- 2025-06-04 00:22:40線蟲分離器
- 線蟲分離器是一種專門用于分離和提取線蟲的設備。其主要功能是通過特定的分離技術和操作方式，將線蟲從復雜的生物樣本或環(huán)境中有效地分離出來，以供后續(xù)的研究和分析。該設備具有操作簡便、分離效率高、對線蟲損傷小等特點，廣泛應用于生物學、生態(tài)學、環(huán)境科學等領域的研究和教學中。通過線蟲分離器，研究人員可以方便地獲取大量的線蟲樣本，進而開展相關的實驗和研究工作。
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線蟲分離器問答
- 2023-02-06 10:53:51明美體式顯微鏡應用于線蟲幼體觀察
- 明美體式顯微鏡應用于線蟲幼體觀察線蟲是神經(jīng)發(fā)育、細胞分化、細胞凋亡和衰老研究常用的模式動物。線蟲結構簡單，培養(yǎng)方便，繁殖迅速，對實驗條件的要求也低于哺乳動物組織和細胞。從線蟲幼體的挑選、基因注射到功能成像，都會用到體視顯微鏡。此次，湖北客戶需要一套顯微鏡，以用于線蟲幼體觀察，明美工程師推薦了體式顯微鏡MZ101, 具有工作距離長，變倍范圍大，變倍范圍大的優(yōu)點。采用高亮白光LED照明，可選擇透射、反射、透反射照明方式，開關獨立控制，亮度隨意可調。體式顯微鏡MZ101變倍比高達1:9，在1X物鏡下放大倍率達7X-63X，樣品觀察細致靈活，滿足各種模式生物觀察需要，可以選配2X輔助物鏡進一步提升放大倍數(shù)，可以選配偏光附件實現(xiàn)偏光觀察，滿足晶體觀察需要。 您若對體式顯微鏡感興趣或存在疑問，歡迎與我們聯(lián)系，我們將竭誠為您服務！免責聲明本站無法鑒別所上傳圖片、字體或文字內(nèi)容的版權，如無意中侵犯了哪個權利人的知識產(chǎn)權，請來信或來電告之，本站將立即予以刪除，謝謝。來源：https://www.mshot.com/article/1658.html
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- 2022-06-22 14:37:42【科普】熒光顯微鏡用于秀麗線蟲觀察
- 秀麗線蟲全稱是線蟲動物門的秀麗隱桿線蟲。秀麗線蟲是一種非寄生的線蟲，主要以細菌為食物，因此具有一定的實驗性。秀麗線蟲在1900年已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)，直到1963年Sydney Brenner對線蟲進行的發(fā)育生物學和神經(jīng)科學進行研究后，秀麗線蟲變成為熱門的生物研究素材。秀麗線蟲對生物研究工程有深遠的影響，甚至往后有3次諾貝爾學獎的研究成果均來自它身上。秀麗線蟲-模式動物特點：體長1毫米，易于在實驗室大規(guī)模培養(yǎng)。生長速度快，三天一代。大多數(shù)個體是雌雄同體，自體受精，這樣能保證父代和子代基因組完全相同。自然狀態(tài)下又能以千分之三的概率產(chǎn)生雄蟲，雄蟲和雌雄同體之前又可以進行有性生殖，可以進行雜交，便于遺傳學操作。身體透明，易于顯微鏡觀察，便于表型分析。身體體細胞數(shù)量固定，細胞發(fā)育譜系清晰。是完成測序的多細胞生物，基因組數(shù)據(jù)完全公開。基因干擾方便，可以飼喂相應菌株實現(xiàn)特定基因的RNAi。突變體可以保存在-80℃冰箱或液氮中，這一點做果蠅的看了這個都眼紅。線蟲觀察方案秀麗線蟲觀察學習大致分為3個階段，分別是卵期（A）、幼蟲期（C）以及成蟲期（B）。飼養(yǎng)和保存：大腸桿菌OP50、NGM培養(yǎng)基、M9緩沖液和S緩沖液。觀察設備：熒光生物顯微鏡MF31注射后3天，觀察孵出的F1代是否有目的DNA表達。目前，線蟲外源基因表達的標記通常用：A、熒光蛋白與目的蛋白形成融合蛋白，但需要確定熒光蛋白的連接不影響目的蛋白的功能；B、目的基因與熒光標記基因共注射；C、目的基因與具有明顯表型的標記基因共注射；顯微鏡是觀察研究的基礎1、明美熒光生物顯微鏡MF31熒光生物顯微鏡MF31 采用無限遠平場消色差物鏡和大視野目鏡，可用雙目或三目觀察，搭配LED熒光激發(fā)裝置，實現(xiàn)明場和熒光顯微觀察，供臨床試驗室利用顯微放大原理觀察微小細胞、組織等樣本用。