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2025-06-04 11:23:14離子交換色譜柱
離子交換色譜柱是一種基于離子交換原理進(jìn)行分離純化的色譜柱。它利用固定相中的離子交換樹脂與流動(dòng)相中的離子進(jìn)行可逆交換,根據(jù)離子間的親和力差異實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分離。離子交換色譜柱在化學(xué)分析中廣泛應(yīng)用于水質(zhì)分析、藥物分離、蛋白質(zhì)純化等領(lǐng)域,具有高效、選擇性好、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。

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2023-02-21 16:13:51為什么我們要關(guān)心色譜柱內(nèi)徑?
      相信很多色譜分析員都知道,改變色譜柱內(nèi)徑將對(duì)許多變量產(chǎn)生直接影響,包括峰高、信噪比、平均柱效、樣品載量、對(duì)強(qiáng)注射溶劑的敏感性、壓力、分析物保留次、溶劑用量和/或液體廢物的產(chǎn)生等多方面問題。市面上的液相色譜柱的內(nèi)徑有4.6 毫米、3.0 毫米、2.1 毫米等等多種選擇,那么,為什么會(huì)有這么多內(nèi)徑規(guī)格呢,下面恒譜生帶您了解。一:內(nèi)徑對(duì)柱色譜有什么影響?       在柱色譜法中,樣品物質(zhì)在流動(dòng)相的幫助下穿過柱子。它們根據(jù)與固定相的相互作用進(jìn)行分離,從而產(chǎn)生不同的保留時(shí)間。換句話說,可以根據(jù)流動(dòng)相和固定相之間相互作用的類型以及它們通過色譜柱所需的時(shí)間來分離和檢測(cè)分子。那么,柱徑如何符合方程式的呢?可以想象,更大的直徑使流動(dòng)相更容易通過。相反,較窄的列意味著這樣做需要更長(zhǎng)的時(shí)間??梢岳斫鉃檫@對(duì)敏感性有連鎖反應(yīng),花在色譜柱上的時(shí)間越少意味著靈敏度越低,而時(shí)間越長(zhǎng)則靈敏度越高。因此,較寬的直徑通常會(huì)導(dǎo)致較低的靈敏度,而較窄的直徑則與較高的靈敏度相關(guān)。其實(shí)樣本量也會(huì)有影響,較寬的色譜柱需要更大的樣品和更多的溶劑才能進(jìn)行分析,而窄的色譜柱可以使用較小的樣品和較少的溶劑作為流動(dòng)相。       當(dāng)然,選擇色譜柱并不是只有內(nèi)徑這一種因素,色譜柱的長(zhǎng)度和它們能夠承受的壓力也可能不同。從長(zhǎng)度開始,這可以產(chǎn)生與直徑類似的效果。較短的色譜柱可縮短分析時(shí)間從而降低靈敏度。而較長(zhǎng)的色譜柱會(huì)增加分析時(shí)間并改善結(jié)果。基于以上所述,很顯然長(zhǎng)而窄的色譜柱會(huì)提供更加優(yōu)越的結(jié)果,因?yàn)樗鼤?huì)增加分析時(shí)間、提高靈敏度并且不需要更大的樣品。但是,推動(dòng)流動(dòng)相通過色譜柱需要更大的壓力。色譜柱只能承受一定程度的壓力,而泵需要能夠提供足夠的壓力,因此在選擇時(shí)也需要考慮這一點(diǎn)。在泵的出口和進(jìn)樣閥之間可以安裝在線過濾器,是能夠用來過濾流動(dòng)相中的雜質(zhì)和固體顆粒,保護(hù)液相系統(tǒng)的正常運(yùn)行的一種過濾型色譜耗材。在液相色譜系統(tǒng)中,恒譜生在線過濾器可以很大程度上地減少泵、混合器和管路在流動(dòng)相中輸送過程中所產(chǎn)生的堵塞、損壞儀器等情況出現(xiàn)。