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2025-07-12 21:22:30載玻片
載玻片是用于顯微鏡觀察時放置樣本的透明玻璃片，具有平整度高、透光性好等特點。它通常呈長方形，較厚且不易破損，能夠確保樣本在觀察過程中保持穩(wěn)定。載玻片廣泛應用于生物學、醫(yī)學等領域，是科研和臨床診斷中不可或缺的工具。

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2022-07-07 17:24:44ibidi通道載玻片中貼壁細胞的消化傳代|德國進口載玻片
　　在本應用示例中，我們展示了如何從μ-Slide VI 0.4通道載玻片中洗脫培養(yǎng)后的貼壁細胞。該方法適用于不同規(guī)格的通道載玻片。 　　1.根據實驗說明將您的細胞培養(yǎng)到所需的匯合度。 裝有細胞和培養(yǎng)基的μ-Slide VI 0.4 　　2.從μ-Slide VI 0.4通道載玻片的通道口中取出培養(yǎng)基，不要吸干整個通道。　　3.用PBS或任何其他適當的緩沖液清洗兩次，然后從另一端吸出。每個通道使用體積為100μl。我們建議同時使用細胞培養(yǎng)吸引器和移液器。如圖所示，使用吸引器的尖端和移液器。μ-Slide VI 0.4的一個通道的橫截面顯示了PBS洗滌步驟 　　4.使用細胞培養(yǎng)吸液器從通道中吸出全部PBS在這個步驟中，緩沖液從容器口和通道中完全去除 　　5.立即用30μl分離溶液（例如胰蛋白酶/EDTA或Accutase）重新填充通道。如圖所示，將移液器吸頭直接放在通道的入口上。將30μl分離溶液填充到空通道中 　　6.再將您的細胞放入培養(yǎng)箱中。由于生長面積和體積的縱橫比不同，分離過程可能需要比平時更長的時間（2-3分鐘）。用相差顯微鏡觀察細胞脫離。如果沒有發(fā)生分離，請增加分離溶液的濃度或使用更長的孵育時間。細胞會在幾分鐘后分離 　　7.細胞成圓形并分離后，用100μl新鮮培養(yǎng)基或終止溶液沖洗每個通道分離的細胞被100μl新鮮培養(yǎng)基沖出通道 　　8.從通道的另一端取出細胞懸液。如果還剩一些細胞，請重復沖洗步驟。 　　9.收集懸浮細胞并去除或稀釋分離溶液在細胞懸浮后，可以通過從通道中吸出溶液來收集
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2022-08-23 16:10:37免疫熒光應用-巨噬細胞在ibidi腔室載玻片，通道載玻片中的培養(yǎng)處理
　　1. 基本信息　　　　下面的應用描述了小鼠巨噬細胞系RAW-264.7（生物安全等級2）在ibidi μ-Slides VI 0.4 和8孔腔室載玻片的培養(yǎng)方案。這是一個特殊的細胞系的例子，用于顯示粘附時間，細胞密度和細胞形態(tài)的示范。本應用可根據您的具體實驗要求進行調整?！　　　?. 材料　　　　在設置中應用下列材料：　　　　·RAW-264.7 (murine macrophages, CLS - Cell Lines Service, Biosafety Level 2) 　　　　·Medium: RPMI 1640 with 2 mM L-Glutamin and 10% FBS 　　　　·μ-Slide VI 0.4, ibiTreat （ibidi 80606）　　　　·μ-Slide 8 well, ibiTreat （ibidi 80826）　　　　·Accutase (PAA Laboratories GmbH) 　　　　·1x Phosphate buffered saline (PBS) 　　　　3. 細胞培養(yǎng)與材料制備　　　　在將細胞接種到玻片中之前，按照常規(guī)的方法培養(yǎng)細胞?！　　　ˇ?Slide VI 0.4 ：通道玻片和培養(yǎng)基，在37℃和5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。