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2025-02-28 19:13:06血管超聲儀: 血管超聲儀是一種利用超聲波技術(shù)檢測(cè)血管結(jié)構(gòu)和功能的醫(yī)療設(shè)備。它能實(shí)時(shí)顯示血管內(nèi)壁、血流速度及方向等信息，對(duì)動(dòng)脈硬化、斑塊形成、血管狹窄或閉塞等病變具有較高的診斷價(jià)值。該設(shè)備操作簡(jiǎn)便，無創(chuàng)無痛，廣泛應(yīng)用于臨床心血管疾病的篩查與診斷。通過血管超聲儀的檢查，醫(yī)生可及時(shí)評(píng)估患者血管健康狀況，為治療方案的制定提供重要依據(jù)。

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中國科學(xué)院上海高等研究院橢圓偏振波蕩器項(xiàng)目A永磁鐵招標(biāo)項(xiàng)目的潛在投標(biāo)人應(yīng)在上海市靜安區(qū)恒豐路600號(hào)機(jī)電大廈5樓C座辦公室獲取招標(biāo)文件，并于2025年03月17日 09點(diǎn)30分（北京時(shí)間）前遞交投標(biāo)

儀器賞析家 129
2025-02-25
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血管超聲儀問答

2023-03-03 16:36:05熒光成像在血管神經(jīng)外科手術(shù)中的優(yōu)勢(shì): 熒光素和ICG熒光血管造影改變了血管神經(jīng)外科醫(yī)生的手術(shù)方式，它提供具有豐富信息的術(shù)中視圖。2021神經(jīng)可視化峰會(huì)是一個(gè)匯集quan球神經(jīng)外科醫(yī)生的特別活動(dòng)，在此期間，A教授在一次家du網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)上分享了他在熒光引導(dǎo)下的神經(jīng)外科手術(shù)經(jīng)驗(yàn)，介紹了幾個(gè)臨床案例。學(xué)習(xí)要點(diǎn)了解熒光素鈉和ICG的歷史以及它們?cè)谘苌窠?jīng)外科的首次應(yīng)用探討熒光技術(shù)在神經(jīng)外科的優(yōu)勢(shì)，及其如何為神經(jīng)外科醫(yī)生提供有價(jià)值的信息觀看熒光引導(dǎo)下的神經(jīng)外科手術(shù)視頻，包括動(dòng)靜脈畸形（AVM）、搭橋和動(dòng)脈瘤手術(shù)的臨床案例熒光成像在神經(jīng)外科的應(yīng)用：熒光素鈉和ICG的歷史及其首次應(yīng)用熒光素鈉自20世紀(jì)60年代末以來一直用于神經(jīng)外科，最初由醫(yī)生對(duì)其進(jìn)行了描述，醫(yī)生在開顱時(shí)進(jìn)行了硬膜外血管造影術(shù)。吲哚菁綠（ICG）在很久以后才被應(yīng)用于評(píng)估腦血流。它是由醫(yī)生在21世紀(jì)初引入的，并決定將這種廣泛應(yīng)用于眼科的技術(shù)轉(zhuǎn)移到神經(jīng)外科。ICGzui早用于神經(jīng)外科評(píng)估動(dòng)脈瘤，并逐步應(yīng)用于幾種神經(jīng)外科病癥：評(píng)估旁路通透性、AVM手術(shù)、評(píng)估海綿狀血管瘤手術(shù)和神經(jīng)腫瘤學(xué)中靜脈引流異常。目前，腦熒光血管造影使用ICG的情況更為普遍。熒光造影引導(dǎo)下的神經(jīng)外科：熒光素鈉與ICG的優(yōu)缺點(diǎn)熒光素鈉視頻血管造影有一些優(yōu)勢(shì)，包括成本較低，精細(xì)細(xì)節(jié)的可視化，以及可以直接在顯微鏡下通過熒光過濾器進(jìn)行觀察。ICG需要單獨(dú)的紅外攝像機(jī)，可以將信息顯示在不同的屏幕上。熒光素?zé)晒庖矠闊o牽開器手術(shù)提供了有用的價(jià)值，這與手術(shù)創(chuàng)傷的降低密切相關(guān)。熒光素鈉的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是作為一種相對(duì)惰性的染料，急性毒性研究顯示盡管會(huì)誘發(fā)一些嚴(yán)重的過敏反應(yīng)，但它對(duì)人類沒有特殊危害。此外，成本也非常低。