- 2025-02-28 18:58:17 試劑 抗體 抗原
- 試劑是用于實(shí)驗(yàn)或檢測(cè)的化學(xué)或生物物質(zhì)?？贵w是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，能特異性地識(shí)別并結(jié)合抗原，幫助清除外來(lái)病原體?？乖悄艽碳C(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)外結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)的物質(zhì)。在生物醫(yī)學(xué)研究中，試劑、抗體和抗原常用于疾病診斷、治療監(jiān)測(cè)及科學(xué)研究等領(lǐng)域，是生命科學(xué)研究不可或缺的工具。
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試劑 抗體 抗原 資訊
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- ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理在我們平時(shí)看來(lái)覺(jué)得很簡(jiǎn)單，無(wú)非就是固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和閉。
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試劑 抗體 抗原 問(wèn)答
- 2022-12-14 13:57:51生產(chǎn)新冠抗原試劑專(zhuān)用高速冷凍離心機(jī)HL21R
- 隨著政策的放開(kāi)，新冠抗原檢測(cè)試劑市場(chǎng)成供不應(yīng)求的趨勢(shì)。目前，新冠病毒的檢測(cè)方法主要是有兩種：一種是基于分子層面的核酸檢測(cè)；一種是基于免疫學(xué)原理的檢測(cè)，抗原檢測(cè)和抗體檢測(cè)?？乖瓩z測(cè)是能在短時(shí)間內(nèi)快速檢測(cè)且確保準(zhǔn)確性的方法之一，在新冠抗原檢測(cè)試劑的生產(chǎn)過(guò)程中，離不開(kāi)專(zhuān)業(yè)儀器設(shè)備的支持，如用于病毒檢測(cè)分離工作的高速冷凍離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)室在制備新冠抗原膠體檢測(cè)試劑時(shí)，需要將培養(yǎng)出來(lái)的抗原膠體進(jìn)行分離提純，通常采用高速冷凍離心機(jī)進(jìn)行分離提純。綜儀生物為生產(chǎn)新冠試劑的廠商供應(yīng)一批HL21R高速冷凍離心機(jī)，助力新冠試劑的生產(chǎn)研發(fā)，滿(mǎn)足市場(chǎng)快速準(zhǔn)確的檢測(cè)需求。針對(duì)新冠抗原檢測(cè)試劑生產(chǎn)的需求推薦配置角轉(zhuǎn)頭6x50ml、6x250ml、6x500ml，能滿(mǎn)足大量快速生產(chǎn)的需求。從HL21R高速冷凍離心機(jī)的性能參數(shù)來(lái)看，該產(chǎn)品轉(zhuǎn)速可高達(dá)21000rpm；相對(duì)離心力可高達(dá)53000xg；容量可達(dá)6x500ml；溫控范圍：-20℃～40℃；采用進(jìn)口壓縮機(jī)組、環(huán)保無(wú)氟制冷劑；交流變頻無(wú)刷電機(jī)驅(qū)動(dòng)；大屏幕數(shù)顯液晶雙屏顯示、可顯示存儲(chǔ) 40 組編程參數(shù)操作；304不銹鋼腔體、雙重自動(dòng)化鎖蓋；設(shè)有超速、超溫、門(mén)蓋自鎖、不平衡等保護(hù)。長(zhǎng)沙綜儀生物科技有限公司作為國(guó)內(nèi)專(zhuān)業(yè)離心機(jī)設(shè)備的廠商，將全力以赴做力所能及之事，助力新冠抗原試劑的廠商實(shí)現(xiàn)更精準(zhǔn)、更高效的生產(chǎn)。
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- 2025-08-29 11:30:21生化分析儀怎么加試劑
