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2025-01-10 17:02:33多肽 純化分離提取填料
多肽純化分離提取填料是用于多肽化合物分離純化的關鍵材料。這些填料通常具有特定的表面性質、孔徑和化學官能團,能夠選擇性地吸附和分離多肽。常見的填料包括反相填料、離子交換填料、疏水相互作用填料等。它們能夠高效、高分辨率地分離多肽,廣泛應用于生物醫(yī)藥、蛋白質組學等領域。選擇合適的填料對于實現(xiàn)多肽的準確分離和純化至關重要。

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2022-11-23 13:24:00國粹的傳承與創(chuàng)新 | 賽默飛全新中藥分離純化解決方案
國粹的傳承與創(chuàng)新中醫(yī)藥是中華文明的傳統(tǒng)瑰寶,凝聚著中華民族的博大智慧,也是創(chuàng)新藥物研究的重要源泉。1971年,屠呦呦團隊在極其艱苦的條件下從青蒿中成功發(fā)現(xiàn)了青蒿素,在過去50多年時間里拯救了全 球數(shù)以百萬的生命,得到了世界的廣泛認可和贊譽,于2015年獲得諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。在近十年的時間里,中藥有效成分的分離純化技術也得到了長足的發(fā)展,賽默飛全新推出的中藥分離純化解決方案,利用高效液相色譜技術結合先進的餾分收集器,可以有效助力科研工作者快速發(fā)現(xiàn)和分離復雜中藥基質中微量的化學成分,為后續(xù)的結構鑒定,藥理毒理研究提供可靠的技術支持。以益母草為例,作為一種傳統(tǒng)的中藥材,其內含豐富的化學成分,具有多種藥理作用。益母草中的己糖二酸是一種無毒的葡萄糖衍生物,有助于降低膽固醇和調控人體內的激素水平,但己糖二酸類成分極性較強且結構與性質相近,加之含量較低且穩(wěn)定性較差,采用傳統(tǒng)的分離純化流程難度很大,但借助賽默飛全新推出的Vanquish?餾分收集系統(tǒng),以上問題都可以迎刃而解。Vanquish集成餾分收集器亮點01 系統(tǒng)設計人性化Vanquish?集成式餾分收集器的靈活擺搭組合方式為用戶提供卓 越的體驗Vanquish?集成的餾分收集器(Vanquish Integral Fraction Collector, VFC)模塊化的設計更加靈活,可以與液相系統(tǒng)整合到一起,使流路的連接盡可能的短,結合不同流量優(yōu)化不同延遲體積管路,這種設計的優(yōu)點是可以最 大程度減小延遲體積、降低峰擴散以及降低餾分重疊的風險,提高低含量組分收集的準確性;同時該模塊還標配了先進的循環(huán)風冷控溫技術,可以最 大限度提高餾分收集過程中暫存在樣品盤中的餾分的穩(wěn)定性。02 軟件控制智能化結合 Chromeleon變色龍軟件全自動方法向導和利用空氣探針獨 創(chuàng)的延遲體積測定技術,不需要額外輔助工具以及試劑可自動感知系統(tǒng)延遲體積。系統(tǒng)自帶的向導可協(xié)助操作精確控制餾分收集器切閥時間,最 大限度提高收集精度和樣品純度。模擬餾分收集工具及可視化收集過程可以幫助客戶靈活改進收集策略。03 觸發(fā)模式多樣化紫外檢測器——峰觸發(fā)的益母草提取液餾分收集示意圖用戶可根據(jù)實際應用及分離情況,針對性地選擇時間或峰值觸發(fā)餾分收集,提高分餾效率。同時,通過累積收集或者重組收集等特殊模式,可以達到目標餾分量的積累或者化繁為簡的目的。針對中藥樣品化合物紫外吸收差異問題,可以使用紫外(UV或DAD)、電霧式檢測器(CAD)等不同檢測器信號觸發(fā),滿足客戶多樣化需求。04 分餾結果“理想化”VFC采用的創(chuàng)新流路設計最 大程度降低了殘留風險,VFC 具有的多種沖洗、清洗功能,可減少交叉污染,提高分餾純度。餾分收集的重復性良好,回收率高。對餾分累積收集、濃縮以后,通過紫外光譜、核磁共振波譜及質譜等手段,可以對目標組分進行結構鑒定。本文總結精確的餾分收集是客戶在整個工作流程中取得成功的基礎。使用Vanquish分離純化液相色譜系統(tǒng)對益母草提取液目標組分進行純化餾分收集,重復性好,收集效率高,收集殘留率低。說明Vanquish集成式餾分收集器方便開展分析級別的餾分收集,提高收集效率并降低殘留,非常適合分析級別的純化與分離的應用,能夠滿足科研以及企業(yè)客戶的需求。
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2025-01-16 17:45:11核酸檢測提取儀的參數(shù)有哪些重點?