這對于避免隨著時間的推移出現氣泡至關重要。為此，在50 ml器中填充適量的培養(yǎng)基，并輕輕地將瓶蓋擰緊。在 μ-Slide 8孔載玻片開放孔井中，氣泡可排出到大氣中?！　　　〔痖_μ-Slide的包裝，把它放在μ-Slide支架上，并在準備細胞懸浮液時同時將蓋子放在 Luer 適配器/孔上?！　　　?. 播種細胞　　　　分離細胞：　　　　吸出培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，并用PBS洗滌細胞一次。每75cm2 燒瓶中加入3-5 ml的Accutase，并將燒瓶放入培養(yǎng)箱中以加快分離速度。如果是RAW-264.7細胞系，則大約需要8分鐘。使用Accutase分離的細胞存活率更高?！　?.1. 將細胞接種到μ-Slide VI 0.4中　　　　在μ-Slide VI 0.4建議的細胞濃度：最終細胞數  0.3 x 10 5 cells/cm2，制備濃度6 x 10 5cells/ml。通過將移液器尖端直接放在通道的入口上，將30 μl細胞懸浮液填充到每個通道中。將蓋子蓋在玻片上，在37°C和5％CO2下孵育半小時以固定細胞?！　　　〖毎N壁后，分別用60 μl無細胞培養(yǎng)基填充儲液池。 避免將移液器吸頭直接指向通道的入口。將玻片放回培養(yǎng)箱中?！　D1：接種后一小時，在ibiTreat μ-Slide VI 0.4（貨號80606）中的RAW-264.7　　圖2: 在ibiTreat μ-Slide VI 0.4中的RAW-264.7，孵育24小時后　　圖3:在ibiTreat μ-Slide VI0.4中的RAW-264.7，培養(yǎng)四天后　　　　4.2 將細胞播種在μ-Slide 8 well 中　　在μ-Slide 8 well建議的細胞濃度：最終細胞數 0.3 x 10 5 cells/cm2 ，制備濃度 1.1 x 10 5 cells/ml。將300 μl 的細胞懸浮液注入各孔中。將蓋子蓋在玻片上，在37°C和5% CO2中孵育。不需要進一步添加培養(yǎng)基。　　圖4：在ibiTreat μ-Slide 8 well(貨號：80826)中的RAW-264.7，播種后1小時　　圖5: 在ibiTreat μ-Slide 8 well中的RAW-264.7，孵育24小時后　　圖6：在ibiTreat μ-Slide 8 well中的RAW-264.7，經過四天的培養(yǎng)　　　　為獲得最佳的分布的勻的細胞，我們建議使用像μ-Slide VI 0.4 這樣的通道載玻片。在8孔腔室載玻片中，細胞密度可能會在孔的整個表面上因點而異，具體取決于細胞播種過程中的處理。　　　　5. 免疫熒光染色　　　　像往常一樣為您的細胞固定和染色?！　　　∽⒁猓涸?μ-Slides 中染色時注意液體的處理　　　　μ-Slide VI 0.4 ：更換液體，先吸出兩個儲液池而不排空通道。 如果您使用的是真空設備，請注意不要將吸頭直接放在通道的入口上。 用100 μl新溶液沖洗通道3次。 從一側添加新的溶液，通過通道流入另一個儲液池，然后從另一側吸出，直到兩個儲液池都排空。注意通道永遠不要干涸！　　　　μ-Slide 8孔載玻片：在 μ-Slide 8孔中，無需特殊處理措施。像在任何其他培養(yǎng)皿或孔板中一樣的交換液體?！　　　∠挛闹?，給出了使用以下材料對細胞核和肌動蛋白絲進行染色的示例：　　　　細胞核：DAPI（Diamidino pheylindol dihydrochlorid） SIGMA, 32670 　　　　肌動蛋白絲：Phalloidin, Alexa Fluor ? 488 Conjugate, LONZA, PA-3010 　　　　1. 用3.7% 的PFA在PBS（pH 7.4）中室溫下固定細胞10分鐘。　　　　2. 用PBS清洗細胞三次?！　　　?. 用Triton X 100（0.1%）孵育細胞5分鐘?！　　　