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2025-01-10 17:02:33動力學(xué)顯色檢測法: 動力學(xué)顯色檢測法是一種基于化學(xué)反應(yīng)速率與顯色程度關(guān)系的分析方法。它利用待測物質(zhì)參與特定化學(xué)反應(yīng)時，反應(yīng)速率與顯色程度隨時間變化的特性進(jìn)行定量或定性分析。該方法廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域，具有靈敏度高、選擇性好及操作簡便的技術(shù)優(yōu)勢。通過動力學(xué)顯色檢測法，可實現(xiàn)痕量物質(zhì)的快速檢測，為化學(xué)分析提供了有力手段。

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首先應(yīng)當(dāng)考慮您所在實驗室當(dāng)前用于分析每種樣品類型的方法或技術(shù)。這里是您可能見到的三個常見實例：

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2022-08-23
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動力學(xué)顯色檢測法問答

2022-12-04 19:40:01高內(nèi)涵應(yīng)用案例——線粒體動力學(xué)檢測和表型分析: 引言新陳代謝是生物體內(nèi)進(jìn)行的化學(xué)變化的總稱，是生物最基本的生命活動過程。細(xì)胞從環(huán)境汲取能量、物質(zhì)，在內(nèi)部進(jìn)行各種化學(xué)變化，維持自身高度復(fù)雜的有序結(jié)構(gòu)，保證生命活動的正常進(jìn)行。作為細(xì)胞的“能量工廠”，線粒體在維持能量穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮重要作用，可以調(diào)控蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、溶質(zhì)和代謝物產(chǎn)物的進(jìn)出，并保護(hù)細(xì)胞質(zhì)免受有害線粒體產(chǎn)物的影響。線粒體通過不斷的分裂和融合，維持線粒體形態(tài)、分布和數(shù)量，維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)，該過程被稱為線粒體動力學(xué)。線粒體自噬是機體清除細(xì)胞內(nèi)功能異常的線粒體的過程，是線粒體質(zhì)量控制的主要機制。線粒體動力學(xué)的病理改變可導(dǎo)致生物能量功能受損和線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞死亡，并與多種病理機制相關(guān)，包括缺血性心肌病，糖尿病，肺動脈高壓，帕金森氏病，亨廷頓氏病，骨骼肌萎縮癥、阿爾茨海默病等。線粒體大小和形狀取決于它們在細(xì)胞內(nèi)的位置以及不同細(xì)胞對能量的需求。當(dāng)線粒體發(fā)生損傷時，它的形態(tài)和完整性會發(fā)生改變，如線粒體的數(shù)量、大小、長度和形狀等。線粒體形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的檢測對于了解線粒體的穩(wěn)態(tài)以及功能狀態(tài)有重要意義。高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)非常適合進(jìn)行線粒體表型和結(jié)構(gòu)的研究。共聚焦成像和水鏡可以提高成像質(zhì)量并更好地顯示線粒體結(jié)構(gòu)，高內(nèi)涵的圖像分析工具可以幫助科研工作者獲得不同表型的數(shù)字特征，線粒體表型和結(jié)構(gòu)重排的分析模塊可用于線粒體動力學(xué)為基礎(chǔ)的細(xì)胞研究。結(jié)果展示使用不同濃度的化合物，包括氯喹（抑制線粒體循環(huán)），魚藤酮（氧化磷酸化抑制劑）和纈氨霉素（鉀離子載體）處理 PC12（人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）。將活細(xì)胞用線粒體染料 MitoTracker Orange 和 Hoechst 進(jìn)行染色，利用 ImageXpress Micro Confocal 系統(tǒng)（Molecular Devices）進(jìn)行成像，使用共聚焦模式和 40X 水鏡拍攝活細(xì)胞的圖像，分辨單個線粒體并檢測線粒體形態(tài)變化。使用 MetaXpress 高內(nèi)涵圖像采集和分析軟件中的 Custom Module Editor（自定義模塊編輯器）分析圖像，使用“Granularity”模塊和“Find Fibers”模塊識別圓形顆粒和細(xì)長的線粒體（圖 1）。圖 1 .線粒體形狀的表型分析。Molecular Devices 高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)適用于各種細(xì)胞模型中化合物的藥物開發(fā)或毒性評估。不同化合物處理會導(dǎo)致線粒體形態(tài)變化，膜電位的損失、以及細(xì)胞的程序性死亡等。MetaXpress 軟件非常適合進(jìn)行線粒體形態(tài)的測定，可以定義每個對象的數(shù)量、面積、強度、長度和形狀（表1，2）。使用具有共聚焦模式的 40X 水鏡對細(xì)胞進(jìn)行成像，MetaXpress 自定義模塊編輯器分析圖像（圖 2）。這些檢測結(jié)果可以計算劑量反應(yīng)和各種化合物的有效濃度，以及用數(shù)字來表征線粒體結(jié)構(gòu)動力學(xué)（圖 3）。圖 2 .化合物對線粒體的作用。使用MitoTracker Orange對線粒體進(jìn)行染色（黃色），對照組（A）、纈霉素（B）、魚藤酮（C）。