- 2025-01-10 10:50:30色譜柱污染 現(xiàn)象
- 色譜柱污染是色譜分析中常見的問題,主要由樣品中的雜質(zhì)、流動相中的污染物或柱材料的老化等原因引起。污染會導(dǎo)致色譜峰形變差、分離度降低、靈敏度下降等現(xiàn)象,嚴重影響分析結(jié)果的準確性。處理色譜柱污染的方法包括使用合適的溶劑清洗、再生柱材料或更換新的色譜柱等。
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色譜柱污染 現(xiàn)象問答
- 2023-02-21 16:13:51為什么我們要關(guān)心色譜柱內(nèi)徑?
- 相信很多色譜分析員都知道,改變色譜柱內(nèi)徑將對許多變量產(chǎn)生直接影響,包括峰高、信噪比、平均柱效、樣品載量、對強注射溶劑的敏感性、壓力、分析物保留次、溶劑用量和/或液體廢物的產(chǎn)生等多方面問題。市面上的液相色譜柱的內(nèi)徑有4.6 毫米、3.0 毫米、2.1 毫米等等多種選擇,那么,為什么會有這么多內(nèi)徑規(guī)格呢,下面恒譜生帶您了解。一:內(nèi)徑對柱色譜有什么影響? 在柱色譜法中,樣品物質(zhì)在流動相的幫助下穿過柱子。它們根據(jù)與固定相的相互作用進行分離,從而產(chǎn)生不同的保留時間。換句話說,可以根據(jù)流動相和固定相之間相互作用的類型以及它們通過色譜柱所需的時間來分離和檢測分子。那么,柱徑如何符合方程式的呢?可以想象,更大的直徑使流動相更容易通過。相反,較窄的列意味著這樣做需要更長的時間??梢岳斫鉃檫@對敏感性有連鎖反應(yīng),花在色譜柱上的時間越少意味著靈敏度越低,而時間越長則靈敏度越高。因此,較寬的直徑通常會導(dǎo)致較低的靈敏度,而較窄的直徑則與較高的靈敏度相關(guān)。其實樣本量也會有影響,較寬的色譜柱需要更大的樣品和更多的溶劑才能進行分析,而窄的色譜柱可以使用較小的樣品和較少的溶劑作為流動相。 當然,選擇色譜柱并不是只有內(nèi)徑這一種因素,色譜柱的長度和它們能夠承受的壓力也可能不同。從長度開始,這可以產(chǎn)生與直徑類似的效果。較短的色譜柱可縮短分析時間從而降低靈敏度。而較長的色譜柱會增加分析時間并改善結(jié)果。基于以上所述,很顯然長而窄的色譜柱會提供更加優(yōu)越的結(jié)果,因為它會增加分析時間、提高靈敏度并且不需要更大的樣品。但是,推動流動相通過色譜柱需要更大的壓力。色譜柱只能承受一定程度的壓力,而泵需要能夠提供足夠的壓力,因此在選擇時也需要考慮這一點。在泵的出口和進樣閥之間可以安裝在線過濾器,是能夠用來過濾流動相中的雜質(zhì)和固體顆粒,保護液相系統(tǒng)的正常運行的一種過濾型色譜耗材。在液相色譜系統(tǒng)中,恒譜生在線過濾器可以很大程度上地減少泵、混合器和管路在流動相中輸送過程中所產(chǎn)生的堵塞、損壞儀器等情況出現(xiàn)。二:為什么要使用不同直徑的色譜柱? 有兩個主要優(yōu)勢:其一是減少流動相消耗,其二是減少峰體積。如果將流速調(diào)整為恒定線速度,如HPLC柱徑改變時保留時間應(yīng)相同,因此樣品運行時間將保持不變。如果運行時間相同且流速降低,則將使用較少的流動相。峰體積(以體積表示的峰寬)隨著色譜柱橫截面積的減小或直徑變化的平方而下降。這轉(zhuǎn)化為成比例的更高的峰,假設(shè)相同質(zhì)量的樣品可以加載到色譜柱上,這可能是正確的,也可能不是正確的。因此,假設(shè)注入相同質(zhì)量的樣品,從 4.6 毫米內(nèi)徑的色譜柱換成 2.1 毫米的色譜柱應(yīng)該會將峰寬減少五倍,并將峰高增加相同的量。 當柱直徑發(fā)生變化時,對流速進行必要的改變以保持恒定的線速度是相當簡單的。減小柱徑有助于節(jié)省溶劑和提高檢測限。但是對于較小直徑的色譜柱,可能會觀察到系統(tǒng)性能的下降。從故障排除的角度來看,很容易將系統(tǒng)性能不佳歸咎于色譜柱本身,而真正的罪魁禍首可能是 LC 系統(tǒng)的柱外體積。對柱外效應(yīng)的相對不敏感是填充直徑 5 μm 顆粒的4.6 mm × 150mm 色譜分析柱可能在未來許多年內(nèi)仍然是常規(guī) LC 工作的主力色譜柱的原因之一。 今天恒譜生分享的知識先到這啦,希望對您的工作有所幫助!
