- 2025-01-10 17:05:48柱層析純化
- 柱層析純化是一種基于不同物質(zhì)在固定相與流動(dòng)相之間分配系數(shù)差異的化學(xué)分離技術(shù)。其基本原理是利用層析柱中的填料對(duì)混合物中各組分進(jìn)行選擇性吸附與洗脫,實(shí)現(xiàn)目標(biāo)化合物的純化。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物制藥、天然產(chǎn)物提取及有機(jī)合成等領(lǐng)域,具有分離效率高、操作簡(jiǎn)便及適用范圍廣等優(yōu)勢(shì),是化學(xué)分離與純化工藝中的重要手段。
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柱層析純化問(wèn)答
- 2023-06-28 17:17:04全自動(dòng)酸蒸清洗/純化一體機(jī)——AC300
- 全自動(dòng)酸蒸清洗/純化一體機(jī)——AC300酸蒸超凈清洗是一種自動(dòng)、密閉、酸蒸汽清洗方法。通過(guò)內(nèi)置可控溫加熱系統(tǒng),利用酸蒸汽安全高效地對(duì)所 有可溶于酸中的任何痕量金屬污染物進(jìn)行超凈清洗,并將其留在液體酸中,絕不會(huì)接觸正在清洗的反應(yīng)容器。功能特點(diǎn):蒸汽單循環(huán)技術(shù)(OWV)——臟酸不回流,不污染凈酸確保洗過(guò)的臟酸直接排出系統(tǒng),而不會(huì)回流進(jìn)酸池造成污染。而傳統(tǒng)技術(shù)的臟酸要回流進(jìn)酸池,然后再次蒸發(fā)出來(lái)去清洗,不斷循環(huán),導(dǎo)致臟酸不斷污染凈酸,從而酸蒸汽也越來(lái)越臟,無(wú)法勝任稍高污染度的清洗。真實(shí)溫度控制技術(shù)(RTC)——確保蒸汽的高純度準(zhǔn)確測(cè)量,是控溫精確的前提。采用RTC真實(shí)溫度控制技術(shù),溫度探頭經(jīng)過(guò)特殊處理,具有與特氟龍一樣的抗酸能力,直接插進(jìn)酸液,監(jiān)控酸液的真實(shí)溫度,從而準(zhǔn)確控制溫度,確保酸蒸汽的純度,杜絕其他品牌只監(jiān)控加熱器溫度而無(wú)法準(zhǔn)確控溫,酸蒸汽純度低的問(wèn)題。PTC半導(dǎo)體加熱器——最安全的加熱器,沒(méi)有之一!最適合長(zhǎng)時(shí)間無(wú)人值守!加熱器具有自我溫度保護(hù)功能,在所有溫控系統(tǒng)都失靈的極端情況下,其 最高溫度也不會(huì)超過(guò)250℃,避免燒毀儀器甚至火災(zāi)。 清洗流程表:AC300讓您的酸循環(huán)起來(lái)!廢酸重復(fù)使用,節(jié)約資金,保護(hù)環(huán)境AC300不但完美勝任酸蒸清洗任務(wù),還具有自我酸純化功能,用戶只需在軟件中勾選酸純化選項(xiàng),甚至不用更換酸瓶,AC300即自動(dòng)抽取廢酸瓶中的廢酸進(jìn)行亞沸蒸餾純化,純化后的酸自動(dòng)收集到純酸瓶,以備下次使用。隨后整個(gè)系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)被超純水潤(rùn)洗和熱空氣干燥,以備下一輪的酸蒸清洗任務(wù)。廢酸純化流程圖:轉(zhuǎn)載自:http://www.hzxpz.com/
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- 2023-06-09 11:39:07經(jīng)典磁珠一文解讀:AMPure XP純化實(shí)用技巧