熒光素鈉的缺點(diǎn)：它在血液中至少停留一小時(shí)，需要長(zhǎng)時(shí)間等待后才能重復(fù)使用。ICG的半衰期為3至4分鐘，因此可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行第二次或第三次注射。但在某些病人群體中，如對(duì)碘過敏的病人或甲狀腺功能亢進(jìn)的病人，它是禁用的。而且它價(jià)格昂貴。熒光造影在動(dòng)靜脈畸形（AVM）手術(shù)中的應(yīng)用在一名患有左額葉動(dòng)靜脈畸形的患者中，選擇了對(duì)側(cè)入路，以避免優(yōu)勢(shì)半球，并更好地控制進(jìn)料器。使用FL560術(shù)中熒光素?zé)晒饽K，可通過顯微鏡在手術(shù)野內(nèi)精確地顯示時(shí)間、給藥器、靜脈和AVM周圍的短血管，并具有清晰的對(duì)比度。但在使用ICG時(shí)，用戶必須查看另一個(gè)屏幕，而且無法看到AVM的周圍環(huán)境。必須通過從顯示器轉(zhuǎn)移到手術(shù)野來進(jìn)行解釋。熒光素?zé)晒飧菀自谑中g(shù)野中直接識(shí)別供血血管，并將實(shí)質(zhì)圖像更好地可視化。圖1：用FL560熒光素?zé)晒饽K觀察AVM與用ICG觀察AVM。圖片由A教授提供。熒光造影在搭橋手術(shù)中的應(yīng)用在一例煙霧病患者中，施行了顳淺動(dòng)脈-大腦中動(dòng)脈搭橋術(shù)(STA-MCA)。熒光素鈉熒光對(duì)探索和檢查STA以及在手術(shù)野直接看到動(dòng)脈的功能非常有用。這是了解搭橋手術(shù)工作方式的一種非常有效的技術(shù)。它提供了良好的血管和組織灌注的可視化，盡管厚壁血管不太明顯。圖2：在搭橋手術(shù)中使用FL560熒光素?zé)晒饽K。圖片由A教授提供。熒光造影在動(dòng)脈瘤手術(shù)中的應(yīng)用在一名患有中動(dòng)脈小動(dòng)脈瘤的患者中，使用熒光素?zé)晒庵С謯A閉。造影劑有助于暴露動(dòng)脈瘤，并在手術(shù)野中直接觀察到穿支及其灌注情況。使用ICG可能會(huì)忽略這一點(diǎn)，因?yàn)樗枰榭戳硪粋€(gè)屏幕，且呈現(xiàn)的是黑白圖像。在熒光素?zé)晒庀拢]塞的動(dòng)脈瘤清晰可見。但由于動(dòng)脈瘤手術(shù)往往很快，而且厚壁血管也不太明顯，所以無法進(jìn)行重復(fù)使用。熒光素鈉可與ICG結(jié)合使用，兩者并不相互排斥。圖注：利用FL560熒光素?zé)晒饽K進(jìn)行動(dòng)脈瘤夾閉。圖片由A教授提供。綜上所述，熒光素視頻血管造影具有手術(shù)野三維可視化的優(yōu)勢(shì)，可以實(shí)時(shí)進(jìn)行手術(shù)操作，尤其是對(duì)狹窄視野內(nèi)的小血管。此外，它的成本更低。熒光素血管造影的缺點(diǎn)是無法觀察到厚壁血管中的血流，而且染料在血液中停留的時(shí)間較長(zhǎng)。ICG血管造影技術(shù)和熒光素血管造影技術(shù)為神經(jīng)外科醫(yī)生提供了重要優(yōu)勢(shì)。

2022-06-23 14:13:21ibidi科普知識(shí)系列|血管生成實(shí)驗(yàn)小常識(shí): 　　1、哪種細(xì)胞密度最適合我的實(shí)驗(yàn)？　　　　通常，我們建議每孔使用5,000-10,000個(gè)HUVEC。但是，確定最佳細(xì)胞數(shù)對(duì)于使用μ-Slide血管生成從管形成測(cè)定中獲得最佳結(jié)果是至關(guān)重要。細(xì)胞密度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞大小。因此，在開始實(shí)際實(shí)驗(yàn)之前，我們建議在非抑制條件下播種幾個(gè)細(xì)胞數(shù)并對(duì)管形成進(jìn)行成像。然后，對(duì)于最佳測(cè)定條件，使用在您的實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生最多管數(shù)的細(xì)胞密度。請(qǐng)記住，細(xì)胞通常不會(huì)在凝膠基質(zhì)上增殖。請(qǐng)參閱：血管生成實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)裝置優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析 |ibidi μ-Slide　　　　2、應(yīng)該在哪個(gè)時(shí)間段內(nèi)觀察細(xì)胞？　　　　