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- 2023-01-03 16:11:31無處不在的PCR污染,如何有效避免?
- 前言在PCR檢測過程中,不可否認的是,沒有任何檢測是100%準確的,比如我們可能也曾聽過假陽性這個名詞,那為什么會出現(xiàn)假陽性呢?這其實跟實驗操作過程造成的污染相關(guān),在實驗開展過程中,主要有4種污染途徑:標本間交叉污染、PCR試劑污染、PCR擴增產(chǎn)物污染、實驗室克隆質(zhì)粒污染。如何對污染進行監(jiān)測?1. 陽性對照在建立PCR實驗室及一般的檢驗單位都應(yīng)設(shè)有PCR陽性對照,它是PCR 反應(yīng)是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否符合理論要求的一個重要的參考標志,陽性對照要選擇擴增度中等、復(fù)性好,經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標本,如以重組質(zhì)粒為陽性對照,其含量宜低不宜高(100個拷貝以下),但陽性對照尤其是重組質(zhì)粒及高濃度陽性標本,其對檢測或擴增樣品污染的可能性很大,因而當某一PCR試劑經(jīng)自己使用穩(wěn)定,檢驗人員心中有數(shù)時,在以后的實驗中可免設(shè)陽性對照。2. 陰性對照每次PCR試驗務(wù)必做陰性對照,它包括:①標本對照,被檢標本是血清就用鑒定后的正常血清做對照,被檢的標本是組織細胞就用相應(yīng)的組織細胞做對照;②試劑對照,在PCR試劑中不加模板DNA或RNA,進行PCR擴增,以檢測試劑是否污染。3. 重復(fù)性實驗4. 選擇不同區(qū)域的引物進行PCR擴增如何避免PCR污染?實驗室防污染是重中之重,畢竟影響最終檢測結(jié)果,那么我們有哪些防污染的方法呢?除了注意避免人工操作引入的污染,我們在實驗時應(yīng)設(shè)立適當?shù)年栃詫φ蘸完幮詫φ?,陽性對照以能出現(xiàn)擴增帶的標準病原體核酸為宜,并注意交叉污染的可能性,每次反應(yīng)都應(yīng)由一管不加模板的試劑對照及相應(yīng)不含有被擴增核酸的樣品作陰性對照。同時減少PCR循環(huán)次數(shù),PCR產(chǎn)物達到檢測水平就適可而止。
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- 2023-01-10 13:36:08青出于藍,更勝一籌 | InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 極性保留色譜柱
- 你是否正面臨著大量化合物分析的挑戰(zhàn)?你是否想開發(fā)同時保留極性和非極性化合物的分離方法?你是否在尋找一款色譜柱,在分析物保留和通量之間平衡?全新 Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱橫空出世,反相模式下使用 100% 水性流動相大幅提高強極性化合物的保留性能,兼顧通量和保留。Agilent InfinityLab Poroshell 120 系列色譜柱,多年來一直是追求效率的分析工作者的利器。除了推出了粒徑為 1.9 μm 和 4 μm 的填料,安捷倫還不斷增加了 Poroshell 120 固定相類型,進一步拓展了應(yīng)用范圍。目前 Poroshell 120 系列用于小分子化合物分離的色譜固定相有 3 種粒徑、20 種固定相(包括本次新品 Poroshell 120 Aq-C18)。InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱能夠:提高極性化合物的保留兼容 100% 水性流動相無需擔心固定相塌陷或去濕問題批次間高重現(xiàn)性可在所有分析型 HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)間擴展如果您使用普通 C18 色譜柱,在分析方法開發(fā)/確認階段遇到如下問題:化合物保留、分離和峰型有待改善待測組分極性跨度大高水或者純水條件下化合物保留時間漂移安捷倫 InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 將是您的理想之選!