- 基于SPRI技術(shù)的AMPure XP,采用超順磁磁珠幫助純化核酸片段,被廣泛應(yīng)用到NGS行業(yè),PCR體系、酶切、連接反應(yīng)體系的純化。作為行業(yè)的“金標(biāo)準(zhǔn)“試劑盒,AMPure XP有哪些高頻Q&A問(wèn)題呢?AMPure XP怎么純化長(zhǎng)片段?怎么提高我的樣本得率?產(chǎn)物純度有什么優(yōu)化的方向嗎?我可以選擇純化250 bp的那一條條帶嗎?小貝總結(jié)了10條AMPure XP Q&A問(wèn)題實(shí)用技巧:1、乙醇比例乙醇溶液必須至少70%。當(dāng)將100%乙醇稀釋至70%時(shí),請(qǐng)確保在配置溶液合并之前分別測(cè)量水和乙醇的體積。用水補(bǔ)齊乙醇的稀釋方式會(huì)導(dǎo)致濃度低于預(yù)期。請(qǐng)確保存儲(chǔ)的乙醇在不使用時(shí)保持瓶蓋擰緊。2、充分的混合在最 初磁珠與樣品結(jié)合和洗脫混合期間,徹底的混合至關(guān)重要??捎寐缘陀诳偪左w積的吸頭進(jìn)行混合。洗脫時(shí),需要注意最 小洗脫體積(96孔規(guī)格為40 μL,384孔規(guī)格為15 μL),以確保磁珠充分重懸。還應(yīng)保持足夠的孵育時(shí)間,以確保核酸有足夠的時(shí)間與磁珠結(jié)合或解離。由于樣品的粘度,結(jié)合過(guò)程中的渦旋可能效率不高。3、大反應(yīng)體系大體積反應(yīng)可以采用更長(zhǎng)的樣品&磁珠結(jié)合和磁分離時(shí)間。可將binding結(jié)合時(shí)間增加到10分鐘,并確保在棄上清液之前所有的磁珠均被充分磁分離。4、避免實(shí)驗(yàn)中磁珠損失如果在棄清液的過(guò)程中磁珠被吸入槍頭,結(jié)合在這些磁珠上的核酸則會(huì)在這個(gè)步驟損失掉。首輪移除上清時(shí),緩慢輕柔地操作,盡可能多地移除清液,同時(shí)確保不會(huì)干擾磁珠在磁環(huán)/磁力架上的吸附。如果意外吸出磁珠,請(qǐng)將所有磁珠重新打回孔中,讓磁珠重新磁吸。隨后,再度移除上清,嘗試緩慢吸液或使用更細(xì)的槍頭。小體積樣品更容易受到磁珠損耗的影響,因?yàn)榇胖榭赡苓_(dá)不到孔中磁鐵的水平位置。5、大片段樣品的磁珠干燥10 kb以上的片段與磁珠結(jié)合非常緊密,如果樣品變干則難以洗脫。盡可能完全地棄掉最 后一次乙醇清洗液,立即加入洗脫緩沖液并充分混合。保持蓋子打開(kāi)狀態(tài),乙醇在洗脫孵育期間將繼續(xù)從孔中蒸發(fā)。6、低洗脫體積洗脫體積小會(huì)導(dǎo)致回收率降低。這是因?yàn)闀?huì)有少量洗脫緩沖液始終包覆在磁珠上。該體積取決于孔的形狀和孔中的磁珠量,因此較小的洗脫體積將導(dǎo)致相對(duì)較高比例的洗脫液殘留。7、當(dāng)你用紫外吸收法檢測(cè)回收率不只是PCR雙鏈產(chǎn)物,體系中過(guò)量的引物和核苷酸同樣產(chǎn)生吸收。因此測(cè)量未純化的PCR反應(yīng),可能獲得高于實(shí)際PCR產(chǎn)物濃度的吸光度值。對(duì)比純化前后的吸收值,則會(huì)導(dǎo)致回收率看起來(lái)比實(shí)際低。小貝建議:在瓊脂糖凝膠上運(yùn)行等量的未純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物與純化后的PCR反應(yīng)產(chǎn)物(例如1/4的未純化PCR產(chǎn)物和1/4的洗脫液)以便檢查回收情況,或使用基于特異性熒光染料的測(cè)定,例如PicoGreen。8、引物的殘留AMPure XP試劑與PCR反應(yīng)混合后的試劑最 終濃度決定了PCR產(chǎn)物與磁珠結(jié)合的片段大小。AMPure XP主要結(jié)合> 100 bp的PCR產(chǎn)物,并丟棄小于50個(gè)堿基的引物。較大的引物和引物二聚體可以與磁珠結(jié)合。請(qǐng)確保您的PCR產(chǎn)物在循環(huán)過(guò)程中沒(méi)有蒸發(fā)導(dǎo)致體積變小,并添加正確體積的試劑(見(jiàn)下表)。確保用乙醇沖洗在混合和結(jié)合過(guò)程中樣品有接觸到孔內(nèi)壁的任何地方。如果在純化體系中存在過(guò)量的引物,減少該P(yáng)CR反應(yīng)的引物量也可以是一個(gè)優(yōu)化的方向。