小鼠磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書

　　BS-9274 小鼠磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒

　　一、產(chǎn)品概述

　　檢測(cè)原理

　　采用雙抗體夾心法，通過(guò)預(yù)包被抗小鼠PLCγ1抗體的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白，再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。經(jīng)TMB顯色后，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，濃度與OD值呈正相關(guān)。

　　性能指標(biāo)

　　靈敏度：<0.156 ng/mL

　　檢測(cè)范圍：0.156-10 ng/mL

　　重復(fù)性：板內(nèi)/板間變異系數(shù)<10%

　　二、試劑盒組成

　　組分規(guī)格(96T)存儲(chǔ)條件

　　預(yù)包被酶標(biāo)板8×12條2-8℃(避光)

　　標(biāo)準(zhǔn)品6管(0.156-10 ng/mL)-20℃(避免反復(fù)凍融)

　　檢測(cè)抗體-HRP10 mL4℃

　　20×洗滌緩沖液25 mL室溫

　　TMB顯色液(A/B)各6 mL4℃(避光)

　　終止液6 mL室溫

　　三、實(shí)驗(yàn)步驟

　　樣本準(zhǔn)備

　　血清/血漿：使用EDTA抗凝管采集，避免溶血，2-8℃保存48小時(shí)或-80℃長(zhǎng)期保存。

　　組織勻漿：按1:9比例加入裂解緩沖液，冰上勻漿后離心取上清。

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋

　　取7支EP管，標(biāo)注1/2至1/64梯度，按倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線(示例：200μL標(biāo)準(zhǔn)品+200μL稀釋液混勻后轉(zhuǎn)移至下一管) 。

　　檢測(cè)流程

　　加樣：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃孵育90分鐘。

　　洗滌：棄去液體，每孔加入350μL 1×洗滌液，靜置30秒后拍干，重復(fù)3次。

　　顯色：加入100μL TMB底物，避光孵育15分鐘，加入50μL終止液。

　　測(cè)定：30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀讀取450nm OD值。

　　四、注意事項(xiàng)

　　試劑平衡：使用前需將試劑盒室溫平衡60分鐘，避免冷凝水影響結(jié)果。

　　移液精度：使用校準(zhǔn)后的移液器，避免交叉污染。

　　數(shù)據(jù)異常處理：若標(biāo)準(zhǔn)曲線R2<0.99，需檢查稀釋準(zhǔn)確性或更換批次試劑。

　　五、結(jié)果計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制四參數(shù)擬合曲線。

　　樣本濃度通過(guò)曲線方程計(jì)算，若超出檢測(cè)范圍需重新稀釋。

　　六、常見(jiàn)問(wèn)題

　　高背景：可能因洗滌不徹底或底物污染，需檢查洗滌步驟及試劑有效期。

　　復(fù)孔差異大：確保加樣速度一致，樣本充分混勻。

　　注意：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。

　　小鼠磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)，本生，您信任的合作伙伴!本生試劑盒