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- 2022-03-08 11:51:31全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市
- 全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市,助力新型抗體藥物分析近日,沃特世公司隆重推出MaxPeak Premier SEC系列色譜柱。這款色譜柱專為ADC/雙抗分析設(shè)計,只需簡單的流動相,就能同時分離聚合物和片段。圖1. MaxPeak Premier SEC系列色譜柱MaxPeak Premier SEC采用專 利的Premier柱管,這是沃特世首次將該技術(shù)應(yīng)用于大分子分析的產(chǎn)品線。結(jié)合新型PEO鍵合相填料表面修飾,可大大減少次級作用,僅需較少的鹽即可得到對稱峰形。這一特點將使SEC的方法開發(fā)更簡單,即單一 流動相即可滿足不同樣品的分析需求,有利于建立一個高效的SEC分析平臺。圖2. 不同流動相中蛋白混合標準品分離色譜圖(A: MaxPeak Premier SEC色譜圖;B: 傳統(tǒng)SEC色譜圖)。針對ADC/雙抗的分子特性,MaxPeak Premier SEC對填料的孔徑進行了優(yōu)化,孔徑分布更加合理,使ADC/雙抗的聚合物及片段分析都有了明顯的改善。圖3. MaxPeak Premier SEC分析ADC/雙抗的對比色譜圖。
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- 2023-06-12 14:28:56ASD | ASD Fieldspec 4 光譜儀在塑料污染探測方面的應(yīng)用
- 隨著人類活動的增加,塑料垃圾在我們的日常生活中越來越常見。塑料污染對環(huán)境和生態(tài)造成了嚴重的影響,對人類的健康也有潛在的威脅。在這個背景下,如何高效地探測和處理塑料垃圾成為了全 球環(huán)保領(lǐng)域的重要研究課題。傳統(tǒng)的塑料垃圾控制方案難以完全根除塑料垃圾的影響。近年來,新的探測方式已經(jīng)成為塑料垃圾問題的熱門解決方案。其中,遙感探測技術(shù)日益成為新的研究方向,今天我們來了解一篇相關(guān)論文,希望能夠增強人們對光譜技術(shù)在塑料垃圾探測和處理中的認識和了解,同時也提高大家對環(huán)保問題的意識和重視。ASD Fieldspec 4 光譜儀在塑料污染探測方面的應(yīng)用近年來,人們將重 點放在利用衛(wèi)星、飛機和無人機的光學(xué)傳感器等遙感技術(shù)探測塑料垃圾。隨著對這些技術(shù)需求的不斷增加,至關(guān)重要的是,不僅要了解原始塑料的診斷光譜特性,而且要了解代表各種環(huán)境塑料的風化和生物污染塑料的診斷光譜特性。目前,干塑料的光譜反射率已知,并已經(jīng)應(yīng)用于材料回收領(lǐng)域,但其僅限于干塑料測量的評估項目。為了能夠識別河流、港口和海洋等水生環(huán)境中的塑料垃圾,需要獲取塑料潮濕時或被淹沒時的光譜特征。此外,其他水成分,如沉積物或藻類,也可能會進一步影響塑料物品的反射信號。迄今為止,只有有限數(shù)量的高質(zhì)量數(shù)據(jù)集被發(fā)布在開放獲取的存儲庫中,數(shù)據(jù)集中包括潮濕塑料垃圾和水中塑料垃圾的高光譜測量。