9、下游酶反應(yīng)效果不佳如果您的下游酶反應(yīng)對(duì)痕量乙醇極其敏感,請(qǐng)?zhí)砑觾煞昼姷谋J馗稍锊襟E。請(qǐng)注意,大片段會(huì)與磁珠緊密結(jié)合,在磁珠完全干燥后可能難以洗脫。10、如何選擇性保留200-500 bp核酸片段AMPure XP是用于PCR產(chǎn)物純化的試劑盒。對(duì)于片段篩選的應(yīng)用,請(qǐng)考慮使用 SPRIselect試劑盒。有關(guān) SPRIselect 片篩的更多信息,請(qǐng)?jiān)L問(wèn)經(jīng)典磁珠一文解讀:NGS片段篩選比例計(jì)算
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- 2023-05-31 13:01:17【ISCO Webinar】您有公斤級(jí)的樣品需要純化嗎?
- 您有公斤級(jí)的樣品需要純化嗎?加入我們,快速了解如何運(yùn)行我們的RediSep? 7.0 kg Silica和8.6 kg C18柱。困境:幾百克,甚至幾公斤的樣品需求。解決方案:RediSep 大型色譜柱將幫助您實(shí)現(xiàn)目標(biāo)!這些柱子適用于·公斤級(jí)的活性藥物成分(API)的純化·天然產(chǎn)品粗提物的初步純化·生產(chǎn)用于染料的熒光探針標(biāo)記、共軛和側(cè)向?qū)游龅膽?yīng)用·多步合成的初始化合物的純化這場(chǎng) 45 分鐘的網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)由 Teledyne ISCO 應(yīng)用化學(xué)家和色譜專(zhuān)家 Jack Silver 主持,展示了反相和正相分離,加上互動(dòng)問(wèn)答,您將了解到:·如何為大型色譜柱開(kāi)發(fā)方法·如何從小量純化中擴(kuò)大規(guī)?!と绾喂烙?jì)色譜柱的裝填量·如何裝載樣品·如何在非 Teledyne ISCO 制造的系統(tǒng)上使用這些色譜柱無(wú)論是新手還是專(zhuān)家,本次網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)都適合您。想要參加我們的會(huì)議,只需選擇您最方便的時(shí)間。我們到時(shí)見(jiàn)!會(huì)議參與時(shí)間與參與方式請(qǐng)識(shí)別下方二維碼,自行注冊(cè)參加:1.北京時(shí)間6月1日 20:002.北京時(shí)間6月2日 09:00
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- 2023-08-09 13:42:02低至3折 | Clean NGS高通量測(cè)序產(chǎn)物純化及片段篩選磁珠限時(shí)促銷(xiāo)
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- 2022-11-23 13:24:00國(guó)粹的傳承與創(chuàng)新 | 賽默飛全新中藥分離純化解決方案
- 國(guó)粹的傳承與創(chuàng)新中醫(yī)藥是中華文明的傳統(tǒng)瑰寶,凝聚著中華民族的博大智慧,也是創(chuàng)新藥物研究的重要源泉。1971年,屠呦呦團(tuán)隊(duì)在極其艱苦的條件下從青蒿中成功發(fā)現(xiàn)了青蒿素,在過(guò)去50多年時(shí)間里拯救了全 球數(shù)以百萬(wàn)的生命,得到了世界的廣泛認(rèn)可和贊譽(yù),于2015年獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。在近十年的時(shí)間里,中藥有效成分的分離純化技術(shù)也得到了長(zhǎng)足的發(fā)展,賽默飛全新推出的中藥分離純化解決方案,利用高效液相色譜技術(shù)結(jié)合先進(jìn)的餾分收集器,可以有效助力科研工作者快速發(fā)現(xiàn)和分離復(fù)雜中藥基質(zhì)中微量的化學(xué)成分,為后續(xù)的結(jié)構(gòu)鑒定,藥理毒理研究提供可靠的技術(shù)支持。