?. 用PBS清洗細胞三次。　　　　5. 用1%牛血清白蛋白在PBS中孵育20分鐘?！　　　?. 用PBS清洗細胞三次?！　　　?. 在0.2μm濃度下用鬼筆環(huán)肽Alexa For 488孵育細胞20分鐘?！　　　?. 用PBS清洗細胞三次?！　　　?. 用DAPI（0.5μg/ml）孵育細胞10分鐘。　　　　10. 用PBS清洗細胞三次?！　　　?1. 完全吸出通道并用ibidi封片劑重新填充。 現在樣品可在顯微鏡上觀察了。保存在陰暗陰涼處可儲存數周?！　D7：在 μ-Slide VI 0.4中的RAW-264.7用DAPI（細胞核、藍色）和Phalloidin, Alexa Fluor ? 488 Conjugate（肌動蛋白絲，綠色）
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2022-07-15 17:39:29ibidi|流體剪切力實驗|通道載玻片串連方法步驟
　　1.介紹　　　　本應用逐步說明了如何串聯(lián)連接多個Luer-Slides。優(yōu)點是僅使用一個流體單元即可觀察和培養(yǎng)多個載玻片。當使用相同規(guī)格的載玻片時，載玻片中的流速是相同的。也可以通過連接不同高度的載玻片來改變剪切速率（例如，μ-Slide I0.2Luer和μ-Slide I0.4Luer）?！　　　”敬谓榻B了兩個載玻片連接的過程。但是它可以應用于大量的載玻片?！　　　?.材料　　　　載玻片：2片 μ-Slides I 0.6Luer, ibiTreat                ibidi (80186)　　　　細胞：Endothelial cells (2.5 · 105 per slide)          e.g. Promocell　　　　培養(yǎng)基：Endothelial Cell Growth Medium            e.g. Promocell　　　　連接器：Serial Connector                                      ibidi (10830)　　　　注射器：帶簡單Luer適配器的無菌注射器（5 ml）　　　　串行連接器：　　　　管道：Silicone Tubing 1.6 mm ID                           ibidi (10842)　　　　適配器：Luer Connector Male                                 ibidi (10824)　　　　將一個塑料連接器插入通道載玻片的兩端（6厘米），以在載玻片之間連接起來。下圖是在兩端帶有兩個配套的Luer公接頭的連接器管。可用乙醇或高壓滅菌消毒接頭?！　　　”仨氃跓o菌條件下執(zhí)行以下步驟！　　　　3. 播種細胞　　　　· 準備1.67 · 106 cells/ml.的細胞懸液?！　　　　?將150 μl注入通道。僅填充通道體積（圖1a）?！　　　　?將帽蓋在Luer接頭上，并將載玻片放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)半小時來固定細胞?！　　　　?細胞固定后，將兩邊儲液接口各加60 μl充滿?！　　　?. 連接載玻片　　　　現在準備載玻片，使細胞在通道中生長，并向儲液池中填充60 μl無細胞培養(yǎng)基（請參見第3節(jié)）。　　　　· 在連接之前，將所有儲液器各加60 μl（圖1b）?！　　　　?將連接器管的一個Luer適配器插入載玻片的一個母Luer適配器中（圖1c）。　　　　· 將一些預備的培養(yǎng)基吸入注射器。倒轉注射器并將多余的空氣推出（圖1d）?！　　　　?使用沒有氣泡的注射器在載玻片端口注入。可能會有些溢出（圖1e）。　　　　