二:為什么要使用不同直徑的色譜柱?       有兩個(gè)主要優(yōu)勢(shì):其一是減少流動(dòng)相消耗,其二是減少峰體積。如果將流速調(diào)整為恒定線速度,如HPLC柱徑改變時(shí)保留時(shí)間應(yīng)相同,因此樣品運(yùn)行時(shí)間將保持不變。如果運(yùn)行時(shí)間相同且流速降低,則將使用較少的流動(dòng)相。峰體積(以體積表示的峰寬)隨著色譜柱橫截面積的減小或直徑變化的平方而下降。這轉(zhuǎn)化為成比例的更高的峰,假設(shè)相同質(zhì)量的樣品可以加載到色譜柱上,這可能是正確的,也可能不是正確的。因此,假設(shè)注入相同質(zhì)量的樣品,從 4.6 毫米內(nèi)徑的色譜柱換成 2.1 毫米的色譜柱應(yīng)該會(huì)將峰寬減少五倍,并將峰高增加相同的量。       當(dāng)柱直徑發(fā)生變化時(shí),對(duì)流速進(jìn)行必要的改變以保持恒定的線速度是相當(dāng)簡(jiǎn)單的。減小柱徑有助于節(jié)省溶劑和提高檢測(cè)限。但是對(duì)于較小直徑的色譜柱,可能會(huì)觀察到系統(tǒng)性能的下降。從故障排除的角度來看,很容易將系統(tǒng)性能不佳歸咎于色譜柱本身,而真正的罪魁禍?zhǔn)卓赡苁?LC 系統(tǒng)的柱外體積。對(duì)柱外效應(yīng)的相對(duì)不敏感是填充直徑 5 μm 顆粒的4.6 mm × 150mm 色譜分析柱可能在未來許多年內(nèi)仍然是常規(guī) LC 工作的主力色譜柱的原因之一。       今天恒譜生分享的知識(shí)先到這啦,希望對(duì)您的工作有所幫助!
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2023-01-10 13:36:08青出于藍(lán),更勝一籌 | InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 極性保留色譜柱
你是否正面臨著大量化合物分析的挑戰(zhàn)?你是否想開發(fā)同時(shí)保留極性和非極性化合物的分離方法?你是否在尋找一款色譜柱,在分析物保留和通量之間平衡?全新 Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱橫空出世,反相模式下使用 100% 水性流動(dòng)相大幅提高強(qiáng)極性化合物的保留性能,兼顧通量和保留。Agilent InfinityLab Poroshell 120 系列色譜柱,多年來一直是追求效率的分析工作者的利器。除了推出了粒徑為 1.9 μm 和 4 μm 的填料,安捷倫還不斷增加了 Poroshell 120 固定相類型,進(jìn)一步拓展了應(yīng)用范圍。目前 Poroshell 120 系列用于小分子化合物分離的色譜固定相有 3 種粒徑、20 種固定相(包括本次新品 Poroshell 120 Aq-C18)。InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱能夠:提高極性化合物的保留兼容 100% 水性流動(dòng)相無需擔(dān)心固定相塌陷或去濕問題批次間高重現(xiàn)性可在所有分析型 HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)間擴(kuò)展如果您使用普通 C18 色譜柱,在分析方法開發(fā)/確認(rèn)階段遇到如下問題:化合物保留、分離和峰型有待改善待測(cè)組分極性跨度大高水或者純水條件下化合物保留時(shí)間漂移安捷倫 InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 將是您的理想之選!
