釋放低能光子。當(dāng) 980 nm 近紅外光(NIR-I)激發(fā)特定材料時,其內(nèi)部電子經(jīng)歷以下過程:

能量吸收:材料吸收 980 nm 光子,電子從基態(tài)(S? )躍遷至高能激發(fā)態(tài)(如 S? 或 T? )。

無輻射弛豫:激發(fā)態(tài)電子通過晶格振動或分子內(nèi)能量轉(zhuǎn)移,以非輻射形式衰減至中間能級(如 S? 或 T? )。

熒光發(fā)射:電子從中間能級返回基態(tài),釋放波長更長的光子(如1500-2100 nm,即近紅外二區(qū) NIR-II)。

02

技術(shù)優(yōu)勢

熒光光譜儀作為一種精密的分析儀器,在 980 下轉(zhuǎn)換熒光技術(shù)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。它具備多種顯著的優(yōu)勢,使其在眾多分析技術(shù)中脫穎而出:

(1)高靈敏度探測能力:熒光光譜儀配備了高靈敏度的探測器,能夠檢測到極其微弱的熒光信號。這使得它能夠在低濃度下精準地檢測到樣品中的目標物質(zhì)。

(2)高分辨率光譜分析:熒光光譜儀可實現(xiàn)高光譜分辨率,能夠清晰地區(qū)分樣品不同波長下的熒光發(fā)射峰。研究人員可以利用它深入探究樣品的光學(xué)特性,精確分析不同物質(zhì)的能級躍遷過程。在材料科學(xué)領(lǐng)域,通過高分辨率的熒光光譜,研究人員可以深入研究不同材料的電子結(jié)構(gòu)和光學(xué)行為,從而推動新型材料的研發(fā)。

(3)良好的生物相容性與組織穿透能力:近紅外波段的熒光信號在生物組織中具有較低的吸收和散射特性。這使得熒光光譜儀能夠?qū)崿F(xiàn)較深的組織穿透深度,同時減少對生物樣品的光損傷。

(4)動態(tài)分析能力:熒光光譜儀具備出色的動態(tài)分析能力,能夠?qū)崟r監(jiān)測樣品在不同時間點的熒光變化。這使得研究人員可以捕捉到生物分子或納米顆粒在動態(tài)過程中的行為變化。這種動態(tài)分析能力為研究生物體系的動態(tài)行為提供了強大的工具。

(5)高精度激發(fā)光源與穩(wěn)定控制:熒光光譜儀配備了高精度的激發(fā)光源,能夠提供穩(wěn)定且精確的光激發(fā)。激發(fā)光源的波長和功率可以精確調(diào)節(jié),確保樣品在最佳條件下被激發(fā)。這種高精度的激發(fā)光源與穩(wěn)定控制能力不僅提高了熒光信號的穩(wěn)定性和可重復(fù)性,還使得實驗結(jié)果更加可靠。

(6)智能化數(shù)據(jù)采集與分析:現(xiàn)代熒光光譜儀集成了先進的數(shù)據(jù)采集和分析系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)智能化的數(shù)據(jù)處理。通過軟件,儀器可以實時采集熒光光譜數(shù)據(jù),并進行快速分析和處理。內(nèi)置的分析工具可以進行光譜處理、峰值檢測和定量分析等操作,大大提高了實驗效率。

03

應(yīng)用領(lǐng)域


深層組織分子影像學(xué)

腫瘤靶向成像:通過抗體/核酸適配體修飾下轉(zhuǎn)換材料(如 Tm3?摻雜納米顆粒、cyanine 類染料),實現(xiàn)腫瘤標志物(如 HER2、PSMA)的 NIR-II 熒光示蹤。臨床前研究顯示,該技術(shù)可檢測直徑 0.5mm 的早期腫瘤結(jié)節(jié)(CT 分辨率約 5mm),并在術(shù)中實時勾畫腫瘤邊界(定位精度±0.2mm),降低殘余病灶風(fēng)險;

神經(jīng)活動監(jiān)測:利用 Ca2?敏感型下轉(zhuǎn)換探針(如 YC-NIR2),在 980nm 激發(fā)下監(jiān)測神經(jīng)元鈣信號變化,穿透 5mm 厚小鼠腦皮層,實現(xiàn)海馬區(qū)神經(jīng)元集群放電的無創(chuàng)成像,為癲癇病灶定位及阿爾茨海默病早期突觸丟失評估提供新手段。


藥物遞送系統(tǒng)優(yōu)化與動力學(xué)研究

載藥系統(tǒng)釋放監(jiān)測:將化療藥物(如 DOX)或基因載體包裹于下轉(zhuǎn)換材料中,通過 pH / 酶響應(yīng)型外殼實現(xiàn)靶向釋放。熒光光譜儀實時追蹤樣品熒光強度變化,指導(dǎo)載體材料優(yōu)化(如 PEG 鏈長、殼層厚度)。