- 在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域中，生化分析儀扮演著至關(guān)重要的角色，它能夠快速、準(zhǔn)確地進(jìn)行多項(xiàng)生化檢測(cè)，為疾病診斷、方案制定提供重要依據(jù)。作為一名操作人員或維護(hù)人員，掌握正確的加試劑步驟不僅關(guān)系到檢測(cè)工作的效率，更影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本篇文章將詳盡介紹生化分析儀如何正確加試劑，包括試劑的準(zhǔn)備、添加流程、注意事項(xiàng)以及常見(jiàn)問(wèn)題的解決方法，旨在幫助相關(guān)工作人員提升操作水平，確保檢測(cè)工作的順利進(jìn)行。 一、試劑準(zhǔn)備及存儲(chǔ) 在進(jìn)行試劑加試操作前，首先應(yīng)確保所有試劑的質(zhì)量及儲(chǔ)存條件符合要求。通常，試劑應(yīng)存放在陰涼、干燥、避光的環(huán)境中，遵循制造商的存放指南。使用前，應(yīng)仔細(xì)檢查試劑的有效期及包裝完整性。取出試劑時(shí)，應(yīng)使用專(zhuān)用的移液工具，避免交叉污染。應(yīng)按照說(shuō)明書(shū)中推薦的稀釋比例預(yù)先準(zhǔn)備好所需的試劑，確保每次加試劑的濃度一致。 二、加試劑的流程步驟 準(zhǔn)備工作：在操作前，應(yīng)先進(jìn)行儀器的自檢和清潔，確保樣品杯和試劑架的清潔無(wú)污染。 啟動(dòng)儀器：打開(kāi)生化分析儀，按照操作流程進(jìn)入試劑加注模塊，確認(rèn)儀器處于正常工作狀態(tài)。 加載試劑杯或試劑管：根據(jù)儀器型號(hào)不同，將預(yù)先準(zhǔn)備好的試劑瓶或試劑管放入指定的位置。需要確保試劑標(biāo)識(shí)清晰、正確無(wú)誤。 選擇加試劑程序：在儀器操作界面中選擇對(duì)應(yīng)的試劑加注程序，確認(rèn)配方參數(shù)和加試步驟的正確性。 自動(dòng)加試劑：?jiǎn)?dòng)加試劑程序，儀器將自動(dòng)完成試劑的加注過(guò)程。操作者應(yīng)在此環(huán)節(jié)密切監(jiān)控，確保加注正常進(jìn)行。 人工加試劑：對(duì)于部分需要手工加試劑的操作，要確保使用的移液器或吸頭干凈，無(wú)污染，在指定的位置緩慢、均勻地添加試劑。 三、注意事項(xiàng) 操作環(huán)境：保持操作臺(tái)及儀器周?chē)那鍧崳苊饣覊m或液體污染試劑。 試劑用量：嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，掌握正確的加試劑量，避免不足或過(guò)量。 試劑混合：添加后，有些試劑需要輕輕混勻，確保反應(yīng)充分。 安全防護(hù)：在操作過(guò)程中佩戴手套和護(hù)目鏡，避免試劑接觸皮膚或眼睛。 四、常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案 試劑未充滿(mǎn)或液面過(guò)低：檢查試劑瓶的連接和泵浦是否正常工作，必要時(shí)更換或修理泵浦組件。 試劑泄漏或污染：確保所有連接緊密無(wú)泄漏，操作完畢后及時(shí)清潔試劑瓶口和周?chē)h(huán)境。 系統(tǒng)提示錯(cuò)誤：核實(shí)試劑標(biāo)簽與程序設(shè)置是否一致，重啟儀器或咨詢(xún)廠商技術(shù)支持。 五、總結(jié) 生化分析儀的試劑加試過(guò)程是確保檢測(cè)質(zhì)量和效率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。掌握科學(xué)、規(guī)范的加試劑操作流程，不僅能提升工作效率，還能確保每一次檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。在實(shí)際操作中，應(yīng)嚴(yán)格遵循廠商指導(dǎo)，及時(shí)維護(hù)校準(zhǔn)設(shè)備，以應(yīng)對(duì)可能出現(xiàn)的各種技術(shù)難題。未來(lái)，隨著自動(dòng)化與智能化的發(fā)展，試劑加注的自動(dòng)化水平將不斷提高，為臨床檢驗(yàn)提供更為穩(wěn)固的技術(shù)保障。
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- 2023-12-25 17:14:18重組抗體的類(lèi)型有哪些？