·配備高對比度LED熒光照明系統(tǒng)，圖像清晰銳利，為線蟲觀察視野提供更多細節(jié)?！な褂脡勖L，簡單易用，無需更多培訓?！た蛇x配及定制不同熒光附件，適合各種熒光劑以及熒光領域?！げ捎脽o限遠平場消色差物鏡和大視野目鏡?！た捎秒p目或三目觀察。2、明美體視熒光顯微鏡MZX81體視熒光顯微鏡MZX81使用的是伽利略光學系統(tǒng)，采用了左右光路無差異、兩個獨立平行光束的伽利略光學系統(tǒng)，能夠大幅提升圖像的可視性，確保良好的光學性能和高模塊化系統(tǒng)。體視熒光顯微鏡MZX81擁有大變焦比率，7:1的大變倍比，搭配1X平場復消色差物鏡(2X可選)可以實現(xiàn)8倍到56倍的變焦放大倍率范圍，可以觀察到直徑為28.00mm的標本。體視熒光顯微鏡MZX81采取人體工學設計，目鏡有超寬視場，不管短時間或長時間，觀察圖像時都能輕松觀察到，減輕眼疲勞。為不同操作者身高差異，準備了上下5～45°可調傾斜角度的觀察筒。體視熒光顯微鏡MZX81配備了體視熒光模塊，熒光模塊提供B、G、UV三個波段熒光激發(fā)組，紫外光源外置，光利用率高，還配備紫外防護擋板?？筛鶕?jù)研究觀測樣品的不同，自主選擇相應的激發(fā)組，可以輕松實現(xiàn)熒光、明場進行切換觀察，可應用于生物活體成像、線蟲、果蠅、斑馬魚、胚胎、司法刑偵等領域。并且可以匹配其它品牌顯微鏡，可按需求定制。來源：https://www.mshot.com/article/1099.html
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- 2021-12-15 09:43:40線蟲顯微注射如何操作？超詳細實驗步驟快來碼住
- 秀麗線蟲(Caenorhabditis elegans)是研究動物遺傳、個體發(fā)育和行為活動的重要模式生物，能夠研究從分子細胞水平到整體系統(tǒng)水平的相關生命活動的作用機理。顯微注射技術使用尖 端開口直徑為微米級的玻璃微管，將核酸注入線蟲的性腺，進而被成熟的卵細胞吸收，以染色體外遺傳物質的形式存在。而顯微注射技術是線蟲領域的核心技術，廣泛應用于研究線蟲的基因表達、功能和基因間的相互作用等。（圖片來源于攝影師馬克奧-西奧卡）實驗儀器及試劑主要儀器包括：顯微操縱器、拉制儀、注射泵、體式顯微鏡或倒置顯微鏡等。試劑耗材包括：瓊脂糖、礦物油、帶芯玻璃管、載玻片、拾取針、恢復緩沖液、OP50培養(yǎng)基、加樣針等。實驗步驟01、制備瓊脂糖固定板移液槍取約50μl加熱溶解的2%瓊脂糖溶液滴在24mm×60 mm的載玻片上，用另一載玻片輕壓其上(小心氣泡產(chǎn)生)，待瓊脂糖凝固后(約5分鐘)，將上面的玻片從側面滑下即可。將制作好的瓊脂板室溫過夜或80℃干燥1小時后可疊放起來備用。圖：瓊脂糖固定板的制備[1]。A. 用兩條膠帶將載玻片固定在干凈的工作臺上；B. 在載玻片中間滴一滴約50μl新鮮熱熔2% 瓊脂糖溶液；C. 將顯微鏡載玻片放在瓊脂糖滴上，輕輕按下使其變平。瓊脂糖凝固并取出顯微鏡載玻片。02、制備注射針注射針對于注射成功與否至關重要，使用水平拉制儀通過調節(jié)速度、拉力等參數(shù)可穩(wěn)定獲得兩根相同的注射針，建議使用有芯玻璃管進行拉制，其芯能夠使注射液迅速充滿針頭尖端，可以很好的排出氣泡。注射針的錐度一般5-7mm，尖端0.5-0.9μm。MP-500有著前衛(wèi)智能的操作界面及加熱片限位槽等人性化設計，集安全性與人性化于一體，輕松滿足微電極相關實驗的需求。03、制備注射液并加入注射針根據(jù)實驗需求，選擇擬注射的物質，包括DNA、RNA、蛋白質等。注射物的純度是轉入效率高低的重要影響因素之一。通過注射針的尾端，用細長的加樣針將注射液灌入，等待數(shù)分鐘，觀察針尖有無氣泡。04、注射體積校準將注射針裝到注射泵上，吸入待注射液。在顯微鏡視野中心放一把微尺，上面放置一個裝適量礦物油的4厘米的培養(yǎng)皿。