管形成的持續(xù)時(shí)間取決于細(xì)胞類型和所使用的細(xì)胞外基質(zhì)，應(yīng)單獨(dú)確定。通常，HUVEC在 2-4小時(shí)后已經(jīng)形成管。24小時(shí)后細(xì)胞開始發(fā)生凋亡，這導(dǎo)致從基質(zhì)中脫離和管破裂。請(qǐng)參閱：血管生成實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)裝置優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析 |ibidi μ-Slide　　　　3、是否需要活細(xì)胞成像裝置來每小時(shí)拍攝管形成測(cè)定的照片？　　　　非必須，通過顯微鏡對(duì) μ-Slide 血管生成上的同一位置進(jìn)行一致和精確的成像。可以使用顯示 x/y 坐標(biāo)的顯微鏡載物臺(tái)或自動(dòng)載物臺(tái)來完成成像。使用自動(dòng)化平臺(tái)，可以將孔的所有位置（特別是每個(gè)孔的中心）保存到位置列表中，您可以在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)訪問相應(yīng)的位置。　　　　但是，使用完整的活細(xì)胞成像設(shè)置在顯微鏡上建立生理?xiàng)l件要方便得多。使用ibidi Stage Top 孵育系統(tǒng)等活細(xì)胞孵育裝置有助于在成像過程中提供穩(wěn)定溫度和濕度條件，從而在體外可以直接進(jìn)行視頻拍攝?！　　　?、是否可以使用 μ-Slide 血管生成在凝膠基質(zhì)內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞？　　　　可以，μ-Slide 血管生成非常適合在精確定義的3D基質(zhì)中培養(yǎng)細(xì)胞。由于大界面的凝膠和頂部細(xì)胞培養(yǎng)基，凝膠中的條件可以通過更換上部?jī)?chǔ)液器中的介質(zhì)來調(diào)整?！　　　?、應(yīng)該在管形成實(shí)驗(yàn)中使用含酚紅的凝膠還是不含酚紅的凝膠？　　　　對(duì)于使用μ-Slide血管生成的管形成測(cè)定中的相差顯微鏡，酚紅不會(huì)干擾圖片，并且由于其顏色，處理更容易。然而，當(dāng)使用熒光顯微鏡時(shí)，酚紅可能會(huì)干擾探頭的波長(zhǎng)。在這種情況下，應(yīng)該使用無酚紅凝膠?！　　　?、是否需要將μ-Slide Angiogenesis血管生成載玻片放入培養(yǎng)箱的濕室中進(jìn)行凝膠聚合？　　我們建議將μ-Slide血管生成載玻片放入加濕腔中進(jìn)行凝膠聚合。雖然反應(yīng)室對(duì)于聚合本身不是必需的，但它可以最大限度地減少蒸發(fā)的影響。在高流量孵化器中，防止蒸發(fā)的足夠百分比的濕度可能不會(huì)始終保持一致。 μ-Slide血管生成中的少量凝膠會(huì)很快變干，這會(huì)導(dǎo)致彎液面的形成?！　　　?、胎牛血清 (FBS) / 胎牛血清 (FCS) 濃度是否會(huì)影響管形成實(shí)驗(yàn)中的管形成和降解速率？　　　　一般是的。這取決于所使用的細(xì)胞類型或細(xì)胞系。當(dāng)提供濃度高達(dá) 10% FCS 的細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)，我們?cè)?μ-Slide 血管生成中觀察到典型的原代細(xì)胞 (HUVEC) 管形成和 Matrigel? 上的幾種內(nèi)皮細(xì)胞系。但是，我們建議分別優(yōu)化每個(gè)細(xì)胞系的 FBS/FCS 濃度?！　　　?、您是否推薦使用減少生長(zhǎng)因子的 Matrigel? 進(jìn)行管形成分析？　　對(duì)于使用μ-Slide血管生成的管形成測(cè)定，我們使用了減少生長(zhǎng)因子的 Matrigel? 和未減少的 Matrigel?。請(qǐng)參閱：腫瘤學(xué)必備 | 血管生成實(shí)驗(yàn)介紹　　　　9、我們希望使用減少了生長(zhǎng)因子的 Matrigel? 和無血清培養(yǎng)基以及 50 ng/ml VEGF。這足以刺激管的形成嗎？　　　　