- 重組抗體，也被稱(chēng)為重組免疫球蛋白，是通過(guò)基因工程技術(shù)將抗體的基因在合適的宿主細(xì)胞中表達(dá)并生產(chǎn)出來(lái)的一類(lèi)抗體。與傳統(tǒng)的多克隆抗體和單克隆抗體相比，重組抗體具有更高的特異性和親和力，并且可以針對(duì)特定的抗原表位進(jìn)行設(shè)計(jì)和優(yōu)化。重組抗體的類(lèi)型包括嵌合抗體、雙特異性抗體、抗體片段和Fc融合蛋白等。下面一起來(lái)看一下他們各種的應(yīng)用：https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview①嵌合抗體1975年，雜交瘤技術(shù)的發(fā)現(xiàn)徹底改變了抗體研究和臨床開(kāi)發(fā)。然而，鼠源性抗體的療-效受到人抗鼠抗體（HAMA）效應(yīng)的限制，鼠源性單抗對(duì)人體具有異種蛋白的免疫原性 ,在人體內(nèi)半衰期較短。1984年，研究人員通過(guò)基因工程構(gòu)建了第一個(gè)嵌合抗體，也是公認(rèn)的第一種重組抗體，以降低鼠源抗體在人體內(nèi)的免疫原性。其中，約30%-35%的分子來(lái)源于小鼠的抗體序列，約65%-70%來(lái)源于人的抗體序列。所得嵌合抗體保留了親代小鼠抗體的抗原結(jié)合能力?？贵w嵌合是開(kāi)發(fā)治-療性人源化抗體的第一步。義翹神州采用CDR移植技術(shù)和計(jì)算機(jī)輔助分子建模，提供高質(zhì)量的單克隆抗體人源化服務(wù)，成功率高，人源化程度>90%。②抗體片段每一個(gè)完整的免疫球蛋白（IgG）分子包含通過(guò)二硫鍵連接的兩條重鏈和兩條輕鏈。抗體片段（如Fab、scFv和VHH）體積小，比其全長(zhǎng)抗體具有更好的組織或腫瘤穿透力。因此，它們?cè)诿庖咧?療方面具有巨大的前景，尤其是在實(shí)體瘤方面。此外，它們的半衰期也較短，可用作放射性顯像劑。然而，由于缺乏Fc區(qū)，它們不能引起Fc介導(dǎo)的抗體效應(yīng)功能，如抗體依賴(lài)性細(xì)胞毒性（ADCC）和補(bǔ)體依賴(lài)性細(xì)胞毒性（CDC）。起初采用酶解法對(duì)IgG抗體進(jìn)行片段化。胃蛋白酶作用于鉸鏈區(qū)二硫鍵所連接的兩條重鏈的近C端，水解產(chǎn)生被稱(chēng)為F(ab’)2的二價(jià)Fab片段。然后，通過(guò)木瓜蛋白酶將該片段裂解為兩個(gè)相同的Fab片段。然而，酶解法限制了可制備的抗體片段類(lèi)型，而且不適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)和純化。隨著抗體工程技術(shù)的進(jìn)步，這些問(wèn)題可以通過(guò)重組生產(chǎn)抗體片段來(lái)解決?？贵w基因克隆測(cè)序成功后，可通過(guò)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染在原核表達(dá)系統(tǒng)（如大腸桿菌）和哺乳動(dòng)物系統(tǒng)（HEK293細(xì)胞）中表達(dá)抗體片段。憑借豐富的重組生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，義翹神州建立了高通量VHH表達(dá)平臺(tái)，交付了多個(gè)VHH抗體生產(chǎn)項(xiàng)目，總體成功率超過(guò)90%。除了常見(jiàn)的VHH形式，我們還可以表達(dá)雙特異和多特異VHH。此外，義翹神州還可以表達(dá)其他各種高特異性和親和力的抗體片段，如scFv和Fab。③雙特異性抗體與常規(guī)單克隆抗體不同，雙特異性抗體（bsAb）具有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，可識(shí)別同一抗原上兩個(gè)不同抗原或表位。由于這一特性，雙特異性抗體備受研究者和制藥業(yè)的關(guān)注。截止目前，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）已批準(zhǔn)了4種雙抗藥物，而且160多種雙抗正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)，用于治-療癌癥、糖尿病、阿爾茨海默病和其他疾病。起初，雙特異性抗體通過(guò)四源雜交瘤技術(shù)制備，但這對(duì)下游抗體生產(chǎn)和純化構(gòu)成了巨大的挑戰(zhàn)。隨著過(guò)去20年重組DNA技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了幾種雙特異性抗體形式，以適應(yīng)所需的靶標(biāo)-產(chǎn)品特征。為了解決重鏈錯(cuò)配問(wèn)題，Genentech首先提出了“knob-into-hole”（KiH）技術(shù)，該技術(shù)通過(guò)對(duì)CH3結(jié)構(gòu)域進(jìn)行改造，在每條重鏈中創(chuàng)建一個(gè)“knob”或一個(gè)“hole”，以誘導(dǎo)異源二聚化。