核酸檢測提取儀的參數(shù):影響性能與選擇的關鍵因素 在現(xiàn)代生物醫(yī)學研究和臨床診斷領域,核酸檢測提取儀作為一個至關重要的設備,廣泛應用于疾病篩查、基因組研究、法醫(yī)鑒定等多個方面。本文將深入探討核酸檢測提取儀的參數(shù),幫助您更好地理解該設備的性能特點以及如何根據(jù)實際需求選擇合適的儀器。通過了解這些參數(shù),您可以更地評估提取儀的質量,確保其在實驗中的高效運作。 1. 核酸提取儀的工作原理與參數(shù)定義 核酸檢測提取儀主要用于從生物樣本中提取DNA或RNA,通過不同的技術手段將核酸從細胞或其他生物物質中分離出來。這些儀器通常采用自動化操作,具備高效、精確、可靠的特點。其核心參數(shù)包括提取容量、處理時間、提取效率、樣本種類適應性、操作模式等。 提取容量是指每次操作可處理的樣本數(shù)量,通常以管數(shù)或批次來計算。處理時間是指完成一次提取過程所需的時間,越短的處理時間意味著儀器效率越高。提取效率則決定了從樣本中提取核酸的純度與產量,越高的提取效率能確保得到高質量的核酸,為后續(xù)實驗提供更可靠的結果。 2. 核酸檢測提取儀的性能參數(shù) 在選擇核酸提取儀時,除了上述基本參數(shù)外,還需要關注以下幾個關鍵性能指標: 精度與準確度:提取儀的精度決定了在處理不同樣本時的一致性,而準確度則確保提取的核酸不受外界因素干擾,保持較高的純度。 兼容性:不同型號的核酸提取儀可能支持不同類型的樣本(如血液、唾液、組織等),因此兼容性是一個不可忽視的參數(shù)。選擇適合自己實驗需求的儀器能顯著提高工作效率。 操作便捷性:自動化程度高的核酸提取儀減少了人工干預,不僅提高了工作效率,還降低了操作錯誤的可能性。許多現(xiàn)代化儀器還配備了觸摸屏和直觀的操作界面,進一步簡化了使用過程。 溫控系統(tǒng):在提取過程中,溫度控制至關重要。溫控系統(tǒng)的穩(wěn)定性直接影響到核酸的提取效果,優(yōu)質的溫控系統(tǒng)能有效避免因溫度波動導致的核酸降解。 3. 提取效率與純度的關系 提取效率是核酸檢測提取儀的重要性能指標,直接決定了實驗的成敗。較高的提取效率不僅能提高核酸的收獲量,還能確保核酸的純度達到實驗要求。在選擇提取儀時,需要對比不同品牌和型號的提取效率數(shù)據(jù),選擇適合您實驗需求的設備。純度高的核酸更易進行后續(xù)的PCR擴增、基因測序等實驗,從而保證結果的準確性。 4. 選擇核酸檢測提取儀的考慮因素 選擇合適的核酸提取儀時,除了考慮上述參數(shù)外,還要結合實驗規(guī)模、預算和維護成本等因素。對于大型科研機構或醫(yī)院來說,可能更傾向于選擇處理能力強、自動化程度高的設備,而對于中小型實驗室,則可能更看重設備的性價比和維護便捷性。 除了性能參數(shù),設備的售后服務也至關重要。一個完善的售后服務體系能確保設備在長時間使用過程中依然保持穩(wěn)定性能,并及時解決可能出現(xiàn)的問題。 總結 核酸檢測提取儀作為現(xiàn)代生物實驗室中不可或缺的設備,其選擇不僅僅依賴于其技術參數(shù),更需要根據(jù)實際實驗需求進行綜合評估。從提取容量、處理時間到提取效率、兼容性等多個參數(shù),都直接影響到實驗的成功與否。希望本文的分析能幫助您在選擇合適的核酸提取儀時做出更加明智的決策,確保實驗的高效與。
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2023-06-28 17:17:04全自動酸蒸清洗/純化一體機——AC300