使用特定濃度的化合物（氯喹，魚藤酮和纈氨霉素）處理 PC12 細(xì)胞，對細(xì)胞進(jìn)行染色和成像。通過圖像分析將線粒體結(jié)構(gòu)確定為“纖維”（頂部）或“顆?！保ㄖ胁浚?，底部為線粒體染色后熒光強度的變化。EC50的值取決于四個濃度依賴性復(fù)本和參數(shù)曲線的擬合（圖 3）。圖 3 .使用氯喹（綠色），魚藤酮（紅色）和纈氨霉素（藍(lán)色）處理 PC12 細(xì)胞。EC50的值取決于四個濃度依賴性復(fù)本和參數(shù)曲線的擬合。在分析過程中，我們比較了水鏡和空氣鏡對圖像質(zhì)量和分析的影響。結(jié)果顯示，使用水鏡可以提高圖像質(zhì)量，并且通常會導(dǎo)致 Z' 值增加（表 3 ）。圖 4 顯示了使用自定義模塊編輯對線粒體表型進(jìn)行計數(shù)和分析，以評估線粒體的健康、代謝、循環(huán)、復(fù)合效應(yīng)和疾病狀態(tài)等。并且，自定義模塊編輯可以針對特定的細(xì)胞類型或疾病模型進(jìn)行進(jìn)一步的調(diào)整和修改。表 1 .用圖 3 所示的曲線定量 EC50。表 2 .不同的對照和化合物處理方法的比較。上面四列數(shù)據(jù)分別是對照，10 um 的氯喹，300 nm 的魚藤酮，和 10 nm 的纈氨酸霉素。表 3 .與空氣鏡相比，水鏡可以提高圖像質(zhì)量，獲得更高的Z’值。圖 4 .自定義模塊編輯器（CME）。總結(jié)Molecular Devices 高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)適用于各種細(xì)胞模型中化合物的藥物開發(fā)或毒性評估。使用高內(nèi)涵成像和高級圖像分析的線粒體動力學(xué)分析方法不僅可以量化線粒體的表型變化，而且這種多參數(shù)方法也可用于研究正常和病理結(jié)構(gòu)變化以表征疾病模型或復(fù)合效應(yīng)。主要特點獲得高質(zhì)量的圖像，更好地顯示線粒體形狀和結(jié)構(gòu)的變化以更有效、更精確的方式量化和測量線粒體的表型變化了解疾病的機制并評估各種細(xì)胞模型中的化合物毒性參考文獻(xiàn)：[1]. Gottlieb RA, Bernstein D. Mitochondrial remodeling: Rearranging, recycling, and reprogramming. Cell Calcium, 2016, 60(2): 88–101.[2]. Yoon Y, Krueger EW , Oswald BJ , et al. The Mitochondrial Protein hFis1 Regulates Mitochondrial Fission in Mammalian Cells through an Interaction with the Dynamin-Like Protein DLP1. Molecular & Cellular Biology, 2003, 23(15):5409-5420.[3]. McLelland GL, Soubannier V, Chen CX, et al. Parkin and PINK1 function in a vesicular trafficking pathway regulating mitochondrial quality control. Embo Journal. 2014, 33(4):282-295.[4]. Twig G, Elorza A, Molina AJ, et al. Fission and selective fusion govern mitochondrial segregation and elimination by autophagy. Embo Journal. 2008, 27:433–446.[5]. Longo DL , Archer SL . Mitochondrial dynamics--mitochondrial fission and fusion in human diseases. New England Journal of Medicine, 2013, 369(23):2236-2251.[6]. Qi X, Disatnik MH, Shen N, et al. Aberrant mitochondrial fission in neurons induced by protein kinase C{delta} under oxidative stress conditions in vivo. Molecular biology of the cell. 2011, 22(2):256–265.[7]. Yu T, Sheu SS, Robotham JL, Yoon Y. Mitochondrial fission mediates high glucose-induced cell death through elevated production of reactive oxygen species. Cardiovascular Research. 2008, 79:341–351.[8]. Ong SB, Subrayan S, Lim SY, et al. Inhibiting Mitochondrial Fission Protects the Heart Against Ischemia/Reperfusion Injury. Circulation, 121(18), 2012-2022.[9]. Suen DF, Norris KL, Youle RJ. Mitochondrial dynamics and apoptosis. Genes Dev. 2008, 22:1577-590.[10]. Konopka AR, Suer MK, Wolff CA, et al. Markers of Human Skeletal Muscle Mitochondrial Biogenesis and Quality Control: Effects of Age and Aerobic Exercise Training. The Journals of Gerontology. 2014, 69(4):371-378.