以益母草為例,作為一種傳統(tǒng)的中藥材,其內(nèi)含豐富的化學(xué)成分,具有多種藥理作用。益母草中的己糖二酸是一種無(wú)毒的葡萄糖衍生物,有助于降低膽固醇和調(diào)控人體內(nèi)的激素水平,但己糖二酸類(lèi)成分極性較強(qiáng)且結(jié)構(gòu)與性質(zhì)相近,加之含量較低且穩(wěn)定性較差,采用傳統(tǒng)的分離純化流程難度很大,但借助賽默飛全新推出的Vanquish?餾分收集系統(tǒng),以上問(wèn)題都可以迎刃而解。Vanquish集成餾分收集器亮點(diǎn)01 系統(tǒng)設(shè)計(jì)人性化Vanquish?集成式餾分收集器的靈活擺搭組合方式為用戶提供卓 越的體驗(yàn)Vanquish?集成的餾分收集器(Vanquish Integral Fraction Collector, VFC)模塊化的設(shè)計(jì)更加靈活,可以與液相系統(tǒng)整合到一起,使流路的連接盡可能的短,結(jié)合不同流量?jī)?yōu)化不同延遲體積管路,這種設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是可以最 大程度減小延遲體積、降低峰擴(kuò)散以及降低餾分重疊的風(fēng)險(xiǎn),提高低含量組分收集的準(zhǔn)確性;同時(shí)該模塊還標(biāo)配了先進(jìn)的循環(huán)風(fēng)冷控溫技術(shù),可以最 大限度提高餾分收集過(guò)程中暫存在樣品盤(pán)中的餾分的穩(wěn)定性。02 軟件控制智能化結(jié)合 Chromeleon變色龍軟件全自動(dòng)方法向?qū)Ш屠每諝馓结槳?dú) 創(chuàng)的延遲體積測(cè)定技術(shù),不需要額外輔助工具以及試劑可自動(dòng)感知系統(tǒng)延遲體積。系統(tǒng)自帶的向?qū)Э蓞f(xié)助操作精確控制餾分收集器切閥時(shí)間,最 大限度提高收集精度和樣品純度。模擬餾分收集工具及可視化收集過(guò)程可以幫助客戶靈活改進(jìn)收集策略。03 觸發(fā)模式多樣化紫外檢測(cè)器——峰觸發(fā)的益母草提取液餾分收集示意圖用戶可根據(jù)實(shí)際應(yīng)用及分離情況,針對(duì)性地選擇時(shí)間或峰值觸發(fā)餾分收集,提高分餾效率。同時(shí),通過(guò)累積收集或者重組收集等特殊模式,可以達(dá)到目標(biāo)餾分量的積累或者化繁為簡(jiǎn)的目的。針對(duì)中藥樣品化合物紫外吸收差異問(wèn)題,可以使用紫外(UV或DAD)、電霧式檢測(cè)器(CAD)等不同檢測(cè)器信號(hào)觸發(fā),滿足客戶多樣化需求。04 分餾結(jié)果“理想化”VFC采用的創(chuàng)新流路設(shè)計(jì)最 大程度降低了殘留風(fēng)險(xiǎn),VFC 具有的多種沖洗、清洗功能,可減少交叉污染,提高分餾純度。餾分收集的重復(fù)性良好,回收率高。對(duì)餾分累積收集、濃縮以后,通過(guò)紫外光譜、核磁共振波譜及質(zhì)譜等手段,可以對(duì)目標(biāo)組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。本文總結(jié)精確的餾分收集是客戶在整個(gè)工作流程中取得成功的基礎(chǔ)。使用Vanquish分離純化液相色譜系統(tǒng)對(duì)益母草提取液目標(biāo)組分進(jìn)行純化餾分收集,重復(fù)性好,收集效率高,收集殘留率低。說(shuō)明Vanquish集成式餾分收集器方便開(kāi)展分析級(jí)別的餾分收集,提高收集效率并降低殘留,非常適合分析級(jí)別的純化與分離的應(yīng)用,能夠滿足科研以及企業(yè)客戶的需求。
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