同樣地，研究人員也采用了common light chain 和CrossMab等其他技術(shù)來(lái)解決輕鏈錯(cuò)配問(wèn)題。表達(dá)雙特異性抗體主要在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行。由于單克隆抗體和雙特異性抗體之間的各種結(jié)構(gòu)相似性，許多已建立的常規(guī)單抗純化工藝也可適用于雙特異性抗體。（參見(jiàn)另一篇文章：“雙特異性抗體：抗體治-療中的新星”）④Fc融合蛋白Fc融合蛋白（又稱(chēng)Fc嵌合融合蛋白、Fc-Ig和Fc標(biāo)簽蛋白）是一種同源二聚體，由免疫球蛋白的Fc段與具有生物學(xué)活性的蛋白分子組成。雖然單克隆抗體是治-療性生物制劑開(kāi)發(fā)的重-點(diǎn)，但Fc融合蛋白也是一類(lèi)成功的生物制藥產(chǎn)品，至少有13種藥物獲得了歐洲藥品管理局（EMA）和美國(guó)FDA的批準(zhǔn)。除治-療應(yīng)用外，F(xiàn)c融合蛋白還是基礎(chǔ)研究中的檢測(cè)試劑，包括流式細(xì)胞術(shù)、免疫組織化學(xué)和蛋白結(jié)合試驗(yàn)。事實(shí)上，與Fc區(qū)的連接可以提高一些結(jié)合蛋白的溶解度和穩(wěn)定性。鑒于其大小和對(duì)糖基化的需求（大多數(shù)是糖蛋白），F(xiàn)c融合蛋白主要在哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。目前，抗體工程技術(shù)取得了一定的進(jìn)步，這極大地促進(jìn)了各種形式重組抗體的開(kāi)發(fā)，用于疾病治-療。FDA已批準(zhǔn)了100多種抗體藥物，目前有多種抗體處于臨床后期開(kāi)發(fā)階段。此外，重組抗體還可用于許多研究應(yīng)用：蛋白免疫印跡（WB）、免疫組織化學(xué)（IHC）、免疫熒光（IF）、流式細(xì)胞術(shù)（FC）和表面等離子體共振（SPR）?？傊?，重組抗體是基因工程技術(shù)的重要應(yīng)用之一，其類(lèi)型多樣，具有廣泛的應(yīng)用前景。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，重組抗體的生產(chǎn)成本和安全性問(wèn)題也將得到進(jìn)一步優(yōu)化，為臨床治-療和科學(xué)研究提供更多有效的工具。同時(shí)，我們也應(yīng)該認(rèn)識(shí)到重組抗體的潛在風(fēng)險(xiǎn)和挑戰(zhàn)，加強(qiáng)對(duì)其安全性和有效性的評(píng)估和監(jiān)管，以確保其能夠更好地服務(wù)于人類(lèi)的健康事業(yè)。更多重組抗體詳情關(guān)注：https://cn.sinobiological.com/news/recombinant-antibodies-formats
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- 2025-08-21 17:45:24測(cè)硫儀試劑怎么配
- 在現(xiàn)代工業(yè)和環(huán)境監(jiān)測(cè)中，測(cè)硫儀扮演著至關(guān)重要的角色，尤其是在煤炭、冶金、化工及排放監(jiān)測(cè)領(lǐng)域。為了確保測(cè)量的準(zhǔn)確性和可靠性，配制合適的試劑是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本文將深入探討測(cè)硫儀試劑的配制方法、注意事項(xiàng)及優(yōu)化技巧，旨在幫助相關(guān)行業(yè)人員掌握科學(xué)、規(guī)范的操作流程，從而提升檢測(cè)效率與數(shù)據(jù)精度。 明確測(cè)硫儀所需試劑的類(lèi)型與用途。常用的試劑主要包括硫化物還原劑、反應(yīng)緩沖溶液和指示劑等。不同型號(hào)的測(cè)硫儀可能對(duì)應(yīng)不同的試劑配方，但大致的配制原則類(lèi)似。科學(xué)合理的配劑比例有助于確保在檢測(cè)過(guò)程中反應(yīng)充分、結(jié)果準(zhǔn)確。通常情況下，試劑的配制應(yīng)以高純度化學(xué)品為原料，避免雜質(zhì)影響結(jié)果。 在配制試劑之前，務(wù)必準(zhǔn)備干凈、干燥的器具和溶液容器。使用試劑應(yīng)在通風(fēng)良好的環(huán)境中進(jìn)行，佩戴必需的個(gè)人防護(hù)裝備。按照標(biāo)準(zhǔn)配方逐步加入原料，逐層稱(chēng)量，避免誤差。