2023-06-09 18:08:32生物柴油含量檢測-時域核磁法: 為什么要檢測生物柴油含量？生物柴油是一種由植物油、動物油、廢棄物油脂等生物質(zhì)材料經(jīng)過酯化、脫水等化學(xué)反應(yīng)制成的油品，其化學(xué)成分和石油柴油基本相同，但具有更高的氧含量和較低的排放，是一種可再生的清潔能源。通過將柴油與生物柴油混合，可以減少柴油排放，有關(guān)立法已經(jīng)完成，要求在石油柴油與生物柴油混合物中引入最-低水平的生物柴油。因此，有必要制定出標(biāo)準(zhǔn)的試驗方法來測定柴油-生物柴油混合物中的生物柴油含量，以便實施此類立法。生物柴油含量檢測-時域核磁法時域核磁的弛豫行為（弛豫時間、信號幅度、峰面積）和樣品中分子的運動性及質(zhì)子含量有關(guān)。柴油主要由長鏈烷烴組成，生物柴油中含有甲基亞油酸甘油酯等大量的不飽和脂肪酸甘油酯，兩者分子運動性有著明顯差異，信號幅度/峰面積和分子量呈正相關(guān)，利用此特性可區(qū)分柴油、生物柴油并定量混合柴油中生物柴油含量。生物柴油含量與信號幅度關(guān)系曲線時域核磁法檢測生物柴油含量的優(yōu)勢1、雖然樣品需要恒溫處理，但核磁法測量時間短(通常幾十秒)，測試過程簡單；2、儀器操作簡單，簡單需培訓(xùn)即可使用儀器；3、核磁共振技術(shù)是無損檢測技術(shù),可對同一樣品進(jìn)行重復(fù)測量或進(jìn)行其他測量；4、核磁法校準(zhǔn)方便，儀器穩(wěn)定可靠；5、可現(xiàn)場、可在線測量；核磁共振分析儀PQ001-GU

2022-02-09 15:38:29低場核磁共振法用于聚合物的分子動力學(xué)研究-交聯(lián)密度、老化過程: 低場核磁共振法用于聚合物的分子動力學(xué)研究-交聯(lián)密度、老化過程、填充劑在工業(yè)生產(chǎn)過程中和研究型實驗室里需要有一種快速、有效、簡單實用的方法來評價交聯(lián)密度。低場核磁法非常適合在生產(chǎn)領(lǐng)域中對交聯(lián)密度變化點檢測,核磁法簡單易用,可以作為聚合物生產(chǎn)過程中質(zhì)量控制的工具。同時低場核磁對聚合物的分子動力學(xué)非常敏感,可以用于多尺度的分子動力學(xué)研究,為聚合物改性、配方、老化、性能評價提供可靠數(shù)據(jù),是一款科研利器。低場核磁法的主要檢測對象是氫核(1H),由于聚合物中不同鏈段上的H所處的周圍環(huán)境不一致,H的自旋磁矩(核自旋)存在差異。施加射頻脈沖后,自旋系統(tǒng)在恢復(fù)熱平衡狀態(tài)的過程中表現(xiàn)出來的弛豫行為不同,通過弛豫時間的差異可以體系聚合物的分子動力學(xué)信息。而分子分子動力學(xué)信息直接與聚合物的交聯(lián)密度、老化、填充劑相關(guān)。分子內(nèi)和分子間氫質(zhì)子的偶極相互作用產(chǎn)生核磁共振的橫向弛豫。當(dāng)溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于聚合物的玻璃態(tài)溫度時,聚合物網(wǎng)絡(luò)中的這種偶極相互作用被認(rèn)為是熱分子運動的平均。由于聚合物單鏈中的氫質(zhì)子被作為核磁共振測量的探針,于是一種修正的單鏈模型被引入并用來解釋聚合物的橫向弛豫。低場核磁共振法可用于研究:1、活化能的測定;2、天然橡膠交聯(lián)密度測試;3、硫含量對橡膠交聯(lián)的影響;4、促進(jìn)劑種類和用量對橡膠交聯(lián)的影響5、氧化鋅和硬脂酸含量對橡膠交聯(lián)的影響6、橡膠硫化過程中對應(yīng)的磁共振模型參數(shù)的演化7、混煉時間對磁共振模型參數(shù)的影響8、納米黏土含量對橡膠交聯(lián)的影響變溫核磁共振分析儀