小心地將液體注入載玻片，直到連接器管中充滿為止（圖1f）　　　　　　圖1：（a）接種細胞時的用量； （b）載玻片在連接之前已完全填滿； （c）載玻片中插入連接管； （d）無氣泡的注射器； （e）將注射器插入載玻片一端； （f）用注射器推動介質來填充連接器管道　　　　· 當連接器管道完全充滿時（圖2a），將其插入第二張載玻片的接口上（圖2b-d）?！　　　　?如果要連接兩個以上的載玻片，將第二個連接器管放在第二個載玻片空的另一端口上，用注射器推入介質，依此類推。　　　　· 慢慢連接的所有載玻片將注射器從適配器上卸下（圖2e）?！　　　　?要將載玻片連接到灌注套件，兩個Luer容器必須在頂部填充培養(yǎng)基?？捎眉埥聿寥ミ^多的培養(yǎng)基。　　　　　　圖2：（a）連接管已完全充滿； （b-c）將連接器管插入第二載玻片的魯爾接頭上； （d）帶有適配接頭管連接； （e）取下注射器； （f）擦去溢出的介質，并填充儲液罐以連接到灌注套件。　　　　5. 連接到灌注裝置　　　　將載玻片連接到灌注套件　　圖片串聯(lián)安裝帶有兩個μ-Slides I Luer的一個流體單元
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2022-10-26 16:35:36ibidi實驗方案| μ-Slide VI 0.4串聯(lián)，也適用其他Luer-Slides單通道載玻片
　　1.介紹　　　　ibidi泵系統(tǒng)/流體剪切力系統(tǒng)是專為灌注條件下的長期細胞調節(jié)而設計。標準方法是將一個載玻片連接到一個灌注裝置。在某些情況下，增加載玻片（細胞）的數量可能是有用的。例如，當計劃進行各種染色時，或者如果細胞數量對于后續(xù)的應用（如FACS）不夠時?！　　　”緫檬且粋€循序漸進依次連接μ-Slide VI0.4六通道載玻片的實驗方案?！　　　≈匾崾?！　　　　串聯(lián)的通道承受著幾乎相同的流速，因此剪切應力也幾乎相同?！　　　∥覀儚娏ㄗh串聯(lián)通道載玻片，而不是并聯(lián)！　　　　我們建議按所述方式連接不要超過兩個μ-Slide VI0.4 六通道載玻片　　　　2.材料　　　　對于設置，需要以下材料(無菌): 　　* 串聯(lián)連接管(ibidi #10830)，5 pieces 　　* 細胞培養(yǎng)基 　　* 接種了細胞的ibidi μ-Slide VI 0.4 　　* 灌流管 　　* 1 ml注射器 　　* 軟管夾 　　* 移液吸頭　　　　重要提示！　　　　將串聯(lián)連接管、細胞培養(yǎng)基、通道載玻片和灌注裝置在培養(yǎng)箱中平衡一整晚!　　　　本方案的所有步驟都應在無菌條件下完成!　　　　3.準備工作　　　　整個設置相當于只有一個通道的標準實驗。 區(qū)別是，在將整個組件連接到Perfusion Set之前，先將多個通道串行連接起來?！　　　?.1.接種細胞　　　　像往常一樣在μ-Slide VI 0.4的通道中接種細胞。如果需要進一步的靜態(tài)培養(yǎng)，讓細胞附著并在附著后用60μl無細胞培養(yǎng)基填充儲液池。詳細說明見“使用ibidi流體剪切力系統(tǒng)培養(yǎng)內皮細胞實驗方法匯總”。細胞貼壁后，就可以進行載玻片的串連了?！　　　?.2.泵設置　　　　按照“使用ibidi流體剪切力系統(tǒng)培養(yǎng)內皮細胞實驗方法匯總”中的說明準備泵的設置。向灌流管的儲液池中各注入5ml平衡介質，并以中壓(約50mbar)運行泵，去除氣泡?！　　　≈匾崾?！　　　　將公魯爾接頭連接到母魯爾接頭時，務必小心不要帶進氣泡?！　　　”M可能快地工作，以避免載玻片和細胞冷凝。整個過程必須在10分鐘內完成?！　　　?.串聯(lián)連接　　　　通道的串聯(lián)連接是在細胞貼壁后和將載玻片連接到灌注管之前完成?！　“凑盏?部分的描述準備載玻片，接種細胞并貼壁        如圖所示，將五個串行連接管連接到Luer端口　　用無細胞培養(yǎng)基填充注液孔，直到所有注液孔完全充滿    在此步驟中，注意注液孔底部不能有氣泡　　注意不能在注液孔中留有氣泡　　用1ml的無菌注射器吸滿培養(yǎng)基，小心插入如圖的孔中，不要引入氣泡?！　