可以，這種組合足以刺激ibidi血管生成實(shí)驗(yàn)室器皿中的管形成，而培養(yǎng)基中沒有任何額外的生長(zhǎng)因子?！　　　?0、除了 Matrigel? 之外，您在試管形成實(shí)驗(yàn)中是否有使用其他凝膠的經(jīng)驗(yàn)？　　　　原則上，任何凝膠都可用于μ-Slide血管生成管形成實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞可以附著在表面上是很重要的。膠原蛋白、纖連蛋白和層粘連蛋白為細(xì)胞粘附提供了重要的結(jié)合基序?！　　　?1、什么是管形成實(shí)驗(yàn)合適的陽性和陰性對(duì)照？　　　　建議使用陽性和陰性對(duì)照來減少管形成實(shí)驗(yàn)中的變量。陽性對(duì)照是預(yù)期細(xì)胞在其中形成血管的樣本（取決于實(shí)驗(yàn)設(shè)置），從而向研究人員表明該實(shí)驗(yàn)已正確進(jìn)行。陰性對(duì)照是與所有其他樣品以相同方式處理的樣品，但預(yù)計(jì)不會(huì)顯示任何實(shí)驗(yàn)結(jié)果（例如，很少或沒有管形成）?！　　　bidi血管生成實(shí)驗(yàn)室器皿中管形成實(shí)驗(yàn)的最佳陽性和陰性對(duì)照很大程度上取決于所使用的細(xì)胞、凝膠基質(zhì)和一般實(shí)驗(yàn)設(shè)置。因此，我們建議您查閱文獻(xiàn)，了解您感興趣的主題中成功使用的對(duì)照（陽性和陰性對(duì)照）?！　　　≡谙挛闹?，您可以找到管形成測(cè)定中陽性和陰性對(duì)照的可能方法：　　　　如果需要分析特定化合物誘導(dǎo)血管生成的效力，則可以使用用已知血管生成誘導(dǎo)劑（例如 VEGF 或 FGF2）處理的樣品作為陽性對(duì)照。濃度很大程度上取決于細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)設(shè)置?！　　　∪绻褂迷?xì)胞，預(yù)篩選的內(nèi)皮細(xì)胞系（例如，HUVEC）在用特定生長(zhǎng)因子處理后表現(xiàn)出明確的反應(yīng)，可以作為陽性對(duì)照。　　　　對(duì)于某些細(xì)胞類型，形成管的能力還取決于所使用的凝膠基質(zhì)。作為陽性對(duì)照，內(nèi)皮細(xì)胞應(yīng)在含有饑餓培養(yǎng)基（不含生長(zhǎng)因子或血清的培養(yǎng)基）的生長(zhǎng)因子減少的 Matrigel?上顯示管形成。如果需要測(cè)試促血管生成物質(zhì)，則使用饑餓培養(yǎng)基尤其重要，因?yàn)榇蠖鄶?shù)細(xì)胞培養(yǎng)基都添加了生長(zhǎng)因子。為了分析物質(zhì)的真實(shí)效果，基質(zhì)和培養(yǎng)基都必須不含任何生長(zhǎng)因子。作為陰性對(duì)照，細(xì)胞可以播種在不同的基質(zhì)（例如膠原蛋白 I）上，預(yù)計(jì)不會(huì)形成管狀?！　　　〔挥绊懠?xì)胞活力的管形成抑制劑（例如，蘇拉明或蘿卜硫素）可用作陰性對(duì)照。如果實(shí)驗(yàn)的目的是測(cè)試抗血管生成物質(zhì)，則使用這種類型的抑制劑尤其重要。　　　　如果用任何溶解的物質(zhì)（例如，在 DMSO 或乙醇中）處理細(xì)胞，則僅使用溶劑作為陰性對(duì)照?！　　　?2、是否有用于分析管形成實(shí)驗(yàn)的推薦染色方案？　　一般來說，相差顯微鏡足以自動(dòng)分析 μ-Slide血管生成中的標(biāo)準(zhǔn)管形成實(shí)驗(yàn)。但是，如果您想研究某種標(biāo)記，您可以應(yīng)用您的標(biāo)準(zhǔn)方案（例如，用于免疫熒光染色），但要小心，以免損壞凝膠基質(zhì)或細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)?！　　　∈褂胏alcein的染色方案示例可參閱：腫瘤學(xué)必備 | 血管生成實(shí)驗(yàn)介紹　　　　13、在開始實(shí)驗(yàn)之前，我是否必須將 ibidi 血管生成實(shí)驗(yàn)室器皿平衡到 37°C？　　　　不，不需要平衡 μ-Slide 血管生成。在室溫下儲(chǔ)存，可以立即用凝膠基質(zhì)填充。由于μ-Slide 的開孔形式，加熱時(shí)從凝膠中逸出的氣體可以與大氣自由交換?！　　　?4、完成實(shí)驗(yàn)后，μ-Slide Angiogenesis和μ-Plate Angiogenesis 96 Well可以重復(fù)使用嗎？　　　　不可以，μ-Slide血管生成載玻片和μ-Plate血管生成96孔板是一次性耗材，僅供一次性使用?！　　　?5、μ-Slide 血管生成是否有96孔版的？　　有。 μ-Plate血管生成96孔板具有與μ-Slide血管生成相同的“孔中孔”設(shè)計(jì)和凝膠體積 (10 μl)。 μ-Plate血管生成96孔可用作高通量管形成實(shí)驗(yàn)的篩選板，具有完全的ANSI/SLAS (SBS) 和robotics兼容性。