全自動酸蒸清洗/純化一體機——AC300酸蒸超凈清洗是一種自動、密閉、酸蒸汽清洗方法。通過內置可控溫加熱系統(tǒng),利用酸蒸汽安全高效地對所 有可溶于酸中的任何痕量金屬污染物進行超凈清洗,并將其留在液體酸中,絕不會接觸正在清洗的反應容器。功能特點:蒸汽單循環(huán)技術(OWV)——臟酸不回流,不污染凈酸確保洗過的臟酸直接排出系統(tǒng),而不會回流進酸池造成污染。而傳統(tǒng)技術的臟酸要回流進酸池,然后再次蒸發(fā)出來去清洗,不斷循環(huán),導致臟酸不斷污染凈酸,從而酸蒸汽也越來越臟,無法勝任稍高污染度的清洗。真實溫度控制技術(RTC)——確保蒸汽的高純度準確測量,是控溫精確的前提。采用RTC真實溫度控制技術,溫度探頭經過特殊處理,具有與特氟龍一樣的抗酸能力,直接插進酸液,監(jiān)控酸液的真實溫度,從而準確控制溫度,確保酸蒸汽的純度,杜絕其他品牌只監(jiān)控加熱器溫度而無法準確控溫,酸蒸汽純度低的問題。PTC半導體加熱器——最安全的加熱器,沒有之一!最適合長時間無人值守!加熱器具有自我溫度保護功能,在所有溫控系統(tǒng)都失靈的極端情況下,其 最高溫度也不會超過250℃,避免燒毀儀器甚至火災。 清洗流程表:AC300讓您的酸循環(huán)起來!廢酸重復使用,節(jié)約資金,保護環(huán)境AC300不但完美勝任酸蒸清洗任務,還具有自我酸純化功能,用戶只需在軟件中勾選酸純化選項,甚至不用更換酸瓶,AC300即自動抽取廢酸瓶中的廢酸進行亞沸蒸餾純化,純化后的酸自動收集到純酸瓶,以備下次使用。隨后整個系統(tǒng)會自動被超純水潤洗和熱空氣干燥,以備下一輪的酸蒸清洗任務。廢酸純化流程圖:轉載自:http://www.hzxpz.com/
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2023-06-09 11:39:07經典磁珠一文解讀:AMPure XP純化實用技巧
基于SPRI技術的AMPure XP,采用超順磁磁珠幫助純化核酸片段,被廣泛應用到NGS行業(yè),PCR體系、酶切、連接反應體系的純化。作為行業(yè)的“金標準“試劑盒,AMPure XP有哪些高頻Q&A問題呢?AMPure XP怎么純化長片段?怎么提高我的樣本得率?產物純度有什么優(yōu)化的方向嗎?我可以選擇純化250 bp的那一條條帶嗎?小貝總結了10條AMPure XP Q&A問題實用技巧:1、乙醇比例乙醇溶液必須至少70%。當將100%乙醇稀釋至70%時,請確保在配置溶液合并之前分別測量水和乙醇的體積。用水補齊乙醇的稀釋方式會導致濃度低于預期。請確保存儲的乙醇在不使用時保持瓶蓋擰緊。2、充分的混合在最 初磁珠與樣品結合和洗脫混合期間,徹底的混合至關重要??捎寐缘陀诳偪左w積的吸頭進行混合。洗脫時,需要注意最 小洗脫體積(96孔規(guī)格為40 μL,384孔規(guī)格為15 μL),以確保磁珠充分重懸。還應保持足夠的孵育時間,以確保核酸有足夠的時間與磁珠結合或解離。由于樣品的粘度,結合過程中的渦旋可能效率不高。3、大反應體系大體積反應可以采用更長的樣品&磁珠結合和磁分離時間??蓪inding結合時間增加到10分鐘,并確保在棄上清液之前所有的磁珠均被充分磁分離。4、避免實驗中磁珠損失如果在棄清液的過程中磁珠被吸入槍頭,結合在這些磁珠上的核酸則會在這個步驟損失掉。首輪移除上清時,緩慢輕柔地操作,盡可能多地移除清液,同時確保不會干擾磁珠在磁環(huán)/磁力架上的吸附。如果意外吸出磁珠,請將所有磁珠重新打回孔中,讓磁珠重新磁吸。隨后,再度移除上清,嘗試緩慢吸液或使用更細的槍頭。小體積樣品更容易受到磁珠損耗的影響,因為磁珠可能達不到孔中磁鐵的水平位置。5、大片段樣品的磁珠干燥10 kb以上的片段與磁珠結合非常緊密,如果樣品變干則難以洗脫。盡可能完全地棄掉最 后一次乙醇清洗液,立即加入洗脫緩沖液并充分混合。保持蓋子打開狀態(tài),乙醇在洗脫孵育期間將繼續(xù)從孔中蒸發(fā)。6、低洗脫體積洗脫體積小會導致回收率降低。這是因為會有少量洗脫緩沖液始終包覆在磁珠上。該體積取決于孔的形狀和孔中的磁珠量,因此較小的洗脫體積將導致相對較高比例的洗脫液殘留。7、當你用紫外吸收法檢測回收率不只是PCR雙鏈產物,體系中過量的引物和核苷酸同樣產生吸收。因此測量未純化的PCR反應,可能獲得高于實際PCR產物濃度的吸光度值。對比純化前后的吸收值,則會導致回收率看起來比實際低。