例如，配制還原劑時(shí)，應(yīng)精確秤取所需的還原劑粉末，加入到預(yù)先準(zhǔn)備的緩沖液中，充分溶解并攪拌均勻。過(guò)程中，溫度控制也很重要，某些試劑在高溫或低溫下穩(wěn)定性不同，需根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。 試劑的保存與穩(wěn)定性也是確保檢測(cè)準(zhǔn)確的重要環(huán)節(jié)。配制完成后，應(yīng)裝入密封瓶，標(biāo)明配制時(shí)間和批次，并存放在陰涼、干燥、避光的位置。部分試劑不宜長(zhǎng)時(shí)間保存，建議在規(guī)定的有效期內(nèi)使用，以防變質(zhì)或失效。對(duì)于需定期配制的試劑，應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)操作流程（SOP），確保每次配制的一致性。 配制測(cè)試之前，建議進(jìn)行小規(guī)模試驗(yàn)，以驗(yàn)證試劑的有效性和反應(yīng)的穩(wěn)定性。這也是發(fā)現(xiàn)配比偏差或操作不當(dāng)?shù)年P(guān)鍵步驟。調(diào)試過(guò)程中，應(yīng)記錄詳細(xì)參數(shù)，如加入的化學(xué)品用量、配制環(huán)境溫度及時(shí)間，為后續(xù)優(yōu)化提供依據(jù)。若發(fā)現(xiàn)試劑反應(yīng)異常，及時(shí)調(diào)整配比或更換原料，不應(yīng)盲目繼續(xù)使用。 除了試劑的配制技巧外，掌握正確的儲(chǔ)存和操作方法，也是確保測(cè)硫儀長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行的重要保障。定期校準(zhǔn)儀器和檢測(cè)試劑的性能，是取得準(zhǔn)確結(jié)果的基礎(chǔ)。應(yīng)關(guān)注試劑的損耗和變質(zhì)情況，及時(shí)補(bǔ)充和更換。許多企業(yè)也引入自動(dòng)化配制設(shè)備，提升配制效率與一致性，減少人為誤差。 近年來(lái)，隨著高新技術(shù)的發(fā)展，配制試劑的標(biāo)準(zhǔn)化、化成為趨勢(shì)。利用先進(jìn)的質(zhì)量控制體系和分析儀器，可以更科學(xué)地監(jiān)測(cè)試劑的組成及其反應(yīng)性能，確保每一份試劑都達(dá)到預(yù)定的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。與此通過(guò)化學(xué)合成和純化技術(shù)的升級(jí)，也有助于提升試劑的純度和穩(wěn)定性，為檢測(cè)提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 總結(jié)而言，測(cè)硫儀試劑的科學(xué)配制，是確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。嚴(yán)格遵循配方、操作規(guī)程和保存管理，有助于提升檢測(cè)效率和數(shù)據(jù)質(zhì)量。在未來(lái)的發(fā)展中，結(jié)合現(xiàn)代技術(shù)手段進(jìn)行試劑優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化，將為環(huán)境監(jiān)測(cè)和工業(yè)控制提供更強(qiáng)有力的技術(shù)支持。隨著行業(yè)的不斷發(fā)展，專(zhuān)業(yè)化和精細(xì)化的試劑管理將成為提升檢測(cè)水平的必由之路。
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- 2024-01-16 16:35:20免疫組化抗體（IHC）的實(shí)踐應(yīng)用與常見(jiàn)問(wèn)題詳解