由于環(huán)境中的塑料在聚合物類型、顏色、透明度、厚度、狀態(tài)(原始的、生物污染的、風化的、皺褶的)和濕度(干燥的、潮濕的、浸沒的)方面非常多樣化,因此在科學(xué)界內(nèi)構(gòu)建能代表塑料在許多不同方面的可靠數(shù)據(jù)集至關(guān)重要。基于此,在本研究中,由比利時奧斯坦德法蘭德斯海洋研究所、比利時根特大學(xué)水生生態(tài)學(xué)研究小組、佛蘭德技術(shù)研究所(VITO)、比利時布魯塞爾自然與森林水產(chǎn)管理研究所、研究基金會-佛蘭德斯(FWO),比利時布魯塞爾組成的一組研究團隊收集了安特衛(wèi)普港碼頭和特姆斯橋附近謝爾特河自然條件下的原始、風化和生物污染的塑料制品和塑料碎片樣品,同時選擇純原始塑料聚合物,進行塑料樣品人工風化模擬、生物污染模擬,利用ASD FieldSpec 4地物光譜儀規(guī)范測量由不同聚合物組成的塑料樣品的干燥光譜反射率、潮濕和水下環(huán)境中(人工模擬環(huán)境)的光譜反射率,提出了一個利用ASD FieldSpec 4地物光譜儀獲得的宏觀塑性樣品的高光譜反射率數(shù)據(jù)集。在人工風化實驗中使用的紫外線室的參數(shù)在原始塑料標本上進行誘導(dǎo)生物膜生長實驗的水族館裝置實驗裝置:(a)實驗室設(shè)置(b)筒倉罐設(shè)置 結(jié)果光譜(b)顯示低均勻場樣品的偽重復(fù),光譜(c)是所有偽重復(fù)的均值聚合物概述及研究期間進行的處理結(jié)論 本研究創(chuàng)建了一個數(shù)據(jù)集,其中包含10種塑料聚合物的光譜數(shù)據(jù),這些聚合物經(jīng)過了人工風化和人工生物污染處理,以及現(xiàn)場采集的塑料樣品光譜數(shù)據(jù)。采集到的光譜可以作為未來遙感塑料檢測技術(shù)的參考,有助于通過光譜分析了解塑性檢測的復(fù)雜性。并不是所有可能的場景都可以以實驗的方式進行測量,因此該數(shù)據(jù)集可以進一步用于比較和補充數(shù)值模擬。本文中所描述的數(shù)據(jù)集旨在通過增加關(guān)于原始塑料樣品、人工風化和被生物污染的塑料樣品的高光譜反射率的新信息,來補充現(xiàn)有的數(shù)據(jù)集。此外,該數(shù)據(jù)集提出了在各種水濁度條件下獲得的塑料光學(xué)特征,通過在選定濃度的水中添加沉積物或藻類而獲得??傊?,遙感技術(shù)可用于海洋塑料污染的探測、觀察和監(jiān)測。然而,由于缺乏對環(huán)境塑料光學(xué)特征的了解,在設(shè)計適合檢測塑料污染的算法方面就可以邁出一小步。所提出的高光譜數(shù)據(jù)集是在了解塑料碎片暴露于自然介質(zhì)(如紫外線輻射或生物污染)時的光學(xué)特征方面向前邁進了一步。此外,根據(jù)所提供的數(shù)據(jù),可以研究生物污染和風化對不同聚合物的影響。最 后,在本數(shù)據(jù)集中還描述和評估了塑料聚合物的條件(即干燥、潮濕或浸沒在不同濁度下)。因此,本研究預(yù)計該數(shù)據(jù)集將有助于光譜波段的釋義,并協(xié)助開發(fā)用于在(半)操作環(huán)境中觀察、監(jiān)測和識別塑料的算法。
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