將注射針浸入礦物油中，注射一次得到一個液滴球，通過微尺測量球體直徑計算出注射的體積，調整注射液滴的大小使其符合所需的直徑。1 nL液滴的半徑為0.062 mm (V = 4/3πR3)。瑞沃德R480玻璃微電極注射泵，注射精度高，運行穩(wěn)定，密封性良好，保證注射過程不會出現(xiàn)漏液情況。05、破針將玻片放在加入注射油的瓊脂墊上，移動微操使注射針與玻片邊緣相撞，注射針尖端被撞破，可觀察到有液泡自動滲出，該方法更易于刺入線蟲體內(nèi)。06、固定線蟲一般挑選即將產(chǎn)卵或體內(nèi)有少量卵的年輕成蟲進行注射，此時期性腺發(fā)育成熟，較易被DNA 轉染從而產(chǎn)生轉基因后代。使用拾取針將線蟲挑至瓊脂糖固定墊上，調整位置使性腺暴露，滴加注射油覆蓋整個蟲體。固定操作要迅速，否則線蟲容易脫水而死。圖：固定在固定板上并準備注射的線蟲。箭頭表示在性腺中注射首 選部位。比例尺為50μm[1]。07、注射將瓊脂糖固定板放在載物臺上，顯微鏡下找到線蟲，調整焦距，將性腺部位聚焦在正確的平面。使用微操，將注射針尖刺入性腺。啟動微量注射泵進行注射，能觀察到注射液在性腺中快速流動，注射后的性腺被液體充滿。圖：顯示注射物注射前(1)和注射后(2)的流動。箭頭標記性腺中的區(qū)域，注射物到達的位置[2]。MM-500電動顯微操縱器與顯微鏡配合使用，可以完成人手不能從事的精細運動的顯微操作，體積小巧輕便，人性化中英文操作界面，操作起來更便捷。08、恢復在體視顯微鏡下，滴加恢復緩沖液至注射后的線蟲。一般等待2-5 min，線蟲活力恢復，即頭部左右搖擺，身體開始游動，即可挑至培養(yǎng)板上，進行20℃常規(guī)培養(yǎng)。瑞沃德提供MP-500程控水平電極拉制儀、MM-500電動顯微操縱器、R480玻璃微電極注射泵組合方案，可對斑馬魚、線蟲等胚胎、幼體進行超精細顯微注射。瑞沃德注射系統(tǒng)注意事項[2]：a．瓊脂糖固定板：若線蟲在瓊脂糖固定板上短時間內(nèi)死亡，則說明固定板過于干燥，可換瓊脂糖層稍薄的固定墊，因為瓊脂糖的主要作用是吸收線蟲的水分；若線蟲無法粘牢，則說明固定墊太濕或太薄，可繼續(xù)在烘箱內(nèi)放一段時間，或將線蟲先粘在固定墊上后加油；b．注射物質：注射DNA使用前要混勻并離心以避免雜質阻塞針頭。注射DNA的總濃度一般控制在200mg/L以下，因為較高濃度的DNA可能產(chǎn)生毒性或過量表達，從而影響下一代的表型恢復；c．注射角度：注射針與性腺最 好呈銳角，推薦與頭部或尾部幾乎平行或呈15℃角；d．實驗樣本：被注射的線蟲需要保證其食物充足，生長狀態(tài)健康；f．注射后線蟲死亡率高：注射后等待恢復的時間過短或太長；可能是注射針尖太粗或注射DNA 被污染。針對此原因，可使用較細注射針，每次只注射一側性腺，若注射操作正確，但不產(chǎn)生轉基因線蟲，則可能是轉基因致死或注射核酸污染，可重新純化?！緟⒖嘉墨I】[1] Matthias Rieckher and Nektarios Tavernarakis. Generation of Caenorhabditis elegans Transgenic Animals by DNA Microinjection [J].Bio Protocol, 2017, 7(19): e2565.[2] Krishna S. Ghanta et al., Microinjection for precision genome editing in Caenorhabditis elegans[J].Star Protocols, 2021, 2(3): 100748.
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- 2018-12-05 10:53:10根結線蟲和土壤酸堿度有關系嗎?
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- 2018-12-04 12:45:24求助，急，單條線蟲基因組DNA提取的具體實驗步驟
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