2023-06-29 13:48:02熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性及其結(jié)晶動力學(xué): HS-DSC-101差示掃描量熱儀是一種測量參比端與樣品端的熱流差與溫度參數(shù)關(guān)系的熱分析儀器，主要應(yīng)用于測量物質(zhì)加熱或冷卻過程中的各種特征參數(shù)：玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg、氧化誘導(dǎo)期OIT、熔融溫度、結(jié)晶溫度、比熱容及熱焓等.熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性及其結(jié)晶動力學(xué)【1. 東華大學(xué)紡織學(xué)院 2. 東華大學(xué)紡織面料技術(shù)教育部重點實驗室 3. 東華大學(xué)產(chǎn)業(yè)用紡織品教育部工程研究中心周鈴；靳向煜】熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性及其結(jié)晶動力學(xué)熱氣流固結(jié)纖維網(wǎng)串珠結(jié)構(gòu)可控性及其結(jié)晶動力學(xué)上海和晟 HS-DSC-101 差示掃描量熱儀

2024-01-17 16:05:50免疫層析法和膠體金法的區(qū)別: 免疫層析法和膠體金法是兩種常用的生物檢測技術(shù)，它們在原理、應(yīng)用和優(yōu)缺點等方面存在顯著差異。 ①原理區(qū)別：免疫層析法是一種基于抗原-抗體反應(yīng)的生物檢測技術(shù)，利用標(biāo)記有熒光物質(zhì)、酶、膠體金等物質(zhì)的抗體或抗原，檢測樣品中是否存在相應(yīng)的抗原或抗體。當(dāng)樣品中的抗原與標(biāo)記的抗體結(jié)合后，可以通過層析作用將結(jié)合物分離并檢測。而膠體金法則是利用膠體金作為標(biāo)記物，通過免疫學(xué)方法檢測樣品中的生物分子。膠體金是一種由氯金酸水溶液在還原劑作用下形成的金顆粒，這些金顆粒分散在溶液中形成膠體溶液。當(dāng)生物分子與膠體金結(jié)合后，可以通過顯色反應(yīng)判斷是否存在該生物分子。 ②應(yīng)用區(qū)別：免疫層析法主要應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷、食品安全、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。例如，用于檢測尿液、血液、組織液等生物樣品中的病毒、細(xì)菌、蛋白質(zhì)等物質(zhì)。膠體金法則主要應(yīng)用于免疫分析、生物傳感器等領(lǐng)域。由于膠體金法操作簡便、靈敏度高、特異性好等特點，被廣泛應(yīng)用于臨床診斷、生物制品質(zhì)量控制等方面。 ③優(yōu)缺點區(qū)別：免疫層析法和膠體金法在優(yōu)缺點方面也存在差異。免疫層析法的優(yōu)點在于其高特異性、高靈敏度、高重復(fù)性等特點，能夠快速準(zhǔn)確地檢測出樣品中的目標(biāo)物質(zhì)。但是免疫層析法的操作較為繁瑣，需要經(jīng)過多個步驟才能完成檢測，而且成本較高。膠體金法的優(yōu)點在于其操作簡便、快速、無需特殊設(shè)備等特點，能夠在短時間內(nèi)完成大量樣品的檢測。但是膠體金法的缺點在于其靈敏度相對較低，對于低濃度目標(biāo)物質(zhì)的檢測可能會出現(xiàn)假陽性或假陰性的情況。總的來說，免疫層析法和膠體金法各有其優(yōu)缺點，具體應(yīng)用應(yīng)根據(jù)實際情況選擇。在某些情況下，可以將兩種方法結(jié)合使用，以獲得更好的檢測效果。例如，在檢測病毒抗原時，可以先使用免疫層析法進(jìn)行初篩，然后再用膠體金法進(jìn)行確認(rèn)，以提高檢測的準(zhǔn)確性和特異性。總之，免疫層析法和膠體金法是兩種常用的生物檢測技術(shù)，它們在原理、應(yīng)用和優(yōu)缺點等方面存在顯著差異。在實際應(yīng)用中，應(yīng)根據(jù)具體情況選擇合適的方法，以達(dá)到最-佳的檢測效果。同時，隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，相信這兩種方法將會在未來的生物檢測領(lǐng)域發(fā)揮更加重要的作用。蛋白層析純化詳情：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/chromatography-purification義翹神州：蛋白與抗體的專業(yè)引領(lǐng)者，歡迎通過百度搜索“義翹神州”與我們?nèi)〉寐?lián)系。