- 免疫組化法（IHC）是使用抗體檢測(cè)組織切片（例如肝臟、胰-腺或心臟）中細(xì)胞蛋白質(zhì)（抗原）的過(guò)程。 當(dāng)組織樣本被送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行疾病檢查時(shí)，有幾個(gè)細(xì)節(jié)不易確定。幾種疾病或疾病亞型在顯微鏡下可能看起來(lái)相似或看起來(lái)具有相似大小的細(xì)胞，但具有不同的行為和必要的治-療，區(qū)分它們的最佳方法是檢測(cè)這些細(xì)胞上作為標(biāo)記的特定分子。免疫組化法（IHC）是一種使用抗體（匹配分子）的技術(shù)，用于尋找、識(shí)別附著在細(xì)胞上的標(biāo)記物。在顯微鏡下可以看到抗體本身，這有助于技術(shù)人員進(jìn)行精確識(shí)別。 免疫組化法（IHC）已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)中，特別是癌癥診斷。淋巴瘤是依賴(lài)于IHC進(jìn)行正確診斷和治-療決策的癌癥之一。 免疫組化常見(jiàn)問(wèn)題：?jiǎn)栴}一：我應(yīng)該使用PIER還是HIER進(jìn)行抗原修復(fù)？ 固定過(guò)程可能會(huì)掩蓋抗原，導(dǎo)致抗體結(jié)合無(wú)法進(jìn)行。這種掩蓋可以通過(guò)一種稱(chēng)為抗原修復(fù)/抗原去掩蔽的技術(shù)來(lái)逆轉(zhuǎn)，該技術(shù)可以通過(guò)加熱（HIER；熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)）或蛋白酶（PIER；蛋白水解誘導(dǎo)抗原修復(fù)）介導(dǎo)。后者使用蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶等酶。PIER方法通過(guò)降解掩蓋表位的肽而起作用。然而，PIER也可能導(dǎo)致樣品形態(tài)或抗原本身的改變。因此，PIER的使用頻率低于HIER，后者通過(guò)恢復(fù)表位的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)而起作用。為了確定是否應(yīng)該進(jìn)行抗原修復(fù)以及采用哪種方法，應(yīng)遵循以下指南：進(jìn)行文獻(xiàn)檢索，以確定其他研究人員如何可視化您感興趣的抗原。檢查抗體供應(yīng)商是否推薦了特定的抗原修復(fù)-方案。如果沒(méi)有特定的協(xié)議可用，我們建議使用HIER而不是PIER協(xié)議。對(duì)于HIER，總是使用中性抗原修復(fù)緩沖液，并與未進(jìn)行抗原修復(fù)的樣品進(jìn)行比較。如果中性染色溶液沒(méi)有產(chǎn)生良好的染色效果，則應(yīng)測(cè)試堿性或酸性抗原修復(fù)緩沖液。除了pH值外，其他需要優(yōu)化的參數(shù)是溫度和持續(xù)時(shí)間。理想情況下，嘗試各種pH值、溫度和時(shí)間組合。為了排除由HIER過(guò)程引起的偽影，始終包括一個(gè)控制樣品，該樣品在沒(méi)有HIER步驟的情況下進(jìn)行染色。 問(wèn)題二：如何選擇IHC實(shí)驗(yàn)的抗體，單克隆抗體還是多克隆抗體？ 單克隆抗體和多克隆抗體的抗體特性決定了其優(yōu)缺點(diǎn)。單克隆抗體是針對(duì)單個(gè)表位的同種免疫球蛋白。抗體是由一個(gè)動(dòng)物的單個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，因此在免疫化學(xué)上相似。多克隆抗體是針對(duì)同一抗原的各種表位的異質(zhì)抗體混合物?？贵w是由動(dòng)物的不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，因此在免疫化學(xué)上不同。多克隆混合物中的抗體可能具有略微不同的特異性和親和力。 如果蛋白質(zhì)靶標(biāo)具有相同的氨基酸序列，單克隆抗體更合適。一旦抗原因各種原因發(fā)生構(gòu)象變化，如蛋白質(zhì)相互作用、翻譯后修飾、溫度、pH值、固定、鹽濃度等，單克隆抗體和抗原的聯(lián)合作用將受到嚴(yán)重影響。由于多克隆抗體具有多個(gè)表位，不受蛋白質(zhì)構(gòu)象變化的影響，一般來(lái)說(shuō)，在一定范圍內(nèi)的pH和鹽濃度內(nèi)，多克隆抗體之間的抗原結(jié)合比單克隆抗體更穩(wěn)定。 問(wèn)題三：一抗的孵育時(shí)間多久？一抗的孵育時(shí)間與溫度,抗體濃度有關(guān)。一般情況下,在37℃的條件下,孵育1-2小時(shí)左右。在室溫的條件下,孵育3小時(shí)左右。在4℃的條件下,孵育18-24小時(shí)左右。 義翹神州提供石蠟切片免疫組化（IHC）檢測(cè)服務(wù)，更多免疫組化的問(wèn)題可以上義翹神州網(wǎng)咨詢(xún)！https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service
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