小貝建議:在瓊脂糖凝膠上運行等量的未純化PCR反應產物與純化后的PCR反應產物(例如1/4的未純化PCR產物和1/4的洗脫液)以便檢查回收情況,或使用基于特異性熒光染料的測定,例如PicoGreen。8、引物的殘留AMPure XP試劑與PCR反應混合后的試劑最 終濃度決定了PCR產物與磁珠結合的片段大小。AMPure XP主要結合> 100 bp的PCR產物,并丟棄小于50個堿基的引物。較大的引物和引物二聚體可以與磁珠結合。請確保您的PCR產物在循環(huán)過程中沒有蒸發(fā)導致體積變小,并添加正確體積的試劑(見下表)。確保用乙醇沖洗在混合和結合過程中樣品有接觸到孔內壁的任何地方。如果在純化體系中存在過量的引物,減少該PCR反應的引物量也可以是一個優(yōu)化的方向。9、下游酶反應效果不佳如果您的下游酶反應對痕量乙醇極其敏感,請?zhí)砑觾煞昼姷谋J馗稍锊襟E。請注意,大片段會與磁珠緊密結合,在磁珠完全干燥后可能難以洗脫。10、如何選擇性保留200-500 bp核酸片段AMPure XP是用于PCR產物純化的試劑盒。對于片段篩選的應用,請考慮使用 SPRIselect試劑盒。有關 SPRIselect 片篩的更多信息,請訪問經典磁珠一文解讀:NGS片段篩選比例計算
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2020-12-23 10:52:40純化工藝的又一“新選擇 "——羥基磷灰石填料Ca++Pure
羥基磷灰石(hydroxyapatite,HA)是目前ZJ有特征的混合模式填料之一,由于其結晶的化學結構、立體構造的特點,羥基磷灰石與抗體的Fab片段、Fc片段可發(fā)生相互作用。所以至今為止,羥基磷灰石在抗體及蛋白質的純化、多聚體和殘留核酸的去除等工藝中,作為精細純化步驟的填料被廣泛使用。并且,該填料兼具離子交換和金屬親和力,具有其他填料不具備的特殊分離能力,能夠為生物大分子分離純化提供獨特的解決方案。羥基磷灰石純化工藝的“新選擇”!Ca++Pure-HA羥基磷灰石填料由東曹公司采用了優(yōu)質ding級材料,通過專有工藝研發(fā)生產的高純度的10nm×100nm六邊形截面晶體,凝聚成球狀顆粒。經過高溫燒結,提高了機械強度和化學穩(wěn)定性,能夠滿足工業(yè)規(guī)模的純化要求。Ca++Pure-HA強大的特性使其可以在高流速和大型層析柱中重復循環(huán)使用。Ca++Pure-HA的應用范圍分離抗體及蛋白質的多聚體、異構體、分解物、電荷異質體等目標產品內源性雜質分離DNA、HCP、病毒等來自生產工藝或混入的外源性雜質適用于ZZ(精純)步驟中的分離純化酸性條件下各填料穩(wěn)定性對比上圖顯示的是,在裝填有高吸附型羥基磷灰石Ca++Pure-HA、市售高吸附型 (B公司Type I) 和高耐久型 (B公司Type II) 羥基磷灰石填料的層析柱中,連續(xù)用弱酸性蒸餾水通液時,層析柱的理論塔板數(shù)的變化情況。市售品在大約80~90小時通液后,理論塔板數(shù)下降10%以上。與之相比,Ca++Pure-HA的理論塔板數(shù)雖然也會緩慢減少,但在約160小時之前,理論塔板數(shù)仍保持在90%以上。也就是說,Ca++Pure-HA屬于高吸附型,且在酸性條件下的耐久性更好。單克隆抗體多聚體分離實例下圖是使用Ca++Pure-HA精純IgG樣品的分離實例。配合使用氯化鉀洗脫緩沖液可以有效去除mAb中的聚集體和降解物。從分析結果中可以看到,單體峰和多聚體峰中間的分辨率較高。隨后,對純化后的IgG樣品進行尺寸排阻色譜分析。結果顯示,單克隆抗體中多聚體的總量從18.8%降到了1.1%,顯著降低。優(yōu)異的耐堿性能從下圖中可以看到,Ca++Pure-HA在0.5 mol/L的NaOH溶液中具有良好的耐堿性,即使超過65個CIP循環(huán)后,動態(tài)吸附載量也沒有明顯降低。
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