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2022-03-08 11:51:31全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市
全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市,助力新型抗體藥物分析近日,沃特世公司隆重推出MaxPeak Premier SEC系列色譜柱。這款色譜柱專為ADC/雙抗分析設(shè)計(jì),只需簡(jiǎn)單的流動(dòng)相,就能同時(shí)分離聚合物和片段。圖1. MaxPeak Premier SEC系列色譜柱MaxPeak Premier SEC采用專 利的Premier柱管,這是沃特世首次將該技術(shù)應(yīng)用于大分子分析的產(chǎn)品線。結(jié)合新型PEO鍵合相填料表面修飾,可大大減少次級(jí)作用,僅需較少的鹽即可得到對(duì)稱峰形。這一特點(diǎn)將使SEC的方法開發(fā)更簡(jiǎn)單,即單一 流動(dòng)相即可滿足不同樣品的分析需求,有利于建立一個(gè)高效的SEC分析平臺(tái)。圖2. 不同流動(dòng)相中蛋白混合標(biāo)準(zhǔn)品分離色譜圖(A: MaxPeak Premier SEC色譜圖;B: 傳統(tǒng)SEC色譜圖)。針對(duì)ADC/雙抗的分子特性,MaxPeak Premier SEC對(duì)填料的孔徑進(jìn)行了優(yōu)化,孔徑分布更加合理,使ADC/雙抗的聚合物及片段分析都有了明顯的改善。圖3. MaxPeak Premier SEC分析ADC/雙抗的對(duì)比色譜圖。
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2021-07-26 08:50:46如何恢復(fù)hplc色譜柱性能?
        大家都知道HPLC色譜柱的壽命是有限的,在使用過程中隨著時(shí)間的推移,其性能開始下降。你可以通過峰形和峰形之間的分離,柱背壓的不規(guī)律增加以及重影峰的出現(xiàn)來判斷HPLC色譜柱的性能出現(xiàn)了下降。色譜柱是昂貴的色譜耗材,平常使用完畢后需要保養(yǎng)。如果色譜柱真的發(fā)生了性能下降,有什么方法可以恢復(fù)呢?        首先,如果色譜柱由于過載或使用不兼容的流動(dòng)相而結(jié)垢,是可以恢復(fù)的,但已經(jīng)損壞的色譜柱或已經(jīng)過使用壽命的色譜柱無法恢復(fù),需要更換。         色譜柱還原程序如下,供大家參考:        反相柱        反相分離是大多數(shù)HPLC分離中使用的主要操作模式。填料主要由C18,C4,CN,NH2和苯基固定相組成。建議以水-乙腈-異丙醇-庚烷-異丙醇-乙腈-流動(dòng)相的順序用10至20倍體積的溶劑洗脫        正相柱(氨基,二醇,硝基,氨基固定相)        用20倍體積的溶劑沖洗,按照庚烷-異丙醇-乙腈-       水-異丙醇-庚烷的順序。        GPC / GFC色譜柱        用5倍體 積且PH值為3的0.1%磷酸鹽緩沖液沖洗。如果使用了保留力強(qiáng)的蛋白質(zhì),則使用從水到乙腈再到水的60分鐘梯度液沖洗。         色譜柱在使用前都要對(duì)其性能進(jìn)行考察,使用期間或放置一段時(shí)間后也要重新檢查,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。柱性能指標(biāo)包括在一定實(shí)驗(yàn)條件下(樣品、流動(dòng)相、流速、溫度)下的柱壓、理論塔板高度和塔板數(shù)、對(duì)稱因子、容量因子和選擇性因子的重復(fù)性,或分離度。進(jìn)行柱效比較時(shí),還要注意柱外效應(yīng)是否有變化。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是zui佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。        恒譜生色譜柱柱管由不銹鋼制成,不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光,減小管壁效應(yīng),提高柱效,柱中填充鍵合硅膠或聚合物填料。色譜柱基于高純硅膠,采用獨(dú)特鍵合技術(shù),具有優(yōu)異的峰形,靈敏性好?;|(zhì)金屬含量低,對(duì)所有類型的分析物均表現(xiàn)完好峰形。機(jī)械強(qiáng)度高,穩(wěn)定性好,質(zhì)控嚴(yán)格,確保色譜柱性能和色譜柱的使用壽命。有多種尺寸規(guī)格可供選擇以適應(yīng)色譜工作者及其使用的不同需求。我們有專業(yè)的技術(shù)工程師團(tuán)隊(duì)為您的需求提供解決方案,歡迎前來咨詢了解! 
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2017-05-18 00:41:54離子交換色譜柱和離子排阻色譜柱分離物質(zhì)原理的區(qū)別
 
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