2022-11-03 10:04:33LS18平鋪光片顯微鏡成像案例—脂肪組織神經(jīng)和血管的3D重構(gòu): 脂肪組織在機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)調(diào)控和體溫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要的作用。脂肪組織由不同類型的脂肪細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞前體、免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管和神經(jīng)投射物組成。目前分析脂肪組織的免疫組織化學(xué)和免疫熒光方法主要是基于對(duì)具有相對(duì)高倍率成像的薄切片。然而，這種方法存在著明顯的局限性。首先，復(fù)雜的絲狀結(jié)構(gòu)，如交感神經(jīng)和脈管系統(tǒng)，已知在脂肪功能中起著重要的作用，薄切片僅捕獲一小部分組織，這可能導(dǎo)致結(jié)論因分析的組織部分不同而產(chǎn)生差異，很難通過薄切片進(jìn)行評(píng)估。其次，由于脂肪組織獨(dú)特的無定形形態(tài)特征，很難僅根據(jù)切片染色來評(píng)估脂肪組織的三維結(jié)構(gòu)。鑒于這些因素，非常需要一種可提供整個(gè)脂肪組織的三維可視化并且保持高分辨率的方法。锘海生命科學(xué)自主研發(fā)的平鋪光片顯微鏡具有三維成像速度快、對(duì)比度高、低光毒性、低光漂白等諸多優(yōu)點(diǎn)。此外，依托于顯微鏡測(cè)樣服務(wù)工作積累的豐富的組織透明化、組織免疫熒光染色及成像經(jīng)驗(yàn)，锘海生命科學(xué)自主研發(fā)出了快速高效的锘海組織透明化試劑盒，大大提高樣本組織透明化的效率，為廣大科研工作者提供一套更為專業(yè)、完整的服務(wù)解決方案！我們使用TH對(duì)脂肪組織的神經(jīng)進(jìn)行標(biāo)記，如下圖1、2所示，為小鼠附睪脂肪神經(jīng)成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x2.5 mm，成像分辨率為橫向4 μm，縱向10 μm，成像時(shí)長(zhǎng)僅4分鐘。圖1 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像圖2 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像（局部圖）我們使用SM22對(duì)脂肪組織的大血管進(jìn)行標(biāo)記，如下圖3、4所示，為小鼠附睪脂肪組織大血管成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x4.0 mm，成像分辨率為橫向2 μm，縱向10 μm，成像時(shí)長(zhǎng)僅10分鐘。圖3 小鼠附睪脂肪組織大血管成像圖4 小鼠附睪脂肪組織大血管成像（局部圖）參考文獻(xiàn)：[1] Chi J, Crane A, Wu Z, Cohen P. Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue. J Vis Exp. 2018 Jul 28;(137):58271. doi: 10.3791/58271. PMID: 30102289; PMCID: PMC6126572.[2] Wang P, Loh KH, Wu M, Morgan DA, Schneeberger M, Yu X, Chi J, Kosse C, Kim D, Rahmouni K, Cohen P, Friedman J. A leptin-BDNF pathway regulating sympathetic innervation of adipose tissue. Nature. 2020 Jul;583(7818):839-844. doi: 10.1038/s41586-020-2527-y. Epub 2020 Jul 22. PMID: 32699414.