⌒⌒穆⑷肱囵B(yǎng)基，直到第一個串聯(lián)管有培養(yǎng)基微微冒出　　小心的將串聯(lián)管彎過來，插入相鄰的Luer端口中。不要產生氣泡?！　±^續(xù)推動注射器，直到第二根串聯(lián)管也被充滿，繼續(xù)推動注射器充滿下一根串聯(lián)管?！　≈貜蜕厦娴牟僮?，繼續(xù)充滿所有的通道和串聯(lián)管?！　⑺械拇?lián)管連接好后，將加滿液體排除氣泡的灌流管用軟管夾夾住?！　墓嗔鞴艿哪隔敔栨i定耦合器中拔出公魯爾接頭，并將其插入載玻片上末尾一個Luer端口中。在慢慢抽出注射器，用新鮮的培養(yǎng)基填滿Luer端口并去除氣泡　　從灌流管的母魯爾鎖定耦合器中拔出第二個公魯爾接頭，并將其插入載玻片上另一端末尾的Luer端口　　設置完成，可開始啟動實驗。別忘了取下軟管夾！　　串聯(lián)灌流系統(tǒng)搭建完成?！　　　?.調整流速　　　　軟件中無法預見多個通道載玻片的設置。需要調整泵的參數以適應新的要求。作為指南您可以在軟件中選定正在使用是μ-Slide VI0.4通道載玻片。由此產生的流速(以及剪切應力)將低于在單通道的應用中。用所需的剪切應力啟動一個循環(huán)，手動測量流速(ibidi Pump Instructions, page 40（可聯(lián)系我們索要電子版文檔）)。然后進入重新校準對話框，輸入計算的（軟件給定的流速）和測量的流速。
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2022-10-09 17:23:13金秋十月-ibidi μ-Slide系列產品共聚焦腔室載玻片 | ibidi品牌特惠月, 盡享優(yōu)惠!
　　ibidi品牌特惠月 盡享優(yōu)惠　　　　　　活動時間：即日起至2022.10.31日　　　　活動對象：終端客戶　　　　活動方案　　　　1.買送活動一　　　　買一盒享8折優(yōu)惠價，隨機送小樣；二盒享75折優(yōu)惠價，隨機送小樣；小樣送完即止?！　　　?.買送+贈活動二　　　　買三盒送一盒，另贈100電話卡或購物卡；買五盒送兩盒，另贈200電話卡或購物卡。　　　　3.活動產品　　　　　　產品特點　　　　1、超薄底部(符合Coverslip#1.5厚度標準，約0.17~0.18 mm)，適于高倍率顯微鏡觀測。玻璃底可用于TIRF和單細胞應用；　　　　2、含有獨立的開放小室，“All-in-one”小室可以用來做細胞培養(yǎng)和顯微觀察；　　　　3、簡易快速的免疫熒光染色，不需蓋玻片，無滲漏；　　　　4、價格經濟實惠，僅需少量的細胞和試劑；　　　　5、多種底部可供選擇，滿足您不同的實驗需求：　　　　? ibiTreat底部：ibidi專利物理處理，超薄親水，適合大多數細胞的貼壁培養(yǎng)，無需另外包被；　　　　? 1.5H玻璃底：底部厚度僅為170μm，光學性能好，適用于更高要求的光學成像（如TIRF和單細胞應用等）　　　　? 帶格子的標準底：便于定位目標細胞/組織，確認是同一個觀察對象，特別適合細胞或細胞簇的定位和重找回；　　　　? 可移除底部：適用正置/倒置顯微鏡觀察；適用于免疫熒光染色和長時間樣本保存；　　　　? 可粘載玻片：可粘附在任何表面上，適用于材料研發(fā)；　　　　? Bioinert生物惰性表面：徹底的不貼壁，不吸附任何生物分子即便進行長時間的實驗，非常適合培養(yǎng)懸浮細胞和細胞聚集體?！　　　‘a品優(yōu)勢　　　　左圖是傳統(tǒng)方法，右圖是ibidi簡易快速一體化的免疫熒光實驗方法　　　　　　ibidi ???  活動說明：　　　　本次活動均為一次性購買方可參與；　　　　多買多送，上不封頂；　　　　本次活動不可與其他活動疊加參與；　　　　本次活動最終解釋權歸雷萌生物所有。
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