體內(nèi)分布定量分析:通過器官熒光光譜強度,量化探針在腫瘤、肝臟、腎臟等組織的富集效率,優(yōu)化靶向配體(如 RGD 多肽)偶聯(lián)密度,降低非特異性攝取。


再生醫(yī)學(xué)與干細胞追蹤

干細胞移植示蹤:利用下轉(zhuǎn)換熒光標記間充質(zhì)干細胞(MSCs),在 NIR-II 區(qū)監(jiān)測其體內(nèi)遷移路徑。實驗顯示,標記細胞在心肌梗死模型中的歸巢效率可通過 1650nm 處熒光強度動態(tài)評估,較傳統(tǒng)生物發(fā)光法(穿透深度<0.5cm)提升檢測深度;

組織工程支架評估:通過檢測支架材料(如膠原/羥基磷灰石復(fù)合支架)負載的下轉(zhuǎn)換微球熒光分布,量化細胞黏附與增殖情況,為骨組織修復(fù)材料的生物相容性評價提供可視化依據(jù)。

04

解決方案

01

測量系統(tǒng)組成

激光器:激光器是關(guān)鍵組成部分,具有方向性好、單色性佳、參數(shù)可精確控制、相干性強、強度大等特性。這些特性使得激光誘導(dǎo)熒光檢測器的信噪比大大增強,能夠提供高強度的激發(fā)光,以確保足夠的分子被激發(fā)產(chǎn)生熒光信號,同時其良好的單色性有助于減少雜散光干擾,提高檢測的選擇性和靈敏度。

光譜儀:光譜儀是整個系統(tǒng)的核心部分,用于接收熒光信號并進行光電信號化。

熒光探頭:用于傳輸激光信號只樣品,用于激發(fā)樣品熒光信號,再收集樣品發(fā)出的熒光信號,并傳輸至光譜儀。

定制采樣附件:用于固定光纖探頭,滿足不同樣品的測量需求。

02

系統(tǒng)搭建示意

使用激光誘導(dǎo)熒光光譜儀測試樣品的熒光光譜,需要將熒光探頭的尾端光纖分別與拉曼光譜儀主機的光譜儀接口和激光器接口相連,在再將探頭放入可調(diào)節(jié)支架上,根據(jù)所測光譜數(shù)據(jù)調(diào)節(jié)探頭與樣品間的距離,選擇最佳距離固定后測試樣品的熒光光譜,詳細搭建示意圖如下。

圖 2 熒光測量搭建示意圖

表 1 推薦配置


05

應(yīng)用案例:

稀土納米顆粒測試


5.1 研究背景

隨著稀土納米材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用的不斷拓展,對稀土納米顆粒的熒光特性進行深入研究具有重要意義。了解稀土納米顆粒的熒光特性對于優(yōu)化其在生物醫(yī)學(xué)成像和治療中的應(yīng)用至關(guān)重要。通過調(diào)整稀土離子的摻雜含量,可以實現(xiàn)對熒光信號強度的調(diào)控,從而提高成像質(zhì)量和治療效果。使用由提供的 PL980 下轉(zhuǎn)換熒光光譜儀,探究摻雜不同含量 Tm 的稀土納米顆粒在 1500-2000nm 范圍內(nèi)的熒光特性。


5.2 實驗樣品及測試場景

圖 3 實驗樣品

圖 4 測試場景圖


5.3 測試方法

采用上??萍加邢薰旧a(chǎn)的 PL980下轉(zhuǎn)換熒光光譜儀進行測試。該光譜儀具有 1000-2100nm 的熒光光譜范圍,激發(fā)波長為 976±0.5 nm,線寬≤0.08nm,輸出功率 0-500mW 可調(diào)。測試過程中,980nm 的激光激發(fā)稀土納米顆粒,使其產(chǎn)生熒光發(fā)射,通過光譜儀收集和分析熒光光譜數(shù)據(jù)。


5.4 實驗數(shù)據(jù)

在實驗中,設(shè)置了 500mW 的激發(fā)功率、500ms 的積分時間和 20次硬件平均。通過調(diào)整焦距,采集了樣品的熒光信號。測試數(shù)據(jù)顯示,摻雜不同含量Tm的稀土納米顆粒樣品在 1500-2000nm 范圍內(nèi)均能檢測到發(fā)射峰,且隨著 Tm 含量的降低,發(fā)射峰強度逐漸降低。

圖 5 摻雜不同含量 Tm 的稀土納米顆粒

熒光光譜圖


5.5 實驗結(jié)論

實驗結(jié)果表明,摻雜不同含量 Tm 的稀土納米顆粒樣品在1500-2000nm 范圍內(nèi)均可檢測到發(fā)射峰。這為稀土納米顆粒在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用提供了重要的實驗依據(jù)。通過精確控制稀土離子的摻雜含量,可以實現(xiàn)對熒光信號的調(diào)控,從而滿足不同應(yīng)用場景的需求。

06

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