2022-02-24 09:44:46牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒使用說明書: 本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒使用說明書【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒試劑盒名稱】牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒試劑盒用途】定量牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管緊張素II(AngII)的含量【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒檢測(cè)原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被血管緊張素II(AngII)透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中血管緊張素II(AngII)濃度呈正相關(guān)，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中血管緊張素II(AngII)含量?！九Ｑ芫o張素II(AngII)ELISA試劑盒試劑盒組成】1酶標(biāo)包被板12孔×8條7底物夜A6mL2標(biāo)準(zhǔn)品：200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍濃縮洗滌液20mL9終止液6mL4標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6mL10說明書1份5樣本稀釋液6mL11封板膜1張6酶標(biāo)試劑6mL12密封袋1個(gè)備注：標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀精密移液器及一次性吸頭蒸餾水一次性試管吸水紙【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒操作步驟】1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對(duì)照孔不加。4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板）。6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加。7、溫育：重復(fù)4的操作。8、洗板：重復(fù)5的操作。9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11、測(cè)定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值（OD值）。12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。最終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)?！九Ｑ芫o張素II(AngII)ELISA試劑盒樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒?！九Ｑ芫o張素II(AngII)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)】1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果（0.1-200ng/ml范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本最終濃度。6、若顯色過淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。9、底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下?！九Ｑ芫o張素II(AngII)